反复种植失败患者子宫内膜CD138阳性对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的:研究不明原因反复种植失败(RIF)患者子宫内膜CD138阳性对体外受精-胚胎移植周期临床妊娠结局的影响。方法:选取2019年7月至2023年5月温州医科大学附属第一医院收治的不明原因RIF患者332例(352个周期),行子宫内膜活检,免疫组化法查CD138阳性细胞。根据检测结果分成CD138阳性组和CD138阴性组,并按照每20个高倍镜视野(20 HPFs)下CD138阳性的数量分成1~5个/20 HPFs组,6~20个/20 HPFs组和>20个/20 HPFs组。对部分CD138阳性患者进行抗生素治疗,并随访妊娠结局。结果:在352个周期中,181个周期CD138检测阳性,阳性率为51.42%。其中1~5个/20 HPFs组有72个周期(39.78%),6~20个/20 HPFs组有63个周期(34.81%),>20个/20 HPFs组有46个周期(25.41%)。多因素Logistic回归分析结果显示,CD138阳性是影响临床妊娠的因素之一(OR=-0.474,95%CI=0.395~0.98,P=0.041)。CD138阳性组的临床妊娠率、胚胎种植率显著低于CD138阴性组(P<0.05)。当CD138阳性细胞数>20个/20 HPFs时,临床妊娠率和胚胎种植率显著低于CD138阴性组(P<0.05)。当C138个数少于5个/20 HPFs时,抗生素治疗和未治疗组妊娠结局差异无统计学意义(P>0.05)。CD138阳性患者抗生素治疗后持续阳性时,其临床妊娠率、胚胎种植率和活产率显著低于初检阴性和治疗后转阴患者(P<0.05);治疗后转阴患者和初检阴性患者的临床妊娠率、胚胎种植率和活产率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:子宫内膜的CD138阳性细胞数>20个/20 HPFs降低了胚胎种植率、临床妊娠率,抗生素治疗后转阴可以改善妊娠结局,但持续阳性将影响妊娠结局。少量的CD138阳性(<5个/20 HPFs)对妊娠结局无明显影响。

结直肠癌组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白的表达变化及其意义

目的观察结直肠癌(CRC)组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DNA损伤结合蛋白1和CUL4相关因子7(DCAF7)蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法CRC患者98例,均接受手术治疗,术中留取CRC组织和癌旁组织,采用Real-time PCR法检测CRC组织和癌旁组织中miR-138-5p、miR-876-5p,采用蛋白印迹法检测CRC组织和癌旁组织中DCAF7蛋白,分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者临床病理参数的关系。以CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量的中位数为临界值,将CRC患者分为miR-138-5p高表达组和miR-138-5p低表达组、miR-876-5p高表达组和miR-876-5p低表达组、DCAF7蛋白高表达组和DCAF7蛋白低表达组,并分析miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者预后的关系。结果CRC组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量分别为1.36±0.29、1.41±0.36、0.59±0.19,癌旁组织中miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量分别为2.15±0.48、2.08±0.44、0.20±0.08,两者相比,P均<0.05。miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者是否合并淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关(P均<0.05)。miR-138-5p低表达组3年总体生存率为67.3%,miR-138-5p高表达组3年总体生存率为86.6%,两组相比,P<0.05。miR-876-5p低表达组3年总体生存率为66.7%,miR-876-5p高表达组3年总体生存率为85.1%,两组相比,P<0.05。DCAF7蛋白高表达组3年总体生存率为67.2%,DCAF7蛋白低表达组3年总体生存率为87.5%,两组相比,P<0.05。结论CRC组织中miR-138-5p低表达、miR-876-5p低表达、DCAF7蛋白高表达,miR-138-5p、miR-876-5p、DCAF7蛋白相对表达量与CRC患者是否合并淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关。与miR-138-5p高表达、miR-876-5p高表达、DCAF7蛋白低表达的CRC患者相比,miR-138-5p低表达、miR-876-5p低表达、DCAF7蛋白高表达的CRC患者术后3年总体生存率低。

