耐多药大肠埃希菌AmpC酶基因型及耐药性

目的探讨临床分离耐多药大肠埃希菌(E.coli)产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)现状。方法初筛试验及三维试验:检测产AmpC酶菌株;纸片扩散法(K-B法):测定临床分离71株大肠埃希菌对头孢噻肟(CTX)等10种抗菌药物的抗菌活性;PCR技术检测三维实验阳性菌株的AmpC酶基因。阳性扩增片段送上海生工生物技术公司进行基因测序。结果在71株大肠埃希菌中粗筛阳性产AmpC酶菌株共11株,通过头孢西丁三维试验分离出产AmpC酶的菌株8株,占总菌株数11.27%。药敏结果显示对亚胺培南全敏感,对阿米卡星等9种抗菌药物均有不同程度耐药;耐药模式中以耐多药菌株24株(33.80%);产AmpC酶菌株对多种常用抗生素的耐药率明显高于非产AmpC酶菌株(P<0.05);检测发现2株质粒AmpC酶基因阳性。结论大肠埃希菌的多重耐药的现象突出;产AmpC酶菌株的耐药率明显高于非产AmpC酶菌株;质粒介导的AmpC酶的基因型表现为DHA-1。

不产ESBL大肠埃希菌的质粒AmpC酶基因检测和耐药性分析

目的了解临床分离的不产ESBL的大肠埃希菌质粒AmpC酶基因（DHA，ACT-1）存在状况和菌株的耐药性关系。方法自临床分离60株不产ESBL的大肠埃希菌，采用聚合酶链反应（PCR）检测质粒AmpC酶DHA，ACT-1基因。结果60株大肠埃希菌中质粒AmpC酶DHA，ACT-1基因阳性率分另q为20．O％，30．O％，产酶菌株对三代头孢药物耐药率较高，含酶抑制剂药物的敏感度尚可。结论临床分离的不产ESBL大肠埃希菌对β-内酰胺类药物耐药率较高可能与细菌携带质粒AmpC酶DHA，ACT-1基因有关。

大肠埃希菌质粒型AmpC酶基因的检测分析

目的 调查大肠埃希菌质粒型Ampc酶基因的存在状况。方法 采用MH药敏平板对40株临床分离的大肠埃希菌进行抗菌药物敏感试验和ESBLs纸片法确诊，PcR方法检测DHA和ACT-1型Ampc酶基因。结果 40株大肠埃希菌呈多重耐药，20株ESBLs阳性菌AmpCM基因阳性率90％，20株ESBLs性菌Ampc酶基因阳性率45％，40株大肠埃希菌ACT-1和DHA基因阳性率分别为57．5％，40．0％，有12株大肠埃希菌同时携带ACT-1和DHA基因。结论 临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重，质粒型AmpC酶基因携带率高。

大肠埃希菌尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因研究

近年来,国内关于E.coli产β-内酰胺酶和AmpC酶耐β-内酰胺类药物的研究报道已有不少,但所涉及基因种类不够全面.为系统性地了解E.coli尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况,本研究进行了E.coli可能存在的15种β-内酰胺酶基因、6种AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因检测,结果3类基因均有检出,并发现了3株ompC基因新亚型,已登录美国GenBank（NB015：HQ333474,NB020：GQ501059,NB027：GQ501066）.

铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA基因的发现

目的测定35株同时耐头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA。 方法 用PCR法对铜绿假单胞菌质粒型AmpC酶DHA基因进行检测,并对阳性产物作PCR产物直接DNA测 序。结果35株铜绿假单胞菌DHA基因扩增结果2株呈阳性,其中1株测得序列为DHA-Ⅰ型。结论表明我 国同时耐头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南铜绿假单胞菌也已获得DHA基因,AmpC酶DHA基因可通过 转化、接合等方式转移给其他同种或不同种菌且易于传播,因此加强监控以防DHA基因在国内某些地区的革兰 阴性菌中流行。

