中药“松友饮”对高转移人肝癌侵袭性及小鼠免疫功能的影响

目的:研究"松友饮"对高转移人肝癌MHCC97H细胞侵袭性和小鼠免疫功能的影响及其机制。方法:用不同质量浓度的"松友饮"(2、4、8 mg/mL)分别干预MHCC97H细胞48 h,用明胶酶谱实验及侵袭实验研究基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)活性和侵袭性变化。用高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤模型进行体内实验,以检测对"松友饮"对肿瘤的抑制作用。C57BL/6小鼠和昆明种小鼠均随机分为"松友饮"剂量递增的C1、C2和C3组及阴性、阳性对照组,灌胃给药,每天1次,连续7 d,处死小鼠后检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的活性,观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能变化。结果:与对照组相比,"松友饮"4、8 mg/mL组细胞侵袭性下降有统计学意义(P<0.01),对应的MMP-2活性下降。此外,"松友饮"抑制了肝癌细胞生长,C1、C2和C3组的NK细胞特异性抑制百分率分别为24.6%、27.1%和27.7%,巨噬细胞吞噬百分率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:中药复方"松友饮"可能通过抑制MMP-2活性来抑制肝癌侵袭性,连续7 d"松友饮"灌胃给药能增强小鼠免疫功能。

雄黄对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞凋亡的基础研究

目的:观察中药雄黄诱导卵巢癌细胞凋亡及血管生成的作用。方法:应用流式细胞术、荧光显微镜、透射电子显微镜和免疫组织化学等技术,以细胞凋亡和VEGF为主要观测指标,观察中药雄黄对荷人卵巢癌裸鼠移植瘤抗肿瘤作用。结果:雄黄可诱导荷人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞凋亡,抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长,阻止血管生成抑制细胞DNA的合成,并可延长小鼠存活时间。结论:雄黄可通过诱导卵巢癌细胞凋亡,阻止血管生成,抑制细胞DNA的合成等多种途径发挥抗肿瘤作用,具有广阔的应用前景。

丹皮酚的体内外抗肿瘤作用

目的 研究丹皮酚在体外的细胞毒作用和体内抗肿瘤作用。方法 噻唑兰 (MTT)体外试验法和灌胃给药体内抗肿瘤试验。结果 丹皮酚对体外培养的人红白血病细胞K52 6、人乳腺癌基因细胞T6-17和肝癌细胞BEL 74 0 4的半数抑制浓度 (IC50 )依次为 2 5 38mg/L、10 81mg/L和 93 39mg/L。体内灌胃给予丹皮酚 5 0mg/kg·d-1、2 0 0mg/kg·d-1和 80 0mg/kg·d-1ig× 14d对小鼠肿瘤HepA的抑制率分别为 39 2 6 %～ 4 2 5 5 %、4 9 6 9%～ 5 5 32 %和 6 4 4 2～72 6 4 % ,P <0 0 1,差异有显著性。结论 丹皮酚在体外有细胞毒作用 。

丹参酮ⅡA及其纳米粒诱导肝癌细胞凋亡及对p38MAPK、TGFβ1信号蛋白表达的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA,TSⅡA)及其纳米粒(Tanshinone ⅡA nanoparticles,TS-NP)治疗小鼠肝癌的作用及机制。方法:采用乳化溶剂挥发法制备TS-NP,建立小鼠肝癌模型,采用TUNEL标记法检测细胞凋亡率,免疫组织化学SP法检测p38促分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、肿瘤生长因子(tumor growth factorβ1,TGFβ1)的表达。结果:与对照组比较,TSⅡA组、TS-NP各剂量组瘤体质量显著降低(P<0.01),生存期均明显延长,肝癌细胞凋亡率升高(P<0.01)。其中与对照组比较,TS-NP组治疗作用优于等剂量的TSⅡA组,p38 MAPK表达明显高于其他各组(P<0.01),但TGFβ1的表达低于其他各组(P<0.01);肝癌组织中p38 MAPK与TGFβ1表达呈负相关(r=-0.873,P<0.001)。结论:TSⅡA及其纳米微粒能够抑制小鼠肝癌生长,延长生存期,而TS-NP的疗效优于等剂量的TSⅡA。其治疗肝癌的机制与抑制TGFβ1、上调p38 MAPK的表达从而抑制肝癌细胞增殖、诱导细胞凋亡有关质类。