Anle138b对oAβ_(1-42)诱导大鼠海马神经元线粒体功能损伤的影响

目的探究Anle138b对慢性β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元线粒体功能损伤的影响。方法取出生24 h以内的SD乳鼠,原代培养海马神经元,待细胞成熟将其分为对照组(不进行任何处理)、oAβ_(1-42)组(100 nmol/L oAβ_(1-42)处理7 d)、oAβ_(1-42)+Anle138b组(100 nmol/L oAβ_(1-42)+100 nmol/L Anle138b共处理7 d)、Anle138b组(100 nmol/L Anle138b处理7 d)。各组处理结束后,应用流式细胞术检测活性氧(ROS)和线粒体膜电位(Δψm)阳性细胞的变化。结果析因设计的方差分析显示,oAβ_(1-42)和Anle138b的主效应明显(F_(oAβ1-42)=14.149、38.209,F_(Anle138b)=1.942、24.871,P<0.01),oAβ_(1-42)和Anle138b之间有交互性作用(F_(交互)=18.425、21.904,P<0.01)。单独效应分析显示,用oAβ_(1-42)处理时,Anle138b的处理效应明显(F=16.483、19.148,P<0.01);不用Anle138b处理时,oAβ_(1-42)的处理效应明显(F=14.149、38.209,P<0.01)。结论Anle138b可以减轻oAβ_(1-42)引起的海马神经元氧化应激和线粒体损伤,抑制oAβ_(1-42)对海马神经元的损伤。

miR-138靶向HIF-1α介导NLRP3炎症小体对脑卒中大鼠神经元凋亡的影响

目的探究微小RNA(miR)-138对缺氧诱导因子(HIF)-1α和Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3通路的调控作用及对脑卒中大鼠神经元凋亡的影响。方法收集60例脑卒中患者及20例健康体检者血清,qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测miR-138表达。中动脉线栓阻塞法建立大鼠脑卒中模型,设置假手术组、模型组、miR-138激动剂(miR-138 agomir)组、agomir-NC组、HIF-1α激活剂组、miR-138 agomir+HIF-1α激活剂组,每组15只。改良神经功能损害程度评分(mNSS)检测神经功能缺损症状;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死面积;尼氏及TUNEL染色法检测神经元损伤及凋亡;免疫组化法检测海马组织M1型巨噬细胞极化表面标志物CD11c、NLRP3阳性表达;Western印迹检测HIF-1α、NLRP3、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、半胱天冬蛋白酶(Caspase)-1、pro-Caspase-1蛋白表达。结果miR-138在脑卒中患者血清中表达较健康者显著降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组海马组织神经元损伤及凋亡加重,促炎表型的巨噬细胞浸润明显(CD11c阳性表达升高),脑梗死面积及神经功能缺损评分升高,miR-138表达降低,HIF-1α活化介导的NLRP3炎症小体活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-138 agomir干预治疗可缓解脑卒中大鼠神经元损伤及凋亡,降低脑梗死面积及神经功能缺损评分,抑制HIF-1α活化介导的NLRP3炎症小体激活发挥的促炎作用,差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α激活剂可加重脑卒中大鼠神经元损伤及凋亡,并削弱miR-138 agomir发挥的抗HIF-1α/NLRP3活化、抗炎及抗凋亡作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-138表达,可通过抑制HIF-1α介导的NLRP3炎症小体活化,发挥抗脑卒中后神经元凋亡作用。

