猪围产期外周血ANAE^+T细胞动态观察

采用酸性α 醋酸萘酯酶 (ANAE)染色方法测定了 11头猪围产期外周血不同时期总ANAE+ T细胞与大颗粒型ANAE+ T细胞 (tANAE+ T细胞与lgANAE+ T细胞 )百分率。结果表明 :猪分娩前 2 1d至分娩前 6d ,外周血tANAE+ T细胞与lgANAE+ T细胞百分率均低于分娩后第 2 5d的相应指标 ,说明猪妊娠后期细胞免疫功能低下 ;分娩前 1d ,猪外周血tANAE+ T细胞与lgANAE+ T细胞百分率均较分娩前第 2 1d的相应指标显著升高 (P <0 0 5 ) ,提示分娩的启动可能与母体细胞免疫功能增强、导致免疫排斥的发生有一定关系 ;分娩后tANAE+ T细胞与lgANAE+ T细胞百分率降低后逐渐升高 ,tANAE+ T于细胞分娩后第 10d、lgANAE+ T细胞于分娩后第 5d已分别明显高于猪分娩前第 2 1d的相应指标 (P <0 0 5 ) ,猪分娩后第 2 5d的tANAE+ T细胞与lgANAE+ T细胞和正常未妊娠母猪的相应指标接近 ,表明猪分娩后 5～ 2 5d细胞免疫功能已渐恢复正常。

红笛鲷脾脏、头肾和胸腺中IgM^+细胞与ANAE^+ T细胞的分布

采用ANAE组化方法(α-醋酸萘酯酶染色法)和ABC免疫组化方法(亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法)分析了1龄红笛鲷成鱼的胸腺、头肾和脾脏中IgM+细胞(具有免疫球蛋白分子IgM的细胞)、ANAE+ T细胞的分布。结果表明,三个淋巴器官皆有IgM+细胞、ANAE+ T细胞;胸腺皮质区IgM+细胞数量最多,其次是头肾、胸腺髓质区、脾脏;ANAE+ T细胞以脾脏中数量居多,其次是头肾、胸腺髓质区、胸腺皮质区;ANAE+ T细胞在三个器官中多呈均匀分布,而IgM+细胞在血管、胸腺小体、黑色素巨嗜细胞中心等的外周呈密集分布。实验结果进一步证明了胸腺中的T细胞多为不成熟的T细胞,此外,还含有大量的IgM+细胞;而脾脏、头肾内的ANAE+ T细胞多于胸腺,推测胸腺成熟的T淋巴细胞迁移到头肾和脾脏。

健康足月分娩母亲与新生儿T细胞亚群和NK细胞水平

目的:探讨健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞的水平,为围产期母亲及新生儿系统保健提供基础免疫数据。方法:无菌采集健康足月分娩母亲静脉血、肝素抗凝、出生5min新生儿脐静脉及3天新生儿股静脉血、肝素抗凝。由美国RD有限公司提供试剂,采用间接免疫荧光技术和S.P法测定T细胞亚群及NK细胞的水平。结果:①健康足月分娩出生5min及3天新生儿与母亲的T细胞亚群、NK细胞水平差异均无显著性(P>0.05)。②出生3天新生儿CD4与正常参考值比较差异有显著性(P<0.02);出生5min新生儿CD3、CD4/CD8及母亲的CD3、CD4、CD4/CD8与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。③出生5min新生儿NKCD16、NKCD57,出生3天新生儿及母亲的NKCD16与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。结论:明确了深圳健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞表达水平;为围产期的母亲、新生儿系统保健提供基础免疫数据。