肠胃清对人结直肠癌耐长春新碱细胞株HCT8／V的逆转作用

目的:探讨中药复方肠胃清对人结直肠癌耐长春新碱(vincristine,VCR)细胞株HCT8/V多药耐药的逆转作用。方法:采用细胞增殖抑制实验MTT法观察肠胃清药物血清对HCT8/V细胞株多药耐药性的逆转作用,采用高效液相色谱方法检测肠胃清药物血清作用后的耐药细胞内VCR药物浓度的改变。结果:本实验所采用的人结直肠癌耐VCR细胞株HCT8/V的耐VCR倍数为20.24倍,且对5-氟尿嘧啶、顺铂、羟基喜树碱和丝裂霉素这4种结构和作用机制各异的化疗药物有交叉耐药现象,具有多药耐药性,肠胃清能够逆转HCT8/V的耐药现象。高效液相色谱法结果显示,肠胃清药物血清处理HCT8/V48h后,细胞内的VCR浓度明显增高,且呈剂量依赖性。结论:肠胃清药物血清可提高HCT8/V细胞内化疗药物的浓度,有效逆转耐药细胞的多药耐药现象。

康莱特注射液合并健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的疗效初步研究

目的:探讨康莱特注射液合并健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的作用。方法:24只裸鼠皮下接种人胰腺癌细胞PANC-1,10d后随机分成4组,每组6只裸鼠。对照组给予生理盐水;康莱特组自接种第10天起连续给药10次,给药剂量为5·0g/kg,静脉推注;健择组在接种第12天给药1次,给药剂量为60mg/kg;合并给药组剂量及给药时间同单独给药组。停药后1周脱颈处死动物,解剖裸鼠,称体质量、瘤质量,测量肿块大小并计算抑瘤率。结果:单独注射康莱特及健择组的抑瘤率分别为12·24%和13·26%;合并用药组抑瘤率为40·11%,明显高于单独用药组。结论:康莱特注射液与健择对移植于裸鼠的人胰腺癌的抑制作用具有协同效应。

西黄丸的抗肿瘤作用及临床应用研究进展

西黄丸为具有确切临床疗效的经典抗癌中药名方,其通过抑制肿瘤细胞和肿瘤干细胞的生长及侵袭、抗新生血管生成和逆转免疫抑制微环境等多种途径发挥抗肿瘤作用。本文对西黄丸在治疗结直肠癌、乳腺癌和肝癌等方面的作用机制和临床研究进展进行了综述,为进一步研究和开发西黄丸抗肿瘤的中医药特色治疗提供参考。

天花粉蛋白抑制乳腺癌生长的实验研究

目的探讨天花粉蛋白(TCS)对MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞及乳腺癌裸鼠移植瘤的影响。方法四唑盐比色法(MTT)检测TCS处理前后细胞的增殖情况;流式细胞术(FCM)检测TCS处理前后细胞周期变化和凋亡率;将MDA-MB-231细胞接种于裸鼠,成瘤后分为对照组、TCS组和盐水组。检测各组裸鼠移植瘤体积、瘤重和肝、肾功能、血常规变化。结果随着TCS作用时间延长、浓度增大、MDA-MB-231和MCF-7细胞生长受到明显抑制;TCS处理后细胞阻滞于G0/G1期,并可检测到凋亡峰;TCS组裸鼠移植瘤体积和瘤重较对照组明显缩小,TCS对荷瘤裸鼠肾功能、血常规无明显影响,可引起谷丙转氨酶轻度升高。结论TCS可抑制MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞增殖和乳腺癌裸鼠移植瘤生长。

