ANKRD17蛋白抗体的制备、纯化及检测

目的:制备ANKRD17(P260)蛋白的兔多克隆抗体,以与抗原相结合的方法进行抗体的纯化,并利用纯化的抗体对该蛋白进行细胞内免疫荧光检测。方法:构建表达GST-ANKRD17C端融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达;制备GST-ANKRD17C端抗原融合蛋白后免疫家兔,对获得的兔多克隆抗血清进行亲和纯化;纯化后的抗体经过Westernblot鉴定,用于细胞免疫荧光染色检测。结果:获得较高效价的血清抗体,并对血清抗体进行了纯化;利用纯化的抗体对ANKRD17蛋白进行了细胞内免疫荧光检测,发现改蛋白定位于细胞质中。结论:制备得到的纯化抗体为研究ANKRD17蛋白的功能打下了必要的基础。