ANLN缺失后Hela细胞的力学特性与骨架蛋白变化分析

背景:目前关于ANLN蛋白在细胞分裂间期调节细胞形态、细胞-细胞间接完整性以及胞质分裂中稳定收缩环的作用已经明确,但其对细胞力学性能和骨架蛋白的影响还鲜有报道。目的:探讨ANLN缺失对分裂间期细胞力学特性与骨架蛋白的影响。方法:通过原子力显微镜分别测量正常Hela细胞与siRNA敲降ANLN的Hela细胞的表面弹性模量和破膜力;采用激光共聚焦显微镜观察正常Hela细胞与siRNA敲降ANLN的Hela细胞的肌球蛋白ⅡA以及肌动蛋白纤维分布特征。结果与结论:①敲降ANLN的Hela细胞的表面弹性模量明显高于未经处理的正常Hela细胞,与敲降ANLN的细胞相比,正常细胞的表面弹性模量更倾向于极性分布(两极间逐步降低),但两组细胞长轴边缘区域的破膜力并没有明显差别;②ANLN敲降组细胞在边缘位置有较低的肌球蛋白ⅡA分布;③ANLN敲降组近底层细胞-细胞连接区域的肌动蛋白纤维趋向更散乱,并且细胞内纤维束沿长轴排列不明显,中层有细胞间隙变大的倾向;④结果说明,敲降ANLN对细胞的边缘区域影响最大,ANLN的缺失会导致细胞边缘区域更频繁的重构,细胞需要聚集更多的骨架蛋白及其结合蛋白来稳定细胞状态,导致了更高的表面弹性模量。

肌动蛋白结合蛋白Anillin通过靶向细胞核中的c-Myc介导上皮–间质转化并促进胃癌进展

肌动蛋白结合蛋白(ANLN)在细胞增殖和迁移中起重要作用,特别是在胞质分裂中。虽然已有研究结果表明癌症的发生发展与ANLN有关,但其影响胃癌(GC)发生发展的潜在调控作用和分子机制仍不清楚。在此,先采用伤口愈合实验、Trans-well实验和基质(Matrigel) Trans-well实验检测ANLN表达情况对体外胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。然后,采用免疫印迹实验来评估上皮–间充质转化(EMT)相关蛋白和Smad蛋白的表达。此外,还采用共定位免疫荧光法、免疫共沉淀法(Co-IP)和Western blot探索ANLN参与胃癌转移的分子机制。在此研究中,沉默ANLN减弱了胃癌细胞的迁移和侵袭能力。在机制上,ANLN可以与细胞核中的c-Myc 相互作用,随后c-Myc 发生磷酸化,诱导Snail和Slug转录因子的表达,促进EMT,但不激活Smads蛋白。总的来说,该文的数据揭示了一个潜在的分子机制,即ANLN通过分别介导Smads信号通路和c-Myc 蛋白进而靶向调控下游转录因子(Snail和Slug)触发EMT进程。