Raptor对胶质瘤细胞侵袭能力的影响

目的:研究Raptor对于胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:采用RNA干扰技术,向胶质瘤U87细胞转染Raptor限定性siRNA干扰质粒,Western blotting检测转染后细胞Raptor的表达水平以鉴定转染效果。体外侵袭实验检测Raptor表达降低后,U87细胞侵袭能力的变化;Western blotting检测细胞中ARK5的磷酸化情况和MMP-2、MMP-9的表达水平。免疫组织化学法检测低级别及高级别胶质瘤中Raptor的表达水平。结果:转染Raptor siRNA质粒的U87细胞命名为siRaptor/U87,转染对照组质粒的细胞命名为Scr/U87,转染成功的实验组细胞Raptor的表达降低。体外侵袭实验中siRaptor/U87较对照组穿透基质膜的细胞数少(P<0.01)。Western blotting显示实验组细胞中磷酸化ARK5、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平均较对照组低。胶质瘤组织中Raptor的表达与恶化程度存在相关性(P<0.01)。结论:Raptor表达降低可能通过磷酸化ARK5及增加MMP-2、MMP-9的表达促进胶质瘤细胞的侵袭力。

β-catenin ARK5及GCDFP15在乳腺癌组织中的表达及意义

目的分析β联蛋白(beta-catenin,β-catenin)、AMPK相关蛋白激酶5(AMPK-related protein kinase 5,ARK5)及巨囊性病液体蛋白15(gross cystic disease fluid protein 15,GCDFP15)在乳腺癌组织中的表达及意义。方法选取2019年7月—2021年7月余姚市人民医院病理科归档的资料齐全完整的80例乳腺癌组织石蜡标本和距离癌组织边缘5 cm的癌旁组织石蜡标本,另外选取80例结节性乳腺囊肿组织标本,采用免疫组化、实时荧光定量法检测β-catenin、ARK5及GCDFP15表达,分析β-catenin、ARK5及GCDFP15在乳腺癌中的表达变化及三者相关性。结果与癌旁组织相比,结节性乳腺囊肿组织、乳腺癌组织中β-catenin、ARK5、GCDFP15表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05),与结节性乳腺囊肿组织相比,乳腺癌组织中β-catenin、ARK5及GCDFP15表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌中β-catenin、ARK5、GCDFP15表达与乳腺癌患者的年龄、肿瘤直径及病理类型无关,与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及浸润深度相关,Ⅲ期、Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、≥1/2肌层浸润β-catenin、ARK5、GCDFP15表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。β-catenin、ARK5、GCDFP15之间Pearson相关性分析显示,β-catenin与ARK5之间呈正相关(r=0.551,P=0.001);β-catenin与GCDFP15之间呈正相关(r=0.627,P=0.001);ARK5与GCDFP15之间呈正相关(r=0.522,P=0.001)。ROC曲线显示,与β-catenin、ARK5、GCDFP15单项诊断相比,三项联合对乳腺癌的诊断价值较高(P=0.001)。结论β-catenin、ARK5及GCDFP15在乳腺癌组织中表达升高,并随着淋巴结的转移与TNM分期的加重,β-catenin、ARK5及GCDFP15表达升高加剧,参与疾病的发展。