沉默lncRNA MCF2L-AS1通过miR-138-5p/AnxA2轴抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探究lncRNA MCF2L-AS1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响与机制。方法:qRT-PCR检测正常人乳腺上皮细胞系MCF-10A、乳腺癌细胞系(MDA-MB-415、MCF7、SKBR3、MDA-MB-231)中lncRNA MCF2L-AS1、miR-138-5p水平;将si-NC、si-MCF2L-AS1、si-MCF2L-AS1+inhibitor NC、si-MCF2L-AS1+miR-138-5p inhibitor分别转染至MDA-MB-415细胞并命名为si-NC组、si-MCF2L-AS1组、si-MCF2L-AS1+inhibitor NC组、si-MCF2L-AS1+miR-138-5p inhibitor组,未做任何处理的MDA-MB-415细胞记为NC组。qRT-PCR检测MDA-MB-415细胞中lncRNA MCF2L-AS1、miR-138-5p表达;MTT法检测MDA-MB-415细胞增殖情况;流式细胞术检测MDA-MB-415细胞凋亡率;Transwell检测MDA-MB-415细胞侵袭、迁移数量;Western blot检测MDA-MB-415细胞E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、AnxA2蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA MCF2L-AS1、miR-138-5p、AnxA2的关系;小鼠异种移植实验检测肿瘤生长。结果:与MCF-10A细胞相比,MDA-MB-415、MCF7、SKBR3、MDA-MB-231细胞中lncRNA MCF2L-AS1、AnxA2水平显著上调(P<0.05),miR-138-5p表达显著下调(P<0.05)。与NC组、si-NC组相比,si-MCF2L-AS1组MDA-MB-415细胞OD 560 nm值、迁移、侵袭细胞数量、lncRNA MCF2L-AS1表达、N-cadherin、Vimentin蛋白水平、小鼠肿瘤体积、肿瘤质量显著下降(P<0.05),MDA-MB-415细胞凋亡率、miR-138-5p表达、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05);而抑制miR-138-5p表达减弱了沉默lncRNA MCF2L-AS1抑制MDA-MB-415细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长的效果;lncRNA MCF2L-AS1负向调控miR-138-5p/AnxA2轴。结论:沉默lncRNA MCF2L-AS1可能通过上调miR-138-5p来下调AnxA2的表达,进而抑制乳腺癌MDA-MB-415细胞增殖、迁移和侵袭。

老年急性脑梗死患者血清circTTC3和miR-138-5p水平变化及意义

目的探究老年急性脑梗死(ACI)患者血清环状RNA TTC3(circTTC3)和微小RNA-138-5p(miR-138-5p)水平变化及意义。方法选取2021年9月—2023年9月四川大学华西医院老年医学中心/干部医疗科诊治老年ACI患者128例(ACI组),根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)分为轻度亚组42例、中度亚组49例和重度亚组37例,同期医院门诊体检的健康人员120例作为健康对照组;采用实时荧光定量PCR法测定血清circTTC3和miR-138-5p表达水平,Pearson法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p的相关性,Spearman法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p表达水平与NIHSS评分相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circTTC3和miR-138-5p表达水平对老年ACI患者神经缺损程度的诊断价值。结果与健康对照组比较,ACI组血清circTTC3表达水平升高,miR-138-5p降低(t/P=17.207/<0.001、16.239/<0.001)。血清circTTC3水平比较,轻度亚组<中度亚组<重度亚组,miR-138-5p表达水平比较,轻度亚组>中度亚组>重度亚组(F/P=26.579/<0.001、105.935/<0.001)。老年ACI患者血清circTTC3表达水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.521,P<0.001),与大脑中动脉(MCA)、大脑前动脉(ACA)血流速度呈负相关(r=-0.425、-0.392,P均<0.001);miR-138-5p表达水平与NIHSS评分呈负相关(r=-0.785,P<0.001),与MCA、ACA血流速度呈正相关(r=0.571、0.635,P均<0.001)。circTTC3、miR-138-5p及二者联合诊断ACI神经缺损程度的AUC分别为0.817、0.810、0.878,二者联合诊断价值优于单独诊断(Z/P=2.106/0.035、2.406/0.016)。结论老年ACI患者血清circTTC3表达水平升高,miR-138-5p表达水平降低,二者与患者病情的严重程度密切相关,可能作为ACI病情诊断、治疗相关的作用靶点。

