氨氧乙酸对香蕉采后成熟的调控及其生理机制

前期的研究发现Ma GAD1基因的表达与香蕉采后乙烯生物合成及果实成熟密切相关。本研究在此基础上,发现Ma GAD1表达的有效抑制剂氨氧乙酸(AOAA)能够延缓香蕉采后成熟。生理学分析表明,外施AOAA能够延长香蕉果实发生生理跃变的时间。实时荧光定量PCR分析表明,外施AOAA能够抑制Ma GAD1和Ma ACS1基因的表达。所以,AOAA通过抑制Ma GAD1和Ma ACS1基因的表达和延缓香蕉果实生理跃变,推迟香蕉果实采后成熟。本研究从理论上证明AOAA能够延缓香蕉果实成熟,揭示AOAA延缓香蕉果实成熟生理机制,并且从实际生产上提供一种可能应用于香蕉保鲜的新方法。

2种乙烯抑制剂对连作地黄生长的影响

通过对地黄生长过程中乙烯合成及转运途径的干扰,减轻地黄化感自毒作用的效果,为消减地黄连作障碍提供理论依据和技术支持。在地黄重茬地块选取6个小区,分别以乙烯合成抑制剂氨氧乙酸(AOAA)、乙烯受体抑制剂1-甲基环丙烯(1-MPC)的3个浓度进行处理,并选取正茬、重茬地黄作为对照,根据地黄的死亡率、生长指标、相对电导率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、根系活力等指标探讨阻断植株体内乙烯释放对连作地黄生长的影响。结果表明,经乙烯抑制剂1-MCP、AOAA处理的地黄植株,与重茬对照植株相比死亡率明显降低、相对电导率减小、超氧化物歧化酶活性增加、根系活力增加、植株生长状况得到改善。乙烯抑制剂1-MCP、AOAA对地黄生长过程中乙烯的合成途径造成干扰,从而减轻地黄连作障碍。

异源表达溶多糖单加氧酶Ao AA13基因提高红曲霉红曲色素产量

红曲色素作为一种可食用天然色素,广泛应用于食品工业领域。为提高红曲色素产量,本研究从米曲霉中克隆得到溶多糖单加氧酶AoAA13基因,构建基因表达载体,通过根癌农杆菌介导转化到红曲霉CICC41233,获得工程菌株红曲霉AA13-4。相比红曲霉CICC41233,红曲霉AA13-4发酵底物中大米淀粉剩余含量明显偏低。发酵6 d,红曲霉CICC41233,总色价为39.05U,而红曲霉AA13-4红曲色素总色价为44.09 U,提高了12.9%;红曲霉AA13-4中红曲色素合成基因簇关键基因pks、fasA、fasB的相对表达量提高了19.09倍,2.57倍,6.67倍。研究表明,过表达米曲霉AoAA13基因,能够提高红曲霉红曲色素产量。

药物对小鼠胃片GABA摄取的影响

本文应用同位素示踪技术和离体孵育小鼠胃片的方法,探讨了与调节胃功能活动的GABA相关的药物对胃片摄取GABA的影响。实验显示,GABA-T抑制剂AOAA在低剂量时(1～5mmol·L^(-1))可抑制胃片摄取GABA(P<0.01),而高剂量时(10mmol·L^(-1))能促进GABA摄取(P<0.05)。蝇(?)醇(Muscimol),是一种GABA_A受体激动剂,0.5μg·ml^(-1)时能促进胃片摄取GABA(P<0.01)。胆碱能神经M型受体阻断剂阿托品(0.01～0.25mg·ml^(-1))能抑制胃片摄取GABA(P<0.01)。盐酸(0.01～0.05N)和胃蛋白酶(0.05～1mg·ml^(-1))二者都能促进胃片摄取GABA(P<0.05或0.01)。这些结果提示:胃的GABA摄取系统可能有一种负反馈式自身调节机制。即当GABA调节胃功能活动增强时,它会加速GABA摄取,结果是尽快地终止GABA对胃的效应;相反当GABA调节胃功能活动减弱时,可抑制GABA摄取,结果是保持GABA对胃的作用,从而维持胃功能的稳态。

脑室注射GABA对小鼠胃粘液屏障的影响及其机制探讨

本文报道小白鼠脑室注射GABA、GABA-T抑制剂AOAA、GABA_A受体阻断剂Bicuculline、GABA_B受体激动剂Baclofen以及皮下注射胆碱能M受体阻断剂阿托品和肌肉注射肾上腺素能α受体阻断剂酚妥拉明对胃粘液屏障的影响。实验结果表明,脑室注射GABA(1-3μmol)可减少胃壁粘液量,并呈现明显的量—效依赖关系。AOAA(0.2μmol)、Bicuculline(0.2μmol)和Baclofen(4μmol)都使胃壁粘液量显著减少(P<0.01)。皮下注射阿托品(0.2mg·kg^(-1))使胃壁粘液量显著下降,并可阻断GABA抑制胃壁粘液分泌的效应;相反,肌肉注射酚妥拉明(2.5mg·kg^(-1))使胃壁粘液量显著增加,但也能消除GABA的抑制效应。这说明中枢抑制性神经递质GABA与胃粘液屏障密切相关。可能交感输出与抑制胃壁粘液分泌有关。而迷走输出与促进胃壁粘液分泌有关。可能外源性GABA通过激活脑中GABA_B受体后,同时抑制迷走输出而增加交感输出,导致胃壁粘液分泌减少,胃粘液屏障减弱。

同型半胱氨酸致神经管畸形小鼠模型的建立及其作用机制

目的建立同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)致神经管畸形(neural tube defect,NTD)的小鼠模型,并探讨其作用机制。方法以单独使用同型半胱氨酸硫代内酯(homocysteine thiolactone,HTL)及联合胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)抑制剂氨基氧乙酸(aminooxyacetic acid,AOAA)建立小鼠NTD模型,其中单独使用HTL的剂量为100、300、500、700 mg/(kg·d),联用组中HTL的剂量为400、500、600 mg/(kg·d),AOAA剂量均为30 mg/(kg·d),于小鼠孕6.5~10.5 d连续给药,均经腹腔注射。选择最佳剂量建立NTD小鼠模型(NTD组),同时设正常对照组。ELISA法检测孕鼠血液中Hcy水平及胚胎脑组织中S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine,SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)水平,Click-i T EdU成像试剂盒检测小鼠胚胎神经上皮细胞的增殖情况,Western blot法检测胚胎脑组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。结果建立NTD的小鼠模型最佳方案为500 mg/(kg·d)HTL+30 mg/(kg·d)AOAA,该条件下NTD发生率最高,死亡率较低。与正常对照组比较,NTD组Hcy、SAH和SAM含量均显著升高(P<0.01),SAM/SAH比值明显下降(P<0.01);胚胎神经上皮细胞增殖受到显著抑制(P<0.05);PCNA的表达水平显著下降(P<0.05)。结论联合使用HTL与AOAA成功建立了小鼠的NTD模型,抑制细胞增殖可能是导致NTD发生的重要机制。