红藻氨酸致敏癫痫大鼠海马内AP-1 DNA结合活性和成分的改变(英文)

一次皮下注射惊厥剂量（7．5mg／kg）的红藻氨酸（kainicacid，KA），诱发Fisher344大鼠出现急性癫痫发作，7d后即可形成癫痫敏感大鼠。继用Gelshift、Super－shift和Westernblot方法测定大鼠海马内AP－1DNA结合活性及其组成成分。Gelshift结果显示，癫痫敏感大鼠海马内AP－1DNA结合活性的基础水平较对照组为高；Super-shift实研表明仅Fra和JunD抗体能把AP－1蛋白滞留到较高的位置；Westernblot进一步证明JunD蛋白包括43，39and28kDaJund；又癫痫敏感大鼠若第二次接受癫痫刺激，其AP－1复合物的活性及成分均再次发生改变。以上资料提示AP－1DNA结合活性的增高和高水平的JndD很可能在癫痫敏感性长期持续增高的维持中起重要作用。

激活蛋白-1信号转导通路活化与结直肠癌转移的相关性研究

目的探讨激活蛋白-1(AP-1)在结直肠癌及癌周组织中与DNA探针结合活性的变化及AP-1信号转导通路活化与结直肠癌转移的关系。方法采用电泳迁移率分析方法,检测30例结直肠癌手术切除标本及癌旁2cm、5cm组织和远癌切端组织中AP-1与DNA探针的结合活性;采用定量逆转录聚合酶链式反应方法检测各位点血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA转录水平。结果结直肠癌组织AP-1与DNA探针的结合活性明显高于癌旁5cm组织和远癌切端组织(P<0.01);结直肠癌组织AP-1结合活性与肿瘤浸润程度、淋巴结转移呈明显正相关(P<0.01),而与肿瘤组织学分型以及肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)。结直肠癌组织VEGF、MMP-9mRNA转录水平明显高于癌旁组织和癌远切端组织(P<0.01,P<0.05)。结直肠癌组织AP-1结合活性增强与VEGF、MMP-9高表达显著相关(P<0.01)。结论AP-1信号转导通路与结直肠癌浸润和转移过程密切相关;此通路的活化参与肿瘤转移过程中肿瘤新生血管生成和细胞外基质降解。

醛固酮对肝星状细胞激活蛋白-1通路调控的体外研究

目的探讨醛固酮(Aldo)对肝星状细胞(HSC)激活蛋白-1(AP-1)信号转导通路的影响。方法采用HSC-T6细胞株,分别予Aldo 1μmol/L处理10、30、60、120、180 min,蛋白质印迹法检测磷酸化P42/44蛋白的表达。另外,观察细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂-U0126,抗氧化剂-乙酰半胱氨酸(NAC)(均先预处理60 min,再予Aldo刺激)和肿瘤坏死因子α(TNF α)对磷酸化P42/44蛋白表达的影响。Aldo在干预30、60、120、240 min后,电泳迁移率变更分析(EMSA)检测AP- 1 DNA结合活性的变化;予U0126和NAC干预后,EMSA检测AP-1 DNA结合活性;逆转录聚合酶链反应检测α1-1型前胶原基因的表达。结果Aldo可诱导磷酸化P42/44的表达,并呈时间依赖性,10min 达到峰值,之后逐渐减低。U0126可抑制磷酸化P42/44的表达。Aldo可增强HSC的AP-1的DNA结合活性。U0126可以显著抑制Aldo诱导的AP-1的活化,NAC部分抑制Aldo诱导的AP-1的活化。Aldo可诱导α1-1型前胶原mRNA的表达。U0126和NAC可显著抑制Aldo诱导的α1-1型前胶原mRNA表达增强。结论Aldo可经ERK通路诱导HSC AP-1结合活性增强。Aldo可经AP-1通路调控α1-1型前胶原基因的表达。