miR⁃138⁃5p靶向Nir1调控胶质瘤细胞的侵袭

目的 探讨miR-138-5p与PYK2 N端结构域相互作用受体1(PYK2 N-terminal domain-interacting receptor 1,Nir1)之间的关系并判断其是否通过与Nir1结合影响胶质瘤的侵袭。方法 比较不同胶质瘤细胞系中miR-138-5p表达水平及其对胶质瘤细胞U251和H4中Nir1蛋白的影响、转染后胶质瘤细胞侵袭能力,检测miR-138-5p能否与Nir1靶向结合。结果 低侵袭人胶质瘤H4细胞中miR-138-5p的水平显著高于高侵袭性的胶质瘤U251、LN229和U87细胞(P<0.05);在U251、H4细胞中,miR-138-5p过表达组Nir1蛋白表达量较其对照组(miR-negative control,miR-NC)降低;miR-138-5p抑制组中Nir1蛋白表达量较其对照组(inhibitor NC)升高。然而,miR-138-5p过表达组中Nir1的mRNA水平较其对照组无明显改变(P>0.05)。miR-138-5p过表达组穿过基底膜小孔的U251、H4细胞数明显少于其对照组(P<0.05)。miR-138-5p过表达显著降低Nir1-3’-UTR的荧光素酶活性。结论 胶质瘤细胞中miR-138-5p与Nir1结合,可通过降低Nir1的翻译、减少Nir1蛋白的表达抑制胶质瘤细胞的侵袭能力。

miR⁃138⁃5p在骨关节炎中作用机制的研究进展

miR⁃138⁃5p作为一种微小RNA,在骨关节炎发病中起重要调节作用,其可通过NF⁃κB、Wnt/β⁃catenin、PI3K/AKT等信号通路作用调节细胞的炎症、细胞凋亡与增殖、基质降解等生物学过程进而影响骨关节炎的发生和发展。笔者就miR⁃138⁃5p对骨关节炎作用机制的研究进展作一综述。

miR-138-5p靶向调控SOX4对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响

目的:研究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)通过调控SOX4抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡的机制。方法:分别利用miR-NC与miR-138-5p体外模拟物(mimics)转染骨肉瘤细胞系MG63,构建阴性对照与miR-138-5p上调表达模型;采用CCK8法检测细胞增殖活力;采用Transwell实验检测细胞侵袭能力和迁移能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡变化;通过双荧光素酶活检检测miR-138-5p与SOX4的相互作用关系;利用Real-time PCR(RT-PCR)法检测不同处理组中miR-138-5p与SOX4的mRNA水平表达变化;利用Western blot法检测不同处理组中SOX4及凋亡相关蛋白BAX与BCL2的表达变化。结果:利用miR-138-5p mimics转染MG63细胞后,细胞中miR-138-5p表达较对照组显著上调(t=8.661,P=0.001);miR-NC与miR-138-5p mimics分别转染细胞24 h、48 h以及72 h后,CCK8结果显示MG63细胞的增殖能力较对照组显著降低(24 h:t=4.145,P=0.0032;48 h:t=13.88,P<0.0001;72 h:t=14.78,P<0.0001);Transwell实验结果显示与miR-NC组相比,miR-138-5p mimics组细胞侵袭能力显著下降(t=6.573,P=0.0028),迁移水平大幅度降低(t=3.01,P=0.0395);流式细胞仪结果显示miR-138-5p mimics组MG63细胞的凋亡水平较miR-NC组显著升高(t=10.3,P=0.0005);RT-PCR和Western blot实验分别证实miR-138-5p转染后,骨肉瘤细胞中SOX4的mRNA和蛋白水平表达均受到明显抑制;而凋亡相关蛋白BAX表达升高,抗凋亡蛋白BCL2表达降低。结论:miR-138-5p通过靶向下调SOX4的表达参与抑制骨肉瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡。

宫腔镜联合CD138及子宫内膜微生态检测对慢性子宫内膜炎的诊断价值

目的探讨宫腔镜联合白细胞分化抗原138(CD138)及子宫内膜微生态检测对慢性子宫内膜炎(CE)的诊断价值。方法纳入2020-06—2023-05郑州大学第二附属医院生殖医学部收治的行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败的541例患者,A组(101例)行宫腔镜联合CD138及子宫内膜微生物组群检查,B组(240例)行宫腔镜联合CD138,C组(200例)行宫腔镜检查。分析三种检查方法对CE的诊断价值。结果A组、B组、C组CE的检出率分别为74.26%、62.50%、51.50%,差异有统计学意义(P<0.05)。C组宫腔镜的漏诊率为16.67%,B组的漏诊率为9.90%。三联诊断的准确率高于三者单独诊断与二联诊断(P<0.05)。结论宫腔镜联合CD138与子宫内膜微生物组群检测,能提高IVF-ET失败患者的CE检出率,降低漏诊率,并指导临床精准治疗。

