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DHA-1型质粒AmpC酶调控因子AmpR基因检测 被引量:1
1
作者 多丽波 栾英 +1 位作者 张联博 李垚 《中国实验诊断学》 2007年第9期1146-1148,共3页
目的检测DHA-1型质粒AmpC酶诱导性耐药调控因子AmpR基因。方法以我院临床分离产DHA-1型质粒AmpC酶的4株大肠埃希菌和10株肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR),用特异性引物扩增Am-pR调节因子全编码基因,并将一株肺炎克雷伯菌A... 目的检测DHA-1型质粒AmpC酶诱导性耐药调控因子AmpR基因。方法以我院临床分离产DHA-1型质粒AmpC酶的4株大肠埃希菌和10株肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR),用特异性引物扩增Am-pR调节因子全编码基因,并将一株肺炎克雷伯菌AmpR基因克隆到pET-22b(+)载体质粒中测序。结果所有实验菌株AmpR基因检测阳性,重组子AmpR基因测序表明与摩根摩根菌染色体上AmpR基因同源性达99.8%。结论产DHA-1型质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的质粒上存在调控因子AmpR基因。 展开更多
关键词 质粒 AMPC酶 调节基因ampr 序列分析
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易错PCR定向进化技术提高蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10核酸酶活性的研究 被引量:1
2
作者 王珏 吴娜 +2 位作者 张育敏 闫海洋 胡丽丽 《化学与生物工程》 CAS 2022年第2期23-27,51,共6页
以分子伴侣skp修饰的蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)全基因为模板,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,以酵母tRNA为底物建立高通量筛选方法,获得了核酸酶活性提高的AmPR-1... 以分子伴侣skp修饰的蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)全基因为模板,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,以酵母tRNA为底物建立高通量筛选方法,获得了核酸酶活性提高的AmPR-10突变体。经一轮定向进化后,突变体A4的核酸酶活性比野生型提高45%;测序结果显示,突变体A4基因序列在465位增加了1个碱基A,进而由移码突变引起了多肽序列的提前终止,使得突变体A4 C末端缺失了3个氨基酸;从空间上看,AmPR-10基因的突变减小了其C末端α螺旋对空腔的遮蔽作用,有利于目的蛋白与配体或底物的结合。该研究结果对AmPR-10核酸酶活性机制的探讨具有重要意义,为抗病抗逆黄芪植株的培育奠定了理论基础。 展开更多
关键词 易错PCR 定向进化 ampr-10 核酸酶活性
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阴沟肠杆菌纸片扩散药敏实验中抑菌环内菌落与ampR调节基因的关系
3
作者 巢蓓 《常州实用医学》 2010年第4期234-235,共2页
目的探究阴沟肠杆菌抑菌环内的zoner现象与ampR调节基因的关系。方法以头孢噻肟纸片扩散药敏试验为例,对8内酰胺酶等电点抑菌环内菌落和原始株进行分析,研究与ampR调节基因的关系。结果15/20株在抑菌环内出现小菌落,5株出现ampR基... 目的探究阴沟肠杆菌抑菌环内的zoner现象与ampR调节基因的关系。方法以头孢噻肟纸片扩散药敏试验为例,对8内酰胺酶等电点抑菌环内菌落和原始株进行分析,研究与ampR调节基因的关系。结果15/20株在抑菌环内出现小菌落,5株出现ampR基因突变。结论抑菌环内菌落的出现与ampR调节基因突变存在一定的关系。 展开更多
关键词 zoner ampr基因
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蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10及其突变体的外源表达和活性测定
4
作者 王珏 吴娜 +2 位作者 张育敏 翟丽娟 胡丽丽 《山西中医药大学学报》 2022年第2期111-115,共5页
目的:蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)具有核酸酶活性,对黄芪生长发育的抗病过程有重要作用。为进一步提高野生型AmPR-10的活性,设计了相应突变体,并分析其表达量和活性较野生... 目的:蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)具有核酸酶活性,对黄芪生长发育的抗病过程有重要作用。为进一步提高野生型AmPR-10的活性,设计了相应突变体,并分析其表达量和活性较野生型的变化。方法:通过理性分析发现野生型AmPR-10的Ser(84)、Gly(140)、Glu(141)突变后会影响目标蛋白的空间结构、降低底物单核苷酸的对接自由能,据此设计合成了两个突变体M1:S84D+G140V、M2:S84D+G140V+E141M,并对野生型AmPR-10与M1、M2分别进行外源低温诱导表达,同时测定了他们的核酸酶活性和抗菌抑菌作用。结果:突变体M1、M2经诱导后表达量和核酸酶活性皆高于野生型,其中M1、M2核酸酶活性分别为野生型的1.46倍及1.45倍;突变体M1可对金黄色葡萄球菌产生抑菌作用,抑菌环大小约为5 mm。结论:AmPR-10突变体的活性较野生型有所提高,这一结果有利于深入探讨AmPR-10的相关活性机制,为抗病黄芪的育种奠定理论依据。 展开更多
