强壮前沟藻(Amphidinium carterae Hulburt)形态特征及其生长特性研究

采用实验室内单种分离培养方法 ,对强壮前沟藻AmphidiniumcarteraeHulburt进行光学显微镜和扫描电镜观察、鉴定 ,描述其形态特征。采用多因子影响强壮前沟藻生长的方法 ,在不同温度 ( 1 8℃、2 3℃、2 8℃ )、不同盐度 ( 1 0、1 7、2 4、30、35 )和不同的光照条件下 ( 380 0lx、2 4 0 0lx)的生长情况 ,以及各种条件组合的相互作用关系 ,进行了环境因子对该藻生长特性影响的研究。结果表明 ,细胞最大生长率的最适温度、光照、盐度条件分别为 1 8℃、380 0lx、30。根据强壮前沟藻的生长特性 ,初步探讨了温度、光照。

前沟藻(Amphidinium hoefleri)和角刺藻(Chaetoceros gracilis)二甲基硫生产的实验研究

用实验室模拟的方法着重研究硅藻的角刺藻（Ｃｈａｅｔｏｃｅｒｏｓｇｒａｃｉｌｉｓ）和浮游甲藻的前沟藻（Ａｍｐｈｉｄｉｎｉｕｍｈｏｅｆｌｅｒｉ）生长过程中ＤＭＳ的生产及不同氮营养条件下对前沟藻ＤＭＳ生产的影响．结果表明：（１）前沟藻和角刺藻都可以生产二甲基硫（ＤＭＳ），但２者ＤＭＳ生产能力有很大差别，前沟藻ＤＭＳ平均生产率大约是角刺藻的１００倍．（２）不同生理阶段的ＤＭＳ产量不同．对数增长期的前沟藻细胞释放ＤＭＳ的能力最强，其ＤＭＳ速率是指数增长期的３倍．静止期和衰老期的前沟藻细胞ＤＭＳ的生产能力下降．（３）低氮条件对前沟藻细胞ＤＭＳ有促进作用．其中低浓度组（０．５ｍｇ／ＬＮａＮＯ３）ＤＭＳ产率是高浓度组（５０ｍｇ／Ｌ）的４倍．

强壮前沟藻(Amphidinium carterae Hulburt)毒素的溶血活性研究

以实验室单种培养的强壮前沟藻为对象,研究了强壮前沟藻毒素的来源,分析了藻毒素浓度与溶血活性的相关性,研究了理化因子对藻毒素溶血活性的影响。结果表明,溶血活性随着强壮前沟藻细胞的增殖呈上升的趋势,细胞内容物和细胞碎片的溶血活性显著高于去藻过滤液,强壮前沟藻毒素主要来源于衰亡期的细胞内容物和细胞碎片,并存在浓度相关的溶血性。强壮前沟藻毒素的溶血活性不存在光敏感性。随着pH的上升,毒素溶血活性呈降低趋势。Ca2+、Mn2+、Cu2+抑制了强壮前沟藻毒素溶血活性,而Co2+、Zn2+显著的增强了溶血活性,Mg2+对其溶血活性的影响不显著。EDTA对强壮前沟藻毒素的溶血活性有显著的促进作用。

Cd对前沟藻(Amphidinium hoefleri)生产二甲基硫(DMS)影响的实验研究

为了探讨Ｃｄ污染对海藻ＤＭＳ生产的可能影响，以模拟实验方式，为期３周进行Ｃｄ对海洋甲藻类的前沟藻（Ａｍｐｈｉｄｉｎｉ－ｕｍｈｏｅｆｌｅｒｉ）生产ＤＭＳ的实验室研究．结果表明，Ｃｄ可以抑制前沟藻种群数量的增长，对照组藻细胞最大数量是高浓度组（１０ｍｇ／Ｌ）的２５倍；Ｃｄ可以促进前沟藻细胞生产ＤＭＳ，其中高浓度组细胞ＤＭＳ产率大约是对照组的１０倍；Ｃｄ对藻数量的抑制作用和对藻生产ＤＭＳ的促进作用共同作用的结果，导致低浓度组（Ｃｄ浓度０．２５ｍｇ／Ｌ）ＤＭＳ浓度高于对照组，而高浓度组（Ｃｄ浓度≥２ｍｇ／Ｌ）ＤＭＳ浓度低于对照组．