双氢青蒿素抗肿瘤分子生物学机制研究进展

青蒿素作为抗疟特效药在临床应用中存在水溶性小、口服效果差等缺点，因此研究人员开发了保留其母核的多种衍生物。其中双氢青蒿素（DHA）的抗疟活性更强，且具有在体内代谢速度快、水溶性好等优点，同时DHA对肿瘤细胞也有良好的抑制效果，且其分子生物学作用机制与自身结构中的过氧桥密切相关。由于肿瘤细胞比正常细胞需要摄取更多的铁离子，因此肿瘤细胞膜上存在大量的转铁蛋白受体。DHA能在亚铁离子的存在下使过氧桥发生断裂，产生自由基从而对肿瘤细胞发挥杀伤作用，并能使转铁蛋白受体发生内吞，阻止肿瘤细胞从外界摄入必需的铁离子。本文主要从DHA加速细胞氧化损伤、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长增殖和侵袭转移以及逆转肿瘤细胞多药耐药等方面对其抗肿瘤的分子生物学机制进行综述。

艾迪联合化疗治疗晚期肺癌的临床疗效观察

观察艾迪配合联合化疗与单纯联合化疗治疗中晚期肺癌的临床疗效。72例中晚期肺癌随机分为两组,艾迪配合联合化疗组(治疗组)和单纯联合化疗组(对照组)。结果:治疗组(37例)与对照组(35例)的近期疗效分别为51.4%和54.3%,临床症状改善率分别为67.6%和42.9%、生存质量改善率分别为70.3%和45.7%,两组在临床症状的改善和生存质量的改善方面差异有统计学意义,P值分别为0.035和0.019。初步研究结果提示,艾迪配合联合化疗治疗中晚期恶性肿瘤有助于临床症状的改善和生存质量的提高。

抑瘤饮影响小鼠S180移植瘤组织中Bcl-2和Bax表达的动态研究

目的动态研究中药复方制剂抑瘤饮体内对小鼠S180移植肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达的影响。方法BALB/c小鼠右腋皮下接种S180肿瘤细胞24 h后开始,抑瘤饮组小鼠每日灌服抑瘤饮,对照组小鼠每日灌服等量凉开水。分别于第10、20、30、40 d杀鼠取瘤制成切片,免疫组织化学染色法检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax表达,以图像分析系统对染色结果进行测定。结果各时间点抑瘤饮组肿瘤组织中Bcl-2表达均低于对照组,Bax表达均高于对照组。结论抑瘤饮体内抑瘤作用可能与下调肿瘤组织中Bcl-2表达,上调肿瘤组织中Bax表达,促进肿瘤细胞凋亡有关。

肺岩宁方调节上皮-间质细胞转化因子Twist、Snail、Sip1及E-cadherin的研究

目的:研究中药复方肺岩宁方对上皮-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)因子Twist、Snail、Sip 1及E-cadherin mRNA表达的影响。方法:选用C57小鼠Lewis肺癌转移肿瘤模型,采用实时PCR的方法观察肺岩宁方作用前后肿瘤组织和转移肺组织中Twist、Snail、Sip 1及E-cadherin的mRNA表达。结果:Twist、Snail在C57 Lewis肺癌转移肺组织中mRNA表达较正常C57小鼠肺组织中明显增高(P<0.01),Sip 1则无明显差异(P>0.05),而E-cadherin mRNA表达降低(P<0.01);C57Lewis肺癌小鼠经过肺岩宁方治疗后,Twist、Snail在肿瘤组织和转移肺组织中mRNA表达较模型组明显降低(P<0.05)。而E-cadherin的表达增高(P<0.01),但Sip 1 mRNA表达在肺岩宁方治疗前后无明显变化(P>0.05)。结论:在C57小鼠Lewis肺癌转移肿瘤模型中证实了上皮-间质细胞转化是肿瘤转移的关键步骤之一,调节上皮-间质细胞转化核转录因子Twist、Snail和标志因子E-cadherin是肺岩宁方抗肿瘤转移的重要途径之一。

抗癌膏穴位贴敷对Lewis肺癌模型小鼠癌细胞周期移行的影响

目的:探索抗癌膏穴位贴敷治疗癌症的作用机制。方法:用C57BL/6近交系小鼠,瘤细胞悬液皮下接种法造模,造模5日后用抗癌膏贴敷接种部位及“肺俞”穴,隔日治疗1次,治疗7次后,用流式细胞技术进行癌细胞周期分析。结果:抗癌膏使G1期细胞比例显著增加（P<0.05）,S期细胞比例显著减少（P<0.01）,细胞增殖指数显著下降（P<0.05）,癌细胞周期移行在G1期到S期之间发生阻滞。结论:抗癌膏通过抑制癌细胞增殖起到抗癌作用。