关键词 ampr-10 突变体 外源表达 活性测定
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同源蛋白序列比对探讨AmPR-10核酸酶活性机理 被引量:4
5
作者 王珏 胡丽丽 +2 位作者 李桂兰 吴娜 张育敏 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期48-52,共5页
蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)对黄芪生长发育及抗病机制有重要意义。研究检测出以大肠杆菌为宿主外源表达的AmPR-10具有核酸酶活性。将AmPR-10与其同源的7个已证明具有核酸... 蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)对黄芪生长发育及抗病机制有重要意义。研究检测出以大肠杆菌为宿主外源表达的AmPR-10具有核酸酶活性。将AmPR-10与其同源的7个已证明具有核酸酶活性的蛋白进行氨基酸序列比对,发现AmPR-10基因有4个高保守区段,分别是:14~24位、44~55位、64~70位及83~88位。其中第一段保守区与C-末端的α螺旋在空间上形成较强的疏水区以稳定蛋白空腔的结构,利于AmPR-10在抵御侵害时功能的发挥;另由分子对接和氨基酸单点突变发现第4段保守区的83位Tyr是AmPR-10具有核酸酶活性的关键位点,其突变会影响目标蛋白与底物结合的稳定性,而非保守区域140位Gly可作为基因进化的参考位点,当突变为Asn、Val及Trp时,AmPR-10与底物的结合自由能下降。以上结果对深入理解及优化AmPR-10的核酸酶活性具有理论指导意义。 展开更多
关键词 蒙古黄芪病程相关蛋白 同源蛋白 分子对接 核酸酶活性
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AmpC酶转录调控因子AmpR研究进展
6
作者 贺飞 多丽波 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1495-1497,共3页
关键词 AMPC酶 ampr蛋白 转录调控因子 细菌耐药性
原文传递
蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究 被引量:9
7
作者 任晋宏 王永辉 +5 位作者 薛慧清 刘晔 Divid Adelson 陈薛静 李敏 高丽 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第19期3945-3953,共9页
目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提... 目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提后阴离子交换色谱捕获目标蛋白,疏水色谱精细分离,凝胶滤过色谱进一步精细分离得到AmPR-10。采用MALDI-TOF/TOF质谱法测定相对分子质量,质谱检测后MS/MS Ion Search检索鉴定蛋白,高碘酸-Schiff法判断是否为糖蛋白,琼脂糖凝胶电泳分析核糖核酸酶活性及不同影响因素对核糖核酸酶活性的影响。结果蒙古黄芪粗提液经Q Sepharose Fast Flow、Butyl Sepharose High Performance和SuperdexTM 75 10/300 GL 3步纯化后可得到电泳纯AmPR-10;质谱测定其相对分子质量为16 801;蛋白鉴定其属于PR-10蛋白家族;糖蛋白染色显示其不含糖链。AmPR-10具有显著的核糖核酸酶活性,且其活性对Na Cl浓度、pH值和金属离子的敏感度低,仅0.5 mol/L NaCl、pH 9.0、Mg^(2+)和Co^(2+)对其有微弱的抑制作用,EDTA对AmPR-10核糖核酸酶活性无影响。结论离子交换色谱-疏水色谱-凝胶过滤色谱3步法纯化AmPR-10快速稳定,可应用于其他中药蛋白质的分离纯化。AmPR-10可能在蒙古黄芪抵御RNA病毒侵染中发挥重要作用。 展开更多
关键词 蒙古黄芪 ampr-10 AKTA Avant25 纯化 核糖核酸酶 活性蛋白 生物学活性 MALDI-TOF/TOF质谱法 高碘酸-Schiff法
原文传递
头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌分子生物学研究 被引量:2
8
作者 栾英 贺飞 +2 位作者 李桂玲 何昕 多丽波 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第3期206-209,共4页
目的检测本院分离的对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌分子生物学特点。方法以本院临床分离的一株对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR),分别用特异性引物进行AmpC酶全编码基因及AmpR调节基因的扩增,并且构建pET-2... 目的检测本院分离的对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌分子生物学特点。方法以本院临床分离的一株对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR),分别用特异性引物进行AmpC酶全编码基因及AmpR调节基因的扩增,并且构建pET-22b(+)-AmpR的表达质粒和表达菌株。结果 PCR分别扩增出约1 140 bp和876 bpDNA片段,经测序证实,1 140 bp的序列与摩根摩根菌染色体上AmpC酶全长编码基因同源性达99.1%,876 bp的序列与摩根摩根菌染色体上AmpR基因同源性达98%。重组质粒pET-22b(+)-AmpR转化E.coli BL21(DE3)后表达融合蛋白的相对分子量为34 kD,与预期分子量相符。结论对头孢西丁耐药的肺炎克雷伯菌质粒上存在调控因子AmpR,能够表达AmpR蛋白,诱导性耐药机制同样存在于质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶中。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 AMPC酶 调控因子ampr 诱导性耐药 融合蛋白