调节性T细胞与Th17细胞的失衡及其对大鼠肺纤维化的影响

目的研究调节性T细胞与Th17细胞的平衡关系及其对大鼠肺纤维化的影响。方法 SD大鼠10只,随机分为博来霉素(实验组)5只和生理盐水组5只(对照组),博来霉素组气管内给药复制大鼠肺纤维化动物模型(博来霉素5mg/kg),对照组气管内注射等量生理盐水。第28天处死动物,肺组织病理切片苏木精-伊红染色,免疫组织化学方法检测IL-2、IL-6、IL-17和TGF-β的表达,以IL-17的表达水平作为衡量Th17细胞功能和数量的指标,流式细胞术检测CD4+调节性T细胞和CD8+调节性T细胞的比例。结果博来霉素组肺纤维化明显;与对照组大鼠相比,Ashcroft评分差异有统计学意义。博来霉素组IL-2、IL-6、IL-17和TGF-β的表达水平明显上升,与对照组比较,差异具有统计学意义。总体样本数据行相关分析提示IL-6和IL-17表达水平具有正相关性,IL-17与TGF-β也具有正相关性。CD4+CD25+Foxp3+细胞占CD4+CD25+细胞百分比较对照组没有增高,差异无统计学意义。只有博来霉素组CD8+CD25+Foxp3+细胞占CD8+CD25+细胞百分比较对照组增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论博来霉素致肺纤维化大鼠中存在Th17细胞和调节性T细胞的数量功能的相对不平衡,这种不平衡可能导致肺纤维化病情进展。这种不平衡可能与影响Th17细胞和调节性T细胞分化的IL-2、IL-6、TGF-β等细胞因子表达水平改变有关。

外源性LTB4对CIA小鼠Treg/Th17脾细胞分化的作用

目的探讨外源性白三烯B4(LTB4)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)和Th17细胞分化的调节,进一步阐明LTB4在类风湿关节炎(RA)发病中的作用机制。方法建立CIA小鼠模型,取造模d28的脾细胞,体外实验分析外源性LTB4对Treg和Th17细胞分化的影响。应用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+细胞的数量,荧光定量PCR技术检测调控Treg和Th17细胞分化的特异性转录因子Foxp3和RORγt的mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测培养细胞上清IL-17的含量。结果成功建立CIA小鼠模型;造模d28分离小鼠脾细胞,体外培养加入鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)共同孵育,随着LTB4浓度增加(0.01、0.1、1μmol·L-1),CD4+CD25+Foxp3+细胞数量相应减少,Foxp3 mRNA的表达相应降低;相反,IL-17的含量相应增加,RORγt mRNA的表达相应升高。结论LTB4抑制CIA模型脾细胞Treg细胞的分化,促进Th17细胞的分化,提示LTB4在CIA发病过程中具有一定的促炎活性。

自然杀伤T细胞与子宫内膜异位症分期的关系

目的探讨自然杀伤T细胞（NKT）在子宫内膜异位症（EMT）发病机制的作用及其与分期的关系。方法I～Ⅳ期EMT患者各15例，采用流式细胞术检测其外周血及腹腔积液内NKT含量，用ELISA法检查细胞因子IFN-γ及IL-4的含量，并选取同龄段的20例健康志愿者作为对照。结果与对照组比较，I～Ⅳ期EMT患者外周血NKT、IFN-γ及IL-4均明显降低，且外周血及腹腔积液内以上三者的含量均呈现Ⅰ〉Ⅱ〉Ⅲ〉Ⅳ的关系，两组间的含量存在统计学差异（P〈0．05）。Spearman相关性分析显示，NKT、IFN-γ，及IL-4当中任意一个因素均与I、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ的任意一期呈显著负相关性（r均大于0．06，P均小于0．05）。结论NKT及其细胞因子IFN—γ及1L-4在EMT发病机制当中具有重要作用，并且与EMT的分期密切相关，可能是该病的一组保护性因素。