强壮前沟藻Amphidinium carterae Hulburt生消过程中水体总吸收特性研究

基于2011年7月藻类培养实验期间的实测数据研究了强壮前沟藻Amphidinium carterae Hulburt生消过程中水体的总吸收特性。结果表明,强壮前沟藻本次培养周期共21天,前15天为生长期,之后进入消亡期;整个生消过程中水体吸收光谱变化明显,未见440nm波段浮游藻类蓝光吸收峰,但675nm波段红光吸收峰突出,消亡期总吸收系数的日变化明显大于生长期,总吸收系数与叶绿素浓度的时间序列变化趋势一致;总吸收系数的波段关系良好,但不同生长时期相同波段的拟合曲线存在显著差别,消亡期的拟合曲线普遍高于生长期,且整体看来随波长增加,两曲线逐渐接近,到667、678nm波段时几乎重合;特征波段(440、675nm)的总吸收系数与叶绿素浓度存在较好的乘幂函数关系,拟合曲线与藻种的生长阶段有关,决定系数均在0.98以上。

UV-B辐射对强壮前沟藻(Amphidinium carterae)和等鞭金藻(Isochrysis galbana)种间竞争的影响

采用共培养的方法,研究了UV-B辐射对不同起始密度强壮前沟藻和等鞭金藻种间竞争的影响。结果表明,在单养时,随着起始密度的增加,2种微藻在生长过程中进入指数生长期和平台期的时间逐渐缩短,所达到的最大种群密度都依次降低。在混养时,当接种比例为A∶I=1∶4和A∶I=1∶1时,等鞭金藻在种间竞争中占有优势;当接种比例为A∶I=4∶1时,强壮前沟藻占有优势。UV-B辐射对两种微藻的种间竞争存在明显的影响。接种比例为A∶I=1∶4时,随着UV-B辐射时间的延长,等鞭金藻对强壮前沟藻的竞争优势逐渐降低,接种比例为A∶I=4∶1时,强壮前沟藻的竞争优势有所加强。

Bioremediation of Bisphenol A by Glycosylation with Immobilized Marine Microalga <i>Amphidinium crassum</i><br>——Bioremediation of Bisphenol a by Immobilized Cells

Glycosylation of bisphenol A, which is an endocrine disrupting chemical, was investigated using immobilized marine microalga and plant cells from the viewpoint of bioremediation of bisphenol A. Immobilized marine microalga of Amphidinium crassum glucosylated bisphenol A to the corresponding glucoside. On the other hand, bisphenol A was glycosylated to its glucoside, diglycoside, gentiobioside, and gentiobiosylglucoside, which was a new compound, by immobilized plant cells of Catharanthus roseus.

The effect of different initial density on Amphidinium carterae Hulburt and Krenia mikimotoi Hansen

The experimental study of the interaction between Amphidinium carterae Hulburt and Krenia mikim otoi Hansen is carried in ecological conditions..The results showed tha in single culture system,A.carterae and K.mikimotoi growth curves Karen Logistic growth model,different initial density ratio could have a significant impact on the growth of two microalgae:With the initial density increases,the exponential phase and stationary phase is due to come earlier,and instantaneous population growth rate(r)and environmental carrying capacity(K)decreased.