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基于支持向量机预测偏振模式 被引量:5
9
作者 汪方斌 洪津 +2 位作者 孙晓兵 王羿 胡亚东 《光学精密工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2914-2922,共9页
基于多光谱多角度偏振辐射探测研究了大气偏振模式预测方法。首先,介绍了航空多角度偏振辐射计的探测原理与支持向量机回归算法;然后,从矢量传输模型出发,说明大气状况不变时,偏振模式主要取决于地表特征与观测几何,并介绍了观测几何与... 基于多光谱多角度偏振辐射探测研究了大气偏振模式预测方法。首先,介绍了航空多角度偏振辐射计的探测原理与支持向量机回归算法;然后,从矢量传输模型出发,说明大气状况不变时,偏振模式主要取决于地表特征与观测几何,并介绍了观测几何与姿态之间的关系以及地表特征的表达形式;最后,在考虑平台姿态与地表特征的情况下,利用支持向量机回归算法预测了航空多角度偏振辐射计的探测偏振度,并对预测与实际试验探测的偏振度进行了比较。结果显示:偏振度预测误差小于1%,影响模型精度的主要因素不是姿态变化本身,而是姿态改变造成的观测地表特性变化。 展开更多
关键词 大气遥感 大气偏振模式 预测 支持向量机 航空多角度偏振辐射计
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中亚热带择伐阔叶林与人促阔叶林对比评价 被引量:8
10
作者 黄清麟 董乃钧 李元红 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期342-346,共5页
中亚热带现有强度择伐阔叶林在林分生长、直接经济效益上不如人促阔叶林;在群落结构、树种组成、物种多样性、直径结构等方面与人促阔叶林相近.
关键词 择伐阔叶林 人促阔叶林 中亚热带 生态效益
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Retrieval of Aerosol Optical Properties over a Vegetation Surface Using Multi-angular, Multi-spectral, and Polarized Data 被引量:5
11
作者 WANG Han SUN Xiaobing +3 位作者 SUN Bin LIANG Tianquan LI Cuili HONG Jin 《Advances in Atmospheric Sciences》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期879-887,共9页
An algorithm to retrieve aerosol optical properties using multi-angular,multi-spectral,and polarized data without a priori knowledge of the land surface was developed.In the algorithm,the surface polarized reflectance... An algorithm to retrieve aerosol optical properties using multi-angular,multi-spectral,and polarized data without a priori knowledge of the land surface was developed.In the algorithm,the surface polarized reflectance was estimated by eliminating the atmospheric scattering from measured polarized reflectance at 1640 nm.A lookup table (LUT) and an iterative method were adopted in the algorithm to retrieve the aerosol optical thickness (AOT,at 665 nm) and the (A)ngstr(o)m exponent (computed between the AOTs at 665 and 865 nm).Experiments were performed in Tianjin to verify the algorithm.Data were provided by a newly developed airborne instrument,the Advanced Atmosphere Multi-angle Polarization Radiometer (AMPR).The AMPR measurements over the target field agreed well with the nearby ground-based sun photometer.An algorithm based on Research Scanning Polarimeter (RSP) measurements was introduced to validate the observational measurements along a flight path over Tianjin.The retrievals were consistent between the two algorithms.The AMPR algorithm shows potential in retrieving aerosol optical properties over a vegetation surface. 展开更多