小檗碱调节睡眠剥夺大鼠的肠道菌群结构以及Th17/Treg细胞平衡

目的研究小檗碱对睡眠剥夺大鼠肠道菌群以及辅助性T细胞17(Th17)和调解性T细胞(Treg)细胞的影响。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、低和高剂量小檗碱组(BBR1和BBR2,100和200 mg/kg,灌胃10 d干预)。小站台水环境法建立睡眠剥夺模型。检测大鼠直肠内容物中细菌数量,流式细胞计量技术分析大鼠肠道Th17/Treg细胞比值,并检测肠道白介素17(IL-17)、RAR相关孤儿受体(ROR)C和叉头框蛋白P3(Foxp3)表达。结果模型组大鼠肠道内产气荚膜梭菌数量增加(P<0.05),而其他检测菌群数量降低(P<0.05);Th17/Treg细胞比值升高(P<0.05);IL-17和RORC表达升高(P<0.05),Foxp3表达降低(P<0.05)。小檗碱处理降低产气荚膜梭菌数量(P<0.05),增加其他检测菌群的数量(P<0.05);降低Th17/Treg细胞比值(P<0.05);下调IL-17和RORC表达(P<0.05),上调Foxp3表达(P<0.05)。结论小檗碱能够拮抗睡眠剥夺诱导的大鼠肠道菌群结构和Th17/Treg细胞失衡。

阿胶对气道炎症小鼠Th17/Treg亚群失衡的逆转作用

目的探讨阿胶对烟尘所致气道炎症小鼠肺脏Th17/Treg亚群失衡的逆转作用。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分为对照组、模型组和阿胶组。模型组、阿胶组利用香烟烟雾暴露法建立气道炎症模型,模型组小鼠每日0.2 mL PBS灌胃,阿胶组每日给予0.2 mL阿胶溶液(0.2 g/mL)灌胃,正常组常规饲养。24周后,观察各组小鼠肺组织病理情况,采用流式细胞术检测肺组织Th17细胞亚群及Treg细胞亚群比例,采用逆转录PCR法检测肺组织中IL-6、IL-17A、Foxp3 mRNA表达,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-17A、Foxp3水平。结果与正常组相比,模型组小鼠肺间质有大量炎性细胞浸润,肺泡破裂融合,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例高,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达高(P均<0.05)。与模型组相比,阿胶组小鼠肺组织炎症情况明显改善,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例低,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达低(P均<0.05)。结论烟尘能导致气道炎症小鼠肺组织Th17、Treg亚群比例升高,IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达上调,阿胶通过降低Th17、Treg亚群比例及IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达减轻气道炎症小鼠肺脏炎症。

一种高效扩增人T细胞受体α链可变区基因方法的建立

目的建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)α链可变区(Vα)基因的方法。方法根据TCR Vα32个亚家族的基因序列特点,设计扩增Vα基因的上游内、外引物各42条,并将上游内、外引物各分为5组简并引物。在恒定区(C区)设计下游内、外引物,测序引物以及扩增Cα基因的上游引物各1条。提取细胞RNA,用PolyA介导反转录后,采用巢式PCR扩增正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD8 T细胞TCR Vα的32个亚家族基因,以Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照。用T-easy载体克隆RT-PCR产物,对克隆基因进行测序分析。结果从正常人CD8 T细胞中扩增到了所有TCR Vα亚家族基因,以10个Jurkat细胞所提取的RNA作为模板即可获得成功扩增。TCR Vα同一亚家族基因的同源性均大于75%,序列差异主要在CDR3高变区。结论建立了一种高效灵敏的TCR Vα编码基因扩增方法,为抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的TCR克隆和功能研究打下了良好基础。

慢性非细菌性前列腺炎CD_4^+T淋巴细胞及IL-6的表达及意义

目的检测慢性非细菌性前列腺炎(chronic abacterial prostatitis,CAP)大鼠前列腺组织中CD4+T淋巴细胞及白介素-6(IL-6)的表达,探讨CAP的免疫学发病机制。方法将24只老龄SD大鼠随机分为正常对照组和CAP模型组,每组12只。观察大鼠前列腺组织的病理形态学变化;免疫组化法检测CD4+T淋巴细胞及IL-6在各组大鼠前列腺组织中的表达。结果CAP模型组大鼠前列腺的病理形态学改变基本符合CAP的特点。CAP模型组CD4及IL-6的表达显著高于正常对照组(P<0.01)。结论CD4+T淋巴细胞介导的自身免疫反应可能是CAP发病的重要机制。