非小细胞肺癌患者血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达与病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清长链非编码RNA序列相似性家族138成员B(LncRNA FAM138B)、微小RNA-105-5p(miR-105-5p)表达与病理特征的预后的关系。方法选取2018年1月至2019年12月收治的110例NSCLC患者为NSCLC组,另选取同期60例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达。分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达与NSCLC患者病理特征的关系。StarBase数据库预测LncRNA FAM138B与miR-105-5p的关系。采用Pearson相关性分析NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达的相关性,多因素Cox回归分析NSCLC患者预后影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达对NSCLC患者预后的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清LncRNA FAM138B表达降低,miR-105-5p表达升高(P<0.05)。经StarBase数据库预测,LncRNA FAM138B与miR-105-5p存在互补序列。Pearson相关性分析显示,NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达呈负相关(r=-0.770,P<0.001)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。110例NSCLC患者3年总生存率为56.36%(62/110)。K-M生存曲线分析显示,LncRNA FAM138B高表达组总生存率高于低表达组,miR-105-5p高表达组总生存率高于低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移和miR-105-5p≥1.494为NSCLC患者死亡的独立危险因素,LncRNA FAM138B≥0.871为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达单独与联合预测NSCLC患者预后的曲线下面积分别为0.783、0.779、0.905,二项联合预测的曲线下面积最大(P<0.05)。结论NSCLC患者血清LncRNA FAM138B低表达,miR-105-5p高表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为NSCLC患者预后的辅助预测指标。

MUM-1、CD138、CD38对慢性子宫内膜炎的诊断价值及其与生殖预后的关系

目的分析多发性骨髓瘤癌基因-1(MUM-1)、白细胞分化抗原(CD)138、CD38在对慢性子宫内膜炎(CE)中的诊断价值及其与生殖预后的关系。方法选取2018年1月至2021年12月因不孕症于山东省济南市第二妇幼保健院生殖健康科就诊,并在山东大学齐鲁医院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的194例患者作为研究对象。所有研究对象术前均接受宫腔镜检查,记录宫腔情况,取子宫内膜组织进行MUM-1、CD138、CD38标志物免疫组织化学染色及子宫内膜活检,并将子宫内膜苏木精-伊红染色法(HE)染色结果作为金标准,免疫组织化学染色结果与HE染色结果的一致性分析使用Kappa检验,分析免疫组织化学染色MUM-1、CD138、CD38单独及3项指标联合检测对CE的诊断效能。根据生殖预后将194例患者分为失败组和成功组,比较失败组和成功组的临床资料,采用多因素Logistic回归分析IVF-ET失败的危险因素。结果HE染色结果显示,194例接受IVF-ET的患者中90例确诊为CE;MUM-1、CD138、CD38单独及3项指标联合检测的免疫组织化学结果与HE染色结果的一致性分析显示,Kappa值分别为0.475、0.537、0.464、0.752(P<0.05);3项指标联合诊断CE的灵敏度、准确度、阳性预测值均高于MUM-1、CD138、CD38单独诊断,差异均有统计学意义(P<0.05);CD38单独诊断CE的灵敏度高于MUM-1、CD138单独诊断,特异度低于MUM-1、CD138单独诊断,差异均有统计学意义(P<0.05)。194例接受IVF-ET的患者中妊娠失败106例,妊娠成功88例。失败组与成功组年龄、体质量指数、不孕年限、月经经期、月经周期,以及基础内膜厚度、基础促卵泡刺激素、基础雌二醇、基础促黄体生成激素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);失败组继发性不孕、人工流产次数≥1次、CE、MUM-1阳性、CD138阳性、CD38阳性患者比例均高于成功组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,继发性不孕、人工流产次数≥1次、患有CE、MUM-1阳性、CD138阳性、CD38阳性是IVF-ET失败的危险因素(P<0.05)。结论MUM-1、CD138、CD38联合检测可提升对CE的诊断效能,且患有CE、MUM-1阳性、CD138阳性、CD38阳性是IVF-ET失败的危险因素。