关键词 multi-angle multi-spectra polarization measurement aerosol optical properties ampr
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植物源活性物防治作物细菌性青枯病研究进展 被引量:5
12
作者 尹维 廖晓兰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期84-87,共4页
作物细菌性青枯病作为最严重的作物病害之一,传统的防治方法不能满足现代生态农业的要求,因而环保、高效的生物防治,特别是利用植物源活性物进行生物防治成为研究热点。综述了近年国内外利用植物源活性物防治作物青枯病的报道,概括了植... 作物细菌性青枯病作为最严重的作物病害之一,传统的防治方法不能满足现代生态农业的要求,因而环保、高效的生物防治,特别是利用植物源活性物进行生物防治成为研究热点。综述了近年国内外利用植物源活性物防治作物青枯病的报道,概括了植物源活性物防治作物青枯病的成果,可为开发、研究新型生物农药提供参考。 展开更多
关键词 细菌性青枯病 植物源活性物 生物防治
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皆伐对一代和二代人促米槠林分特征的影响 被引量:2
13
作者 李丽婷 《山地学报》 CSCD 2004年第3期310-314,共5页
皆伐形成的一代(8a生)和二代(6a生)人促米槠林的群落结构、组成树种、物种多样性、直径结构等均相近;但一代人促米槠林以有性(实生)起源为主,二代人促米槠林以无性(萌芽)起源为主,二代林分生产力明显大于一代林分,充分体现萌芽更新的早... 皆伐形成的一代(8a生)和二代(6a生)人促米槠林的群落结构、组成树种、物种多样性、直径结构等均相近;但一代人促米槠林以有性(实生)起源为主,二代人促米槠林以无性(萌芽)起源为主,二代林分生产力明显大于一代林分,充分体现萌芽更新的早期速生性。 展开更多
关键词 皆伐 一代 二代 米槠林 人工促进天然更新
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基于分层的55a生人促米槠林特征 被引量:1
14
作者 李志明 《林业资源管理》 北大核心 2018年第3期88-92,共5页
55a生人促(AMRP)米槠林乔木层层次结构分化明显,应用最大受光面(MLRP)法可将乔木层明显划分为2个亚层。第Ⅰ亚层树高≥17.6 m。乔木层共有25种树种,米槠占绝对优势,重要值达150.96%,是典型的米槠单优群落,第Ⅰ亚层有7种树种,米槠占绝对... 55a生人促(AMRP)米槠林乔木层层次结构分化明显,应用最大受光面(MLRP)法可将乔木层明显划分为2个亚层。第Ⅰ亚层树高≥17.6 m。乔木层共有25种树种,米槠占绝对优势,重要值达150.96%,是典型的米槠单优群落,第Ⅰ亚层有7种树种,米槠占绝对优势,重要值达218.20%;第Ⅱ亚层有25种树种。乔木层物种丰富度S、多样性指数SW、均匀度E和生态优势度ED分别为25,2.92,0.63和0.29,其中第Ⅰ亚层分别为7,1.08,0.23,0.68;第Ⅱ亚层分别为25,3.95,0.85,0.10。全林平均胸径24.69 cm,平均树高23.11 m,株数密度1 208株/hm^2,单位面积蓄积量612.73 m^3/hm^2。第Ⅰ亚层和第Ⅱ亚层的平均胸径分别为32.84 cm和10.99 cm。第Ⅰ亚层和第Ⅱ亚层的平均树高分别为24.31 m和11.99 m。第Ⅰ亚层和第Ⅱ亚层的株数密度分布占全林的51.03%和48.97%,单位面积蓄积量分布占全林的94.46%和5.54%。 展开更多
关键词 米槠林 林分特征 最大受光面法 人工促进天然更新 物种多样性
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基于分层的34a生人促木荷林树种组成与多样性
15
作者 李志明 《林业资源管理》 北大核心 2019年第3期94-98,106,共6页
34a生人促木荷林乔木层层次结构分化明显,应用最大受光面(MLRP)法可将乔木层明显划分为2个亚层,第Ⅰ亚层树高≥16.5m。乔木层共有33种树种,木荷重要值最大,达28.68%,是典型的木荷群落;第Ⅰ亚层有8种树种,木荷占绝对优势,重要值达49.77%... 34a生人促木荷林乔木层层次结构分化明显,应用最大受光面(MLRP)法可将乔木层明显划分为2个亚层,第Ⅰ亚层树高≥16.5m。乔木层共有33种树种,木荷重要值最大,达28.68%,是典型的木荷群落;第Ⅰ亚层有8种树种,木荷占绝对优势,重要值达49.77%;第Ⅱ亚层有30种树种。乔木层物种丰富度S、多样性指数SW、均匀度E和生态优势度ED分别为33,4.37,0.87和0.08,其中第Ⅰ亚层分别为8,2.40,0.48,0.26;第Ⅱ亚层分别为30,4.41,0.88,0.06。全林平均胸径14.2cm,平均树高18.4m,株数密度1875株/hm2,单位面积蓄积量262.9m3/hm2。第Ⅰ亚层和第Ⅱ亚层的平均胸径分别为23.9cm和9.6cm,平均树高分别为21.9m和12.1m。第Ⅰ亚层和第Ⅱ亚层的株数密度分布占全林的23.0%和77.0%,单位面积蓄积量分布占全林的75.2%和24.8%。 展开更多
关键词 人工促进天然更新 木荷林 树种组成 物种多样性 最大受光面法
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