重组FoxP3腺相关病毒转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞的实验研究

目的:研究FoxP3(ForkheadBoxP3)基因在小鼠T细胞的表达情况,以及重组FoxP3腺相关病毒(adenoassociatedvirus,AAV)对小鼠CD4+CD25-T细胞功能的影响。方法:采用实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞FoxP3mRNA表达情况,利用基因重组技术构建FoxP3腺相关病毒载体,体外转染CD4+CD25-T细胞,通过细胞增殖试验观察转染CD4+CD25-T细胞功能变化。结果:CD4+CD25+T细胞较CD4+CD25-T相比高水平表达FoxP3基因mRNA,重组FoxP3腺相关病毒转染后的CD4+CD25-T细胞对CD3单抗的刺激呈低反应性,并且能抑制新鲜分离CD4+CD25-T细胞的增殖。结论:FoxP3基因转染的CD4+CD25-T细胞在体外具有抑制T细胞活化增殖的功能。

细粒棘球蚴感染中阻断TGF-β1受体对淋巴细胞的影响

目的:观察TGF-β1对细粒棘球蚴体外与BALB/c小鼠T淋巴细胞培养的影响。方法:阻断剂组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+SB525334共培养;对照组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+PBS共培养;空白对照:BALB/c小鼠脾细胞+RPMI-1640培养基+SB525334共培养。方法:48 h收集淋巴细胞,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞的数量、NK细胞的数量及其活性受体NKG2D的表达;乳酸脱氢酶法检测NK细胞的杀伤活性。结果:体外阻断TGF-β1受体后,引起细粒棘球蚴介导的CD4+T细胞数量升高、CD8+T细胞数量降低、CD4+/CD8+T细胞比值升高、CD4+CD25+T细胞数量减少、NK细胞活性受体NKG2D的表达增加、NK细胞对靶细胞Yac-1的裂解率增加和NK细胞活性及其活性受体NKG2D成正相关。结论:体外阻断TGF-β1受体可提高T淋巴细胞免疫,从而抵制细粒棘球蚴的感染。

O型口蹄疫病毒VP1 T细胞与B细胞表位基因双拷贝串联表达产物的免疫应答

以一株O型口蹄疫病毒(FMDV)外壳蛋白VP1基因为模板,合成与细胞免疫及体液免疫相关抗原表位肽基因:21-40肽(20AA)和141-160肽(20AA)基因序列,运用基因工程技术构建了含有串联结构21-40(20AA)～141-160(20AA)～21-40(20AA)～141-160(20AA)的2020-2020VP1融合基因表达载体r2020-2020,转化宿主菌BL21(DE3)RIL后诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western Blot分析显示重组融合蛋白的分子量约为18Ku.动物实验表明,较小剂量的融合蛋白就能诱导豚鼠产生特异性T淋巴细胞增殖反应及抗FMDV中和抗体,证明该融合蛋白可同时激活细胞免疫及体液免疫反应,具有开发成为抗FMDV疫苗的应用价值.

雌激素缺乏致骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌MCP-1影响T淋巴细胞趋化及凋亡

目的探讨卵巢摘除术(OVX)所致雌激素缺乏骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)与假手术(sham)组BMSC单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的改变,并研究其对诱导T淋巴细胞趋化及凋亡的组间差异,揭示BMSC在骨质疏松症发生中的可能作用。方法建立OVX模型及sham模型,micro-CT检测证明动物模型建立成功。ELISA检测OVX组及sham组BMSC MCP-1的表达,并对OVX组来源BMSC给予梯度浓度雌激素,观察不同浓度雌激素作用下BMSC表达MCP-1的变化。两组来源BMSC分别与T淋巴细胞共培养后,检测不同组间BMSC诱导T淋巴细胞趋化能力及凋亡的改变,同时观察外源性雌激素对这一改变的扭转作用。结果在雌激素缺乏所致骨质疏松症中,BMSC MCP-1表达能力下降,同时其诱导T淋巴细胞趋化及凋亡能力随之下降。当外源性给予一定浓度雌激素后,该下降趋势得到一定程度的扭转。结论 BMSC可能通过自身MCP-1的表达从而调控T淋巴细胞的趋化及凋亡,其免疫调节特性使其在骨质疏松症发生发展中起重要作用。