强壮前沟藻(Amphidinium carterae Hulbert)在多重逆境条件下的生长和生理响应

尽管单一逆境条件对浮游植物产生的影响已被广泛重视,然而对于多重逆境条件对藻细胞生长生理的研究仍有空白。本研究通过测定强壮前沟藻(Amphidinium carterae Hulbert)光密度(OD750)、叶绿素a含量(chl a)、光合作用效率(F_v/F_m)、碳氮比(C/N)等多个生理指标,分析其在9种环境下(常温光照、低温和低温黑暗三种物理环境,结合全营养、缺氮、缺磷三种营养状态)对多重逆境的生长和生理响应。研究结果表明,在多重逆境条件下,单一物理逆境因素(低温或黑暗)较氮限制或磷限制对藻细胞生长和生理的不利影响更为显著。营养限制并同低温环境双重作用对生物量和碳氮比产生显著性影响(P<0.01)。此外,低温和黑暗条件耦合作用下,SYTOX Green染色强度处于较低水平,chl a稳定、F_v/F_m有所升高,强壮前沟藻在逆境环境下作为群体的衰亡得以缓解。

广西涠洲岛底栖甲藻前沟藻属(Amphidinium)种类的形态学和系统发育学研究

本文对采集自我国广西涠洲岛海域潮下带大型海藻及死珊瑚上的附着底栖甲藻样品进行了分析。利用毛细管单细胞分离方法成功分离并培养了多株前沟藻属种类,运用光学显微镜、扫描电镜和分子生物学等技术,对所获得的前沟藻株系进行形态学和系统发育分析,鉴定出前沟藻属3个种,分别为具盖前沟藻(Amphidinium operculatum)、玛氏前沟藻(Amphidinium massertii)和强壮前沟藻(Amphidinium caeterae),其中具盖前沟藻和玛氏前沟藻为我国新纪录种。分析比较了不同种类间形态和系统发育的差异,发现3种前沟藻的形态特征大体与相应模式种报道的一致。本研究丰富了我国前沟藻种类多样性和系统发育进化信息,同时将两个新记录种具盖前沟藻和玛氏前沟藻的已知分布范围拓展到了我国南部沿海水域。

南海甲藻卡氏前沟藻的生长特性研究

从海南省三亚海域收集分离了甲藻卡氏前沟藻Amphidinium carterae藻种,并在实验室成功进行了人工培养,同时对其生长特性进行了研究。实验结果表明,接种初始的细胞密度对其生长率和最高细胞密度影响很小,实验室培养和大量养殖可以采取低密度接种;最适宜培养的环境条件盐度为34,温度为26℃,营养盐浓度为2K。在温度为18—30℃、盐度为26—42、K培养液浓度系列为1/16—2 K的条件下都可存活,最大指数期平均生长率为0.958分裂.d-1,获得的最大细胞密度为7.27×105cells.ml-1。实验结果与属温带的胶州湾同物种对比,表明该藻种生长特性与温带品系有明显差异。

卡氏前沟藻部分脂溶性成分的GC-MS分析

应用气相色谱-质谱联用对卡氏前沟藻Amphidinium carterae的部分脂溶性成分进行了分析,共鉴定了17个化合物,包括14个脂肪酸甲酯、1个脂肪酸乙酯、1个直链烃以及1个不饱和脂肪醇。其中主要成分为脂肪酸甲酯,占所有相对峰面积的67.39%。

两种海洋微藻——强壮前沟藻与青岛大扁藻之间的相互作用研究

在实验生态条件下研究了两种海洋微藻:强壮前沟藻(Amphidinum carterae Hulburt)和青岛大扁藻(Platymonas helgolondica var.tsingtaoensis)之间的相互作用。结果发现:①在单培养体系中,强壮前沟藻和青岛大扁藻的生长曲线可用逻辑斯谛增长模型拟合:不同的起始密度对两种微藻的环境容量(K)有明显的影响,随着起始密度的增加K有逐渐减小的趋势;两种微藻的种群瞬时增长率(r)与起始接种密度之间也具有明显的相关性:强壮前沟藻的r随起始浓度的增加而增加,而青岛大扁藻的r则随起始密度的增加而减小。②在共培养体系中,两种微藻的r和K都受到了明显的抑制,与对照组(单培养体系)相比差异显著(P<0.05);其中强壮前沟藻受到的抑制作用明显强于青岛大扁藻;通过比较两种微藻的种间竞争系数可知,青岛大扁藻的种间竞争能力明显高于强壮前沟藻,这可能是青岛大扁藻在共培养体系中处于竞争优势的原因之一。