二家医院肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因研究

目的了解不同医院间肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因存在情况和耐药性。方法应用聚合酶链反应(PCR)法对耐药的肺炎克雷伯菌连续分离株进行AmpC酶DHA和ACT-1基因检测和分析。结果PCR结果显示A院44株肺炎克雷伯菌中DHA基因阳性4株(9.1%);B院25株肺炎克雷伯菌中DHA基因阳性8株(32.0%),ACT-1基因二家均为阴性,二家医院DHA基因检出率有明显差别(P<0.05)。结论质粒型AmpC酶基因可通过转化、接合等方式转移给其他同种或不同种菌,易于传播。二家医院DHA基因检出率有明显差别,并均己有流行的迹象。

同时携带多种耐药基因导致一株弗劳地枸橼酸盐杆菌产生泛耐药

南昌大学第二附属医院分离到一株泛耐药的弗劳地枸橼酸盐杆菌，该菌对临床常用抗生素伞部耐药。发现多种耐药基凶同时位于该菌中，包括一种新型AmpC酶基因，现报道如下。

阴沟肠杆菌质粒介导耐药基因检测及同源性分析

目的了解质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC)及喹诺酮类耐药(qnr)基因在阴沟肠杆菌中的分布,分析耐药阴沟肠杆菌株间的分子同源性,为指导临床有效控制耐药菌株在医院内的传播提供依据。方法收集2013年6月-2014年6月非重复阴沟肠杆菌174株,采用PCR法对其ESBLs基因(TEM-1、SHV-12、CTX-M-3、SFO-1、VEB-3)、AmpC酶基因(ACT-1、DHA-1)和qnr基因(qnrA、qnrB、qnrS)进行扩增;应用肠杆菌科重复一致序列(ERIC)方法对71株耐药菌株进行DNA分子同源性检测。结果 174株阴沟肠杆菌中β-内酰胺酶基因检出率57.47%,AmpC酶基因检出率22.41%,qnr基因检出率为27.01%;经χ2检验,环丙沙星耐药或敏感株对qnr基因阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05),ESBLs+AmpC酶基因均阴性株与ESBLs、AmpC酶、ESBLs+AmpC酶基因均阳性株对qnr基因阳性检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论阴沟肠杆菌中同时存在不同类型β-内酰胺酶基因和qnr基因,ESBLs耐药基因以TEM-1型为主;ESBLs或AmpC酶基因阳性株可同时携带qnr基因;阴沟肠杆菌在医院内存在部分克隆株散在传播情况。

大肠埃希菌对β-内酰胺类药物耐药特征及分子流行病学研究

目的调查大肠埃希菌尿液分离株中β内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况。方法对宁波市第一医院2008年10月至2009年3月患者尿液样本中分离的大肠埃希菌（28株）采用PCR及序列分析的方法，分析15种阻内酰胺酶基因、6种AmpC酶基因和膜孔蛋白orapC基因。结果28株大肠埃希菌仅对美罗培南和亚胺培南100％敏感。所有分离菌中检出广谱p内酰胺酶基因以TEM-1．1ike为主，共17株（60．7％）、超广谱β内酰胺酶基因以CTX-M-55－like为主，共6株（21．4％）；ampC酶基因CMY-2－like3株（10．7％）；均检出膜孔蛋白ompC基因，且均存在变异。本组菌中TEM-1－like、CTX-M－55．1ike、CMY-2－like和orapC均阳性2株，3种基因同时阳性5株，2种基因同时阳性16株，只检出1种基因5株。菌株亲缘性分析显示，28株大肠埃希菌多耐药中多数菌株已发生演化，只有1号和22号株、14号和15号株这两组携带相同基因。结论本组大肠埃希菌中，β内酰胺酶基因、AmpC酶基因、ompC基因均有检出，这些基因是菌株对β酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。菌株基因多态性明显。