寻常型银屑病病人血清微RNA-138、微RNA-32水平变化与疾病活动性和预后转归的关系

目的探讨寻常型银屑病病人血清微RNA(miR)-138、miR-32水平变化与炎症反应、疾病活动性、预后转归的关系。方法选取2021年7月至2022年6月在沧州市人民医院进行治疗的寻常型银屑病病人80例作为观察组,根据疾病活动性分期将观察组80例寻常型银屑病病人分为活动期46例、稳定期34例,另选取同期整形外科体检健康者40例作为对照组。检测血清miR-138、miR-32表达水平、炎症因子[白细胞介素(IL)-4、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;采用相关性分析血清miR-138、miR-32水平与炎症因子的关系、血清miR-138、miR-32水平与病人疾病活动性和银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分的关系;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-138、miR-32诊断病人疾病活动性的价值。结果与对照组相比,观察组病人血清miR-138水平降低(0.67±0.19比0.98±0.21),miR-32(1.26±0.37比0.96±0.18)、IL-4、IL-8和TNF-α水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与稳定期病人相比,活动期病人血清miR-138水平降低(0.61±0.10比0.75±0.14),miR-32水平(1.34±0.35比1.16±0.29)和PASI评分升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前、治疗后2周和治疗后4周病人血清miR-138水平依次升高(0.67±0.19,0.78±0.21,0.89±0.27),miR-32水平(1.26±0.37,1.14±0.33,1.02±0.28)和PASI评分依次降低(P<0.05);血清miR-138水平与IL-4、IL-8、TNF-α、疾病活动性和PASI评分呈负相关(P<0.05),血清miR-32水平与IL-4、IL-8、TNF-α、疾病活动性和PASI评分呈正相关(P<0.05);miR-138和miR-32二者联合检测诊断病人疾病活动性的曲线下面积为0.86,灵敏度为84.78%,特异度为85.29%。结论寻常型银屑病病人血清miR-138水平下调,miR-32水平上调,二者水平变化与炎症反应、疾病活动性和预后转归有关,且联合检测对诊断疾病活动性具有一定的价值。

miR-138对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的观察miR-138对肾癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其对细胞周期蛋白D1(CCND1)的靶向调控作用。方法取肾癌细胞786-O,随机分为对照组、miR-138过表达组、miR-138低表达组,分别将miR-138空脂质体、miR-138 mimic和miR-138 inhibitor转染至细胞中。采用CCK-8法观察各组细胞增殖情况,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力。利用Star Base软件对miR-138进行靶基因预测,荧光素酶实验验证miR-138与CCND1的靶向调控关系。结果与对照组比较,miR-138过表达组细胞增殖活性降低,细胞迁移距离和细胞侵袭数量减少,CCND1蛋白表达下降(P均<0.01)。与对照组比较,miR-138低表达组细胞增殖活性升高,细胞迁移距离和细胞侵袭数量增加,CCND1蛋白表达升高(P均<0.01)。Star Base软件预测结果显示,CCND1的3'非编码区含有miR-138的结合位点。荧光素酶实验表明,miR-138可靶向调控CCND1。结论miR-138能够抑制肾癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其机制可能与靶向调控CCND1表达有关。

非小细胞肺癌患者血清miR-873和miR-138-5p表达水平及其与免疫微环境及预后的相关性分析

目的探讨血清微小核糖核酸(micro RNA,miRNAs)-873和微小核糖核酸-138-5p表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment,TIME)以及预后的关系。方法选择2019年2月~2021年2月重庆医科大学附属巴南医院收治的108例NSCLC患者(NSCLC组)和65例门诊体检的健康志愿者(对照组)。实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-873和miR-138-5p表达,多重免疫荧光染色法检测TIME指标,出院后定期随访。Pearson分析血清miR-873和miR-138-5p表达与TIME指标的相关性,Kaplan-Meier和COX比例风险回归分析miR-873,miR-138-5p与NSCLC患者预后的关系。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-873(1.02±0.23 vs 3.15±0.82)和miR-138-5p(1.21±0.26 vs 3.54±0.92)表达降低,差异具有统计学意义(t=-25.426,-24.769,均P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低中度分化患者血清miR-873和miR-138-5p表达低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、高度分化患者(t=9.615,10.253;6.889,3.361,均P<0.05)。血清miR-873,miR-138-5p表达与PD-1,PD-L1,CD4和CD8 H值呈负相关(r=-0.418~-0.673,均P<0.05)。低表达miR-873和miR-138-5p的NSCLC患者OS生存率低于高表达miR-873和miR-138-5p的NSCLC患者(Log-Rankχ^(2)=4.724,5.607,P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期是NSCLC患者不良预后的危险因素(P<0.05),miR-873,miR-138-5p是保护因素(P<0.05)。结论NSCLC患者血清miR-873和miR-138-5p表达下调,且与TIME以及低生存率有关。