Foxp3转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞抑制NK细胞活性

目的:通过逆转录病毒载体转染Foxp3基因到小鼠CD4+CD25-T细胞,以研究体外诱导获得的调节性T细胞对NK细胞免疫活性的调节作用及其机制。方法:携带Foxp3基因的逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,以获得持续性高表达Foxp3的CD4+T细胞模型。CD4+Foxp3+T细胞与NK细胞共培养后,用[51Cr]标记的YAC-1细胞检测NK细胞的杀伤毒性。在TGF-β阻断实验中,通过Transwell共培养实验以及向细胞共培养体系加入抗TGF-β抗体,并检测NK细胞杀伤毒性。结果:逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,成功建立了表达Foxp3的CD4+T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38.0%。CD4+Foxp3+T细胞在与NK细胞共培养的24 h和48 h后,对NK细胞的细胞毒性杀伤效应的抑制率分别为42.9%和22.7%。在CD4+Foxp3+T细胞与NK细胞的共培养体系中加入抗TGF-β抗体后,其抑制率分别由原来的42.9%(24 h)、22.7%(48 h)变为3.2%(24 h)、2.1%(48 h)。在Transwell共培养实验中与NK细胞直接接触的Foxp3+CD4+T细胞可以诱导NK细胞免疫抑制,而没有直接接触的Foxp3+CD4+T细胞则不能抑制NK细胞的杀伤作用。结论:强制性表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以抑制NK细胞的细胞毒性杀伤作用。转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对NK细胞发挥作用依赖于细胞之间的直接接触,与转染后T细胞表面表达TGF-β有关。

穿心莲二萜类化合物对B16细胞致敏小鼠CTL杀伤活性的影响

目的研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响。方法将♂BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH)法和DiO/PI双染色法分别测定CTL杀伤活性。结果50mg·kg-1及150mg·kg-1DAP口服给药可以增加B16细胞致敏小鼠脾脏淋巴细胞中T细胞及CD8+T细胞比例,降低T细胞中CD4+/CD8+比值并增强CTL对B16细胞的杀伤活性。结论DAP可增加B16细胞致敏小鼠脾脏T细胞比例及提高CTL杀伤活性。

雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞及IL-21的影响

目的探讨雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞（TfH）及其细胞因子白细胞介素21（IL-21）水平的影响。方法将2015年1～8月河北省沧州中西医结合医院诊治的90例类风湿关节炎患者根据随机数字表法分为观察组和对照组，各45例。观察组采用口服雷公藤多苷20mg，每日3次，双氯芬酸钠肠溶片50mg，每日3次，甲氨蝶呤10mg，每周1次；对照组给予双氯芬酸钠肠溶片50mg，每日3次，甲氨蝶呤10mg，每周1次，疗程均为12周。观察两组患者的治疗效果及TfH细胞、IL-21蛋白的变化。结果治疗后，观察组的总有效率高于对照组[93．3％（42／45）比71．O％（32／45）]，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后，观察组生活质量评分高于对照组[（71±13）分比（65±13）分]，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后，观察组压痛关节数、肿痛关节数、白细胞、血小板及红细胞沉降率、总体类风湿关节炎患者病情评价评分均低于对照组[（4．8±1．1）个比（9．3±1．7）个，（3．0±0．8）个比（6．9±1．1）个，（6．4±1．2）×109／L比（8．5±1．0）×109／L，（280±66）×109／L比（313±68）×109／L，（40±11）mm／1h比（57±11）mm／1h，（2．7±0．6）分比（3．9±0．9）分]，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。治疗后，观察组Tfh细胞及IL-21水平低于对照组[（10±3）％比（20±6）％，（335±78）ng/L比（414±99）ng／g]，差异有统计学意义（P〈0．01）。经Pearson相关性分析，Tm细胞及IL-21水平与DAS28评分呈正相关（r=0．712，0．709，P〈0．05）。结论雷公藤多苷对类风湿关节炎治疗效果好，并能够显著改善TfH细胞及其细胞因子IL-21水平。

