红景天苷调控AMPK/Drp1信号通路对急性脑出血大鼠的神经功能的保护机制

目的研究红景天苷(salidroside,Sal)对急性脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠的神经功能保护作用及其机制。方法根据Rosenberg法改良造大鼠ICH神经损伤模型。按照随机性原则将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、Sal低、中、高(50、100、200 mg·kg^(-1))、AMPK激动剂(AICAR)组、阳性药(醒脑静)组,每组各10只。于造模结束1 h后腹腔注射各剂量Sal,连续1周,AMPK激动剂组腹腔注射AICAR(200 mg·kg^(-1)),阳性药组腹腔注射醒脑静注射液(1.8 mL·kg^(-1)),假手术组和模型组腹腔注射等量生理盐水。采用神经评分、脑含水量等检测各组大鼠的神经功能损伤;MitoSOX Red试剂盒检测各组大鼠脑组织ROS水平;ELISA测定血清炎性因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平;TUNEL染色检测各组大鼠神经细胞凋亡情况;Western blot检测相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、AMPK/Drp1的表达。结果与Sham组相比,Model组大鼠神经功能损伤严重,出现明显脑水肿,脑组织内氧化损伤和炎症明显加重且神经细胞出现大量凋亡(P<0.05),Bcl-2、p-Drp1/Drp1蛋白表达明显下调,Bax、cleaved caspase-3、p-AMPK/AMPK蛋白表达明显上调(P<0.05);与Model组相比,Sal各剂量治疗组、阳性药组和AICAR组大鼠神经功能损伤明显减轻,脑水肿情况得到缓解,脑组织内氧化损伤和炎症明显减轻且神经细胞凋亡被抑制(P<0.05),Bcl-2、p-AMPK/AMPK蛋白表达明显上调,Bax、cleaved caspase-3、p-Drp1/Drp1蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论Sal能够有效的保护急性ICH大鼠的神经功能,其作用机制可能与AMPK/Drp1信号通路有关。

三七皂苷通过AMPK/DRP1介导的线粒体裂变减轻过敏性鼻炎

目的探讨三七皂苷(notoginsenoside R1,PNS-R1)是否通过AMP激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/线粒体裂变关键蛋白(dynamin-related protein 1,DRP1)介导的线粒体裂变减轻过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)。方法利用不同剂量PNS-R1治疗卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的AR小鼠,通过观察擦鼻、打喷嚏的过敏症状和鼻组织的HE染色探索PNS-R1在AR中的抑制作用。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IgE水平和鼻灌洗液(nasal lavage fluid,NLF)炎性细胞因子水平,Western blot检测凋亡相关蛋白。在体外,利用IL-13刺激人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNEpC),观察细胞凋亡、线粒体膜电位、细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)和线粒体ROS(mtROS)生成、AMPK/DRP1,TXNIP/NLRP3炎症小体的表达水平以及DRP1易位情况。结果PNS-R1减轻了AR小鼠的过敏症状,HE染色炎性细胞减少,降低血清OVA特异性IgE水平以及NLF中IL-4、IL-6和IL-8的水平。在体外,PNS-R1上调IL-13刺激后的线粒体膜电位,降低ROS和mtROS生成、减少cleaved-caspase-3、Bax和上调Bcl-2表达,以AMPK依赖性方式下调DRP1磷酸化(Ser 616)和DRP1在线粒体膜上的易位,减少TXNIP/NLRP3表达。结论PNS-R1通过抑制AMPK/DRP1信号轴及随后的TXNIP/NLRP3信号轴保护线粒体的完整性,缓解AR。