纤毛蛋白TMEM138的保守性及拓扑结构

TMEM138是一种纤毛蛋白,其缺失会导致系统发育性纤毛病-Joubert综合征。为解析其致病的分子机制,本文对TMEM138进行了保守性分析和拓扑结构研究。选取8个代表性物种分析TMEM138蛋白一级、二级和三级结构的保守性,确定了TMEM138的跨膜结构域最为保守,是实现其功能的重要结构基础。通过构建TMEM138体外过表达载体并结合活细胞染色技术,首次验证了TMEM138的膜定位和其拓扑学结构,该结论可为TMEM138的研究提供进一步的帮助。

寻常型银屑病患者血清miR-138、miR-210表达变化及其与免疫炎症反应的关系

目的探讨寻常型银屑病患者血清微小RNA-138(miR-138)、微小RNA-210(miR-210)表达变化及其与免疫炎症反应的关系。方法选择寻常型银屑病患者107例(观察组),其中病情严重程度轻度43例、中度38例、重度26例,另选同期体检健康的志愿者55例(对照组),采集所有研究对象入院时外周静脉血,离心留取血清。采用RT-qPCR法检测血清miR-138、miR-210表达;采用流式细胞术检测外周血Th1、Th2细胞比例,计算Th1/Th2;采用ELISA法检测血清IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10。采用Pearson相关分析法分析寻常型银屑病患者血清miR-138、miR-210表达与免疫功能和炎症因子的关系。结果观察组血清miR-138表达、外周血Th2细胞比例以及血清IL-4、IL-10水平均低于对照组,血清miR-210表达、外周血Th1细胞比例和Th1/Th2以及血清IL-2、IFN-γ水平均高于对照组(P均<0.01)。随着病情严重程度增加,寻常型银屑病患者血清miR-138表达、外周血Th2细胞比例以及血清IL-4、IL-10水平逐渐降低,血清miR-210表达、外周血Th1细胞比例和Th1/Th2以及血清IL-2、IFN-γ水平逐渐升高(P均<0.01)。Pearson相关分析显示,寻常型银屑病患者血清miR-138表达与外周血Th1细胞比例、Th1/Th2及血清IL-2、IFN-γ水平均呈负相关关系,与外周血Th2细胞比例及血清IL-4、IL-10水平均呈正相关关系(P均<0.01);血清miR-210表达与外周血Th1细胞比例、Th1/Th2及血清IL-2、IFN-γ水平均呈正相关关系,与外周血Th2细胞比例及血清IL-4、IL-10水平均呈负相关关系(P均<0.01)。结论寻常型银屑病患者血清miR-138表达降低、血清miR-210表达升高;miR-138、miR-210可能通过调节免疫炎症反应参与寻常型银屑病的发生、发展。