肝星状细胞通过诱导产生CD8^+CD28^-T淋巴细胞抑制T细胞增殖

【目的】研究肝星状细胞(HSC)是否通过诱导产生CD8+CD28-T淋巴细胞抑制T细胞增殖。【方法】流式细胞仪分选出CD3+T细胞,用羧基荧光素双乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记后与人肝星状细胞系LX2细胞共培养,PHA刺激72 h后,流式细胞仪检测T细胞增殖的百分比;为了研究肝星状细胞调控T细胞增殖的机制,将CD3+T细胞与LX2细胞共培养3 d,流式细胞仪检测CD8+CD28-T淋巴细胞的百分比。进一步将CD3+T细胞与LX2细胞共培养3 d,通过流式细胞仪分选出CD8+CD28-T淋巴细胞与CFSE标记的CD3+T细胞共培养,PHA刺激72 h后,流式细胞仪检测T细胞增殖的百分比。【结果】LX2细胞明显抑制了T细胞增殖,且抑制作用呈剂量依赖性;LX2剂量依赖性上调CD8+CD28-T淋巴细胞百分比。和LX2细胞共培养后的CD8+CD28-T淋巴细胞能够显著抑制T细胞增殖。【结论】HSC细胞通过诱导CD8+CD28-T调节细胞比例抑制T淋巴细胞增殖。

胶原诱导性关节炎小鼠CD4^+ T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶的作用

目的:本研究应用胶原诱导性关节炎(CIA)的动物模型,通过研究CD4+T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶(TH)的变化与作用,探讨CD4+T细胞亚群来源的儿茶酚胺与CIA的炎症反应之间的关系。方法:雄性DBA/1小鼠36只随机分为对照组、35天模型组和55天模型组(n=12)。用II型胶原(CII)乳剂免疫DBA/1小鼠诱导CIA,在初次免疫后第35天和55天进行关节临床评分并检测血清中抗CII IgG抗体水平的变化。用Western blot法检测肠系膜淋巴结中Th1、Th17、Th2和Treg细胞的特异性转录因子及其细胞因子以及TH表达的变化。用流式细胞术检测肠系膜淋巴结中表达TH的CD4+T细胞亚群数目的变化。结果:CIA小鼠在发病早期(初次免疫后第35天)和发病晚期(初次免疫后第55天)临床评分和血清中抗CII IgG抗体水平显著升高。CIA小鼠肠系膜淋巴结中Th1和Th17细胞的特异性转录因子和细胞因子表达增加而Th2和Treg细胞的细胞因子表达减少。CIA小鼠肠系膜淋巴结中TH的表达增加,且CD4+T细胞中TH+的细胞数目增多,这主要是来自CD4+T细胞亚群中Th1和Th17细胞的作用。结论:CIA小鼠肠系膜淋巴结中存在CD4+T细胞亚群来源的儿茶酚胺的增加,可能在CIA的发展过程中具有一定的抗炎作用。

肝脏CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在小鼠急、慢性肝损伤中的表达差异及意义

目的探究肝内CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cell,Tregs)在急、慢性肝损伤中的表达差异及意义。方法使用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)一次或多次给予C57BL/6J小鼠腹腔注射,分别制备急性(24 h)和慢性肝损伤(6周)模型,对照组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液。病理切片Masson染色观察不同模型小鼠肝内病理变化情况,运用流式细胞分析法和免疫荧光检测小鼠肝内Tregs的表达。Real-time PCR检测小鼠肝内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、白细胞介素-1β(interloukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)的表达。结果 Masson染色显示急性肝损伤小鼠的肝细胞大片坏死伴出血,慢性肝损伤小鼠肝脏假小叶形成,同时Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达增加。流式细胞分析显示Tregs在急性和慢性组小鼠肝脏表达都有升高,但在慢性组升高的幅度比急性组大(P<0.01),与免疫荧光结果一致。肝内抑制性细胞因子IL-10、TGF-β在慢性肝损伤组升高显著(P<0.05),而促炎因子IL-1β、IL-6在急性肝损伤组升高显著(P<0.01)。结论肝内Tregs在急、慢性肝损伤中表达不同。在急性肝损伤中,尤其是急性肝损伤恢复期,Tregs部分增加,抑制炎性反应扩散,促进机体恢复;在慢性肝损伤中,Tregs表达显著增加,形成免疫耐受,抑制免疫清除,肝纤维化形成。