除菌处理对强壮前沟藻和青岛大扁藻生长的影响

对微藻除菌以及未除菌与除菌后微藻生长特性的变化进行了研究.采用抗生素(新霉素、链霉素和卡纳霉素)组合加入的方法,对微藻(强壮前沟藻和青岛大扁藻)进行了无菌化处理.通过吖啶橙染色,镜检观察到与藻细胞共生的细菌经抗生素处理后数量明显减少,从而成功获得了2种无菌海洋微藻的纯藻种.比较了抗生素除菌前后环境细菌对微藻生长的影响,结果表明,除菌后的强壮前沟藻与未除菌的相比,推迟2d进入稳定期,处于稳定期的最大细胞密度比未除菌的提高了24%.除菌后的强壮前沟藻和青岛大扁藻不易老化,可保持良好的悬浮状态.

强壮前沟藻的后向散射特性研究

基于2012年7月藻类培养实验期间的实测生物-光学数据,分析了强壮前沟藻的后向散射特性及其影响因素。结果表明,强壮前沟藻的后向散射系数值具有光谱变化性,并随叶绿素浓度的升高而增大,两者之间呈很好的幂函数关系,相关系数R2最小值可达0.96;此外,由于色素的吸收作用,使得其光谱形状会随叶绿素的变化而变化;同时获得的后向散射比率620nm处的变化范围在0.006 4～0.011 6之间;总体上,各波段颗粒物后向散射比率也呈现随叶绿素浓度增加而增大的趋势,但在高叶绿素浓度下,这种变化规律并不明显,并且就其光谱形状而言,无论叶绿素浓度高低,其光谱形状始终保持一致;颗粒密度是影响后向散射比率的主要因素之一,两者之间呈幂函数关系,相关系数r在620nm处高达0.98。

共培养条件下强壮前沟藻与中肋骨条藻的相互作用

半连续条件下研究了强壮前沟藻与中肋骨条藻不同接种密度下种间的相互作用,按照以下条件:(1)1×104个/cm3强壮前沟藻与1×104个/cm3中肋骨条藻;(2)1×104个/cm3强壮前沟藻与5×104个/cm3中肋骨条藻;(3)1×104个/cm3强壮前沟藻与10×104个/cm3中肋骨条藻接种进行共培养实验;在五种培养滤液中培养中肋骨条藻,起始密度为1×104个/cm3;利用双藻竞争模型分析两者的竞争抑制参数,结果表明:半连续共培养条件下,强壮前沟藻对三种接种密度的中肋骨条藻都产生强烈的生长抑制作用(P<0.05),三种接种密度比例下强壮前沟藻对中肋骨条藻的抑制能力分别是中肋骨条藻对强壮前沟藻抑制能力的8.2,3.4和14.2倍;不同接种密度中肋骨条藻对强壮前沟藻的生长抑制作用并没有显著的差异(P>0.05);中肋骨条藻在五种去藻滤液中生长都受到显著抑制(P<0.05),强壮前沟藻中肋骨条藻与强壮前沟藻共培养实验结果表明,对中肋骨条藻的生长具有抑制作用,这种抑制作用是可以通过分泌胞外产物来实现,而与细胞的直接接触没有必然联系。