拉帕替尼与绿原酸联合应用抑制巨噬细胞M2型极化及抗乳腺癌转移的作用研究

目的：研究拉帕替尼与绿原酸联合应用对抑制巨噬细胞M2型极化的影响及其在乳腺癌转移中的作用。方法：采用IL-13建立巨噬细胞M2型极化的体外模型，流式细胞术检测拉帕替尼和绿原酸合用对巨噬细胞M2型表面标志物CD206的影响；实时定量PCR检测拉帕替尼和绿原酸合用对巨噬细胞M2型特异性基因表达的影响；采用自发乳腺癌且发生肺转移的MMTV—PyVT小鼠模型考察两药合用对乳腺癌肺转移的影响，观察肺转移灶组织HE染色结果并统计转移灶点数；免疫荧光法分析乳腺癌组织中巨噬细胞的M2型极化情况。结果：拉帕替尼与绿原酸合用能够有效抑制IL-13诱导的F4／80hiCD206hi细胞（即M2型巨噬细胞）增多[（42．17％±2．59％）与（61．15％±7．58％），P〈0．05]；两药合用能明显下调由IL-13诱导的Yml基因的上调[（1．8±0．0）与（1．0±0．0），P〈0．05]，且其作用比绿原酸单给药组强[（0．9±0．1）与（1．8±0．0），P〈0．051；拉帕替尼与绿原酸合用能显著减少小鼠肺转移灶点数[P〈0．05]；两药合用与对照组比较能降低瘤内CD206阳性细胞所占巨噬细胞的比例I（6．08％±2．60％）与（29．04％±5．86％），P〈0．05]。结论：拉帕替尼与绿原酸的联合用药能有效抑制巨噬细胞的M2型极化以及乳腺癌的转移。

蒲葵子多糖含量测定及其抗氧化活性研究

目的测定蒲葵子多糖的含量,并探讨其体外抗氧化活性。方法采用热水提取法提取蒲葵子粗多糖LCP,经纯化得到总多糖LCP1和精制多糖LCP2。经苯酚-硫酸显色后,在490 nm处进行比色测定总多糖LCP1含量;采用分光光度法检测多糖LCP2对自由基.OH、O2-.、DDPH.的清除作用。结果总多糖LCP1含量为51.94%(RSD 1.39%,n=3)。1.0 mg/mL LCP2在体外对.OH、O2-.、DDPH.的清除率分别为66.31%、60.11%、92.9%,且其清除能力与浓度有明显的量效关系。结论采用苯酚-硫酸法测定蒲葵子多糖的含量简便、快速、准确、灵敏度好。蒲葵子多糖具有较好的体外抗氧化活性,可作为天然抗氧剂应用于传统医药中。

中药加化疗治疗局部晚期胰腺癌的疗效分析

观察中医药加由健择和顺铂组成的化疗方案时局部晚期胰腺癌的疗效。遵照患者意愿,有选择地将37例局部晚期胰腺癌患者分为治疗组(中西医结合组)和对照组(单纯化疗组)。治疗组化疗期间和化疗后继续服中药巩固疗效。结果两组近期疗效差异无统计学意义,临床获益率和远期疗效治疗组明显优于对照组,P<0．01。初步研究结果提示,中医药配合化疗可提高局部晚期胰腺癌的临床获益率,延长生存期。