miRNA-138-5p靶向调控胱天蛋白酶3减缓吸烟所致睾丸支持细胞TM4细胞凋亡

近年来研究表明,长期大量吸烟可致睾丸出现不可逆性损伤进而出现精子发生受阻,凋亡信号通路在其中发挥着关键作用,其分子调控机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨miRNA-138-5p在香烟烟雾所致小鼠睾丸支持细胞TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)损伤中的靶向调控机制。MTT法、乳酸脱氢酶法和TUNEL法结果显示,CSE干预后的TM4细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞毒性显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05);RT-PCR和Western印迹结果证明,10%CSE干预TM4细胞后,凋亡前体基因p53、促凋亡基因Bak和胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白质表达水平显著上调(P<0.05);在TM4细胞中转染miRNA-138-5p过表达质粒后同样进行CSE干预,结果显示,支持细胞存活率较转染前显著升高(P<0.05),凋亡阳性细胞数较转染前显著降低(P<0.05),凋亡前体p53基因、促凋亡基因Bak和Caspase-3的mRNA和蛋白质表达较转染前显著下调(P<0.05);沉默miRNA-138-5p后,Bak、胱天蛋白酶3的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05);在线数据库分析显示,miRNA-138-5p与胱天蛋白酶3具有较高的匹配预测值,双荧光素酶报告基因结果显示,Bak未结合至miRNA-138-5p,而胱天蛋白酶3可以靶向结合至miRNA-138-5p。以上结果提示,miRNA-138-5p可靶向调控胱天蛋白酶3,减缓吸烟所致睾丸支持细胞凋亡,具有支持细胞的保护作用。

口腔鳞状细胞癌组织中miR-138、FOXD1表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中微小核糖核酸-138(miR-138)、叉头框蛋白D1(FOXD1)的表达及与患者临床病理特征和预后的关系。方法收集行手术切除的80例OSCC患者癌组织和对应癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-138、FOXD1 mRNA表达。分析OSCC组织中miR-138、FOXD1 mRNA表达与患者临床病理特征的关系,根据OSCC组织中miR-138、FOXD1 mRNA表达均值分为高、低表达者。通过Tar-get Scan网站预测miR-138与FOXD1的结合位点。采用Pearson相关法分析OSCC组织中miR-138与FOXD1 mRNA表达的相关性,Kaplan-Meier法绘制不同miR-138、FOXD1 mRNA表达OSCC患者的生存曲线,多因素Cox回归分析OSCC患者预后的影响因素。结果与癌旁正常组织相比,OSCC组织中miR-138表达降低,FOXD1 mRNA表达升高(P均<0.05)。miR-138与FOXD1的3’非翻译端2942~2948处存在结合位点。Pearson相关性分析显示,OSCC组织中miR-138与FOXD1 mRNA表达呈负相关(r=-0.621,P<0.05)。不同分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移OSCC组织中miR-138、FOXD1 mRNA表达比较差异有统计学意义(P均<0.05)。80例OSCC患者5年总生存率为55.00%(44/80)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-138高表达者总生存率高于低表达者,FOXD1 mRNA高表达者总生存率低于低表达者(P均<0.05)。多因素Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ期、浸润深度≥5 cm、淋巴结转移、FOXD1 mRNA≥2.18为OSCC患者死亡的独立危险因素,miR-138≥0.78为独立保护因素(P均<0.05)。结论OSCC组织中miR-138低表达和FOXD1 mRNA高表达,二者表达与分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和预后有关,有望成为OSCC病情判断和预后评估的标志物。

普鲁卡因通过调控miR-138抑制OGD诱导的大鼠皮层神经元损伤

目的探讨普鲁卡因(PROC)对氧糖剥夺(OGD)诱导大鼠皮层神经元损伤的影响及可能机制。方法体外培养大鼠皮层神经元,用不同剂量(0.00、3.50、7.00、14.00 mg/L)PROC干预大鼠皮层神经元24 h,建立OGD模型。CCK-8法检测细胞存活率,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测活化的半胱天冬酶(cleaved-caspase)3和cleaved-caspase9蛋白表达,qRT-PCR检测细胞中miR-138表达。转染miR-138模拟物或抑制剂至大鼠皮层神经元细胞后,建立OGD模型,上述相同方法检测神经元损伤情况。结果与对照组相比,OGD组存活率、miR-138表达降低,LDH释放率、凋亡率及cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达增加(均P<0.05)。与OGD组比较,OGD+PROC-L组、OGD+PROC-M组和OGD+PROC-H组存活率、miR-138表达增加,LDH释放率、凋亡率及cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达降低(均P<0.05)。过表达miR-138后,OGD诱导的大鼠皮层神经元存活率增加,LDH漏出率、凋亡率及cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达降低(均P<0.05)。敲减miR-138可逆转PROC对OGD诱导大鼠皮层神经元损伤的影响。结论PROC可能通过上调miR-138,抑制OGD诱导的大鼠皮层神经元损伤。