前沟藻18S rDNA序列克隆和分子鉴定分析

旨在扩增一株未知微藻18S rDNA,并进行序列分析和物种鉴定分析。提取该微藻总DNA,用PCR技术扩增其18S rDNA,对序列进行测序,在GenBank进行序列比对分析,用Clustal X软件构建进化树;用光学显微镜进行形态学分析。经测序其序列长度为1 736 bp,G+C为47%;同源性分析表明,与GenBank中多个强壮前沟藻种的18S rDNA基因序列同源性达99%;与前沟藻属的其它藻种同源性均达95%以上。而与裸甲藻属和环藻属的藻株同源性为85%左右。经光学显微镜观察,该藻具有典型的强壮前沟藻形态。结合该藻18S rDNA序列分析和粗略的形态学分析,推断该藻可能为前沟藻属的强壮前沟藻。微藻形体微小,结构简单,需借助电子显微镜才可准确地从形态学上鉴定其种属,鉴定工作繁琐费时;而利用分子技术,则可能使鉴定工作变得简单快捷。

氮、磷对克氏前沟藻三亚株生长及产毒特性的影响

以改良K培养液为基础,通过设定不同的N、P浓度水平,探讨N、P营养盐对克氏前沟藻Amphidiniumklebsii(三亚株)生长及产毒特性的影响。研究结果表明,N、P均为影响克氏前沟藻生长和产毒的重要因素。低浓度的N、P(N浓度≤4.665×10 4mol.L 1,P浓度≤2.000×10 5mol.L 1)不利于克氏前沟藻生物量的积累,但能促进其生长及毒素的产生;中浓度的N、P(4.665×10 4mol.L 1<N浓度<37.320×10 4mol.L 1,2.000×10 5mol.L 1<P浓度<16.000×10 5mol.L 1)有利于克氏前沟藻生物量的积累,却不利于毒素的产生;N、P浓度过高(N浓度≥37.320×10 4mol.L 1,P浓度≥16.000×10 5mol.L 1)则会抑制克氏前沟藻的生长,但能促进毒素的产生,并有相对较高的细胞终密度。克氏前沟藻生长的最佳N、P浓度范围分别为4.665×10 4—37.320×10 4mol.L 1和2.000×10 5—16.000×10 5mol.L 1。当N浓度为9.330×10 4mol.L 1,P浓度为4.000×10 5mol.L 1时,克氏前沟藻达到最高密度1.237×105mL 1,单位体积活血活性达到最高值347.48HU.L 1。

强壮前沟藻生消过程中水色组分吸收特性

依据2011-07强壮前沟藻藻种培养实验期间的实测数据,分析了其生消过程中各水色组分的吸收特性。结果表明:在生消过程的始末阶段,以非色素颗粒物和有色可溶性有机物(CDOM)吸收为主,中间阶段,则以浮游植物吸收为主。浮游植物吸收光谱在440nm和675nm存在明显的特征峰;在整个生消周期内先上升后降低,直至消失;非色素颗粒物和CDOM吸收光谱随波长增加均呈指数衰减趋势,前者光谱幅高先增后减,但后者变化无明显规律。各水色组分与叶绿素质量浓度均存在一定的相关关系,无论在生长期或是消亡期,浮游植物、非色素颗粒物吸收系数与叶绿素质量浓度存在正相关关系;但CDOM吸收系数与叶绿素质量浓度在生长期存在正相关关系,而在消亡期变为负相关关系。这可作为改进赤潮水体叶绿素质量浓度遥感算法、有效判别赤潮以及识别赤潮优势藻种等的科学依据。

强壮前沟藻生长的营养需求研究

以强壮前沟藻为材料,采用实验室内单种培养方法,以氮、磷、维生素和微量元素进行四因素三水平正交试验,研究强壮前沟藻生长的营养需求。试验结果表明,磷对强壮前沟藻生长的影响达到显著水平,氮元素对该藻生长的影响也较为显著,而微量元素及维生素对强壮前沟藻生长影响不显著,各因素对强壮前沟藻生长的影响依次为:磷>氮>微量元素>维生素;强壮前沟藻生长的最佳营养条件为氮元素880μmol/L,磷元素108μmol/L,微量元素21.0μmol/L,维生素0.96μmol/L。根据强壮前沟藻生长的营养需求,初步探讨了营养条件对该藻形成赤潮的影响。