甜瓜蒂3种提取物体外抗肿瘤活性的比较研究

目的观察甜瓜蒂3种提取物对体外培养肿瘤细胞增殖的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法以溶剂提取法分别得到甜瓜蒂的水提取物、75%乙醇提取物、95%乙醇提取物。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测这3种提取物对人胃腺癌细胞SGC-7901、人肺癌细胞NCI-H460、人肝癌细胞SMMC-7721、人白血病细胞K562及小鼠成纤维细胞L929的增殖抑制作用。应用流式细胞术检测样品对细胞周期和凋亡的影响。结果甜瓜蒂水提取物、75%乙醇提取物、95%乙醇提取物作用72 h后,在测定的浓度范围内对SGC-7901、NCI-H460、SMMC-7721、K562及L929等5种细胞均表现出不同程度的生长抑制作用,量效关系基本明确。甜瓜蒂75%乙醇提取物、95%乙醇提取物组对各细胞的半数抑制浓度(IC_(50))均低于水提取物组(均P<0.05),其中95%乙醇提取物组对SGC-7901、SMMC-7721、K562及L929细胞的IC_(50)明显低于75%乙醇提取物组(均P<0.05)。5种细胞中SGC-7901对甜瓜蒂提取物较为敏感,该细胞经0.4、0.6、0.8 mg/L的95%乙醇提取物作用48 h后,细胞凋亡率分别为(8.32±0.55)%、(11.06±1.15)%、(12.25±1.51)%;细胞被阻滞在S期、G2/M期。结论甜瓜蒂95%乙醇提取物体外对SGC-7901具有显著的抑制作用,其机制可能与诱导细胞凋亡和抑制细胞周期有关。

癌毒病机理论指导下消癌汤联合腹腔镜辅助远端胃切除术治疗老年胃癌的临床研究

目的探讨基于癌毒病机理论的指导下的消癌汤联合腹腔镜辅助远端胃切除术治疗老年胃癌的临床疗效。方法选取98例老年胃癌患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组与对照组,每组49例。对照组患者行腹腔镜辅助远端胃切除术治疗,而观察组则在对照组基础上另给予消癌汤,2组患者治疗时间均为3个月。治疗后,评价2组治疗效果。治疗前、后,分别对2组患者胃痛、胃胀、反酸、进食梗阻及恶心/呕吐等中医证候评分进行观察,检测患者Ig A、Ig G、Ig M、CD3+及CD4+等免疫指标含量。治疗后,对2组患者进行为期2年的随访,观察治疗后1年与2年生存率,并统计患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)及总生存期(overall survival,OS)。结果观察组总有效率为89.8%,对照组为75.5%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组胃痛、胃胀、反酸、进食梗阻及恶心/呕吐等中医证候评分均低于对照组(均P<0.05)。治疗后,观察组Ig A[(17.45±1.98)g/L vs(8.15±1.45)g/L]、Ig G[(3.19±0.46)g/L vs(1.15±0.18)g/L]、Ig M[(3.27±0.49)g/L vs(1.19±0.19)g/L]、CD3+[(48.25±4.15)%vs(40.52±3.71)%]及CD4+[(39.73±3.24)%vs(30.75±3.49)%]水平均高于对照组(均P<0.05)。观察组1年生存率[87.2%vs 76.1%]、2年生存率[70.2%vs 52.1%]、PFS[(20.98±2.38)个月vs(18.71±1.92)个月]及OS[(18.41±1.62)个月vs(16.51±1.43)个月]均高于对照组(均P<0.05)。结论基于癌毒病机理论指导下消癌汤联合腹腔镜辅助远端胃切除术治疗老年胃癌疗效确切,可有效改善患者症状,提高患者免疫力。

复方斑蝥胶囊联合 CHOP 化疗治疗恶性淋巴瘤疗效观察

【目的】探讨复方斑蝥胶囊联合CHOP方案化疗对恶性淋巴瘤患者的临床近期疗效。【方法】本院收治的97例恶性淋巴瘤患者，分为对照组（ n＝51）及观察组（ n ＝46）。对照组单用CHOP方案化疗，观察组在CHOP方案基础上加用复方斑蝥胶囊（一次3粒，每天2次口服）。21 d后重复化疗；疗程结束后进行疗效评定。【结果】观察组总有效率为78．26％（36／46）；对照组总有效率为64．70％（33／51）；观察组总有效率显著高于对照组，且两组相比较差异有显著性（ P ＜0．05）；K PS评分改善率分别是86．96％和66．67％％，且两组相比较差异有显著性（ P ＜0．05）；观察组中不良反应低于对照组，且两组相比较差异有显著性（ P ＜0．05）。【结论】复方斑蝥胶囊联合CHOP化疗治疗恶性淋巴瘤的临床近期疗效显著，不良反应低，值得临床推广应用。