蝎毒抗癌多肽对肝肿瘤的抑制作用研究

目的 :观察蝎毒抗癌多肽 (APBMV)对肝肿瘤的抑制作用。方法 :噻唑蓝 (MTT)法、台盼蓝拒染法、集落形成以及H2 2 荷瘤小鼠模型。结果 :APBMV导致SMMC - 772 1细胞代谢MTT的能力显著低于对照组 ,APBMV的IC50 为 11 33μg/mL ;APBMV能显著抑制该细胞的生长 ,剂量 -效应关系明显 ,其IC50 分别为 15 87μg/mL、13 0 5 μg/mL和 8 70 μg/mL ;当APBMV的浓度 >8μg/mL时 ,SMMC - 772 1细胞的集落形成率显著低于对照组。APBMV能明显抑制H2 2 带瘤小鼠肿瘤的生长 ,生长抑制率达 37 31% (P <0 0 1) ,H2 2 带瘤小鼠外周血白细胞计数和脾脏指数无明显变化或略高于对照组 ,而 5 -Fu治疗组H2 2 带瘤小鼠白细胞计数和脾脏指数均明显下降(P <0 0 1)。结论 :APBMV是存在于东亚钳蝎蝎毒中的一种有效低毒的抗肿瘤成分 ,能够抑制SMMC - 772 1和H2 2 两种肝癌细胞的生长。

东亚钳蝎毒抗癌多肽对Eca109 细胞和HeLa 细胞的毒性作用

目的和方法：采用ＭＴＴ 比色法、生长抑制实验、集落形成抑制实验，探讨东亚钳蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｂｕｔｈｕｓ Ｍａｒｔｅｎｓｉｉ Ｖｅｎｏｍ ，ＡＰＢＭＶ） 对Ｅｃａ １０９ 细胞和ＨｅＬａ 细胞的细胞毒作用。结果：ＡＰＢＭＶ 对Ｅｃａ１０９ 细胞有明显的毒性作用，且呈显著量效关系，处理细胞２４ ｈ 和７２ ｈ 的ＩＣ５０ 分别为０－０２７μｇ·ｍＬ－１ 和０－０２４ μｇ·ｍＬ－１ 。ＡＰＢＭＶ对Ｅｃａ １０９ 细胞的生长抑制作用呈明显的时效和量效关系。处理Ｅｃａ １０９ 细胞２４ ｈ 、４８ ｈ 、７２ ｈ 的ＩＣ５０ 分别为０－０３２μｇ·ｍＬ－１，０－０２８ μｇ·ｍ Ｌ－１ ，０－０２３ μｇ·ｍＬ－１ 。ＡＰＢＭＶ 还显著抑制Ｅｃａ１０９ 细胞的集落形成，并有明显的量效关系，其ＩＣ５０ 值为０－０２３μｇ·ｍＬ－１ 。但ＡＰＢＭＶ 对ＨｅＬａ 细胞的作用不明显。结论： ＡＰＢＭＶ 对肿瘤细胞的杀伤或生长抑制作用具有一定的肿瘤差异性。

东亚钳蝎毒抗癌多肽对人肿瘤细胞系和动物移植瘤的作用

目的 :研究东亚钳蝎毒抗癌多肽 (APBMV)对人早幼粒白血病细胞系HL 6 0和人肝癌细胞系SMMC 772 1及对小鼠肝癌H2 2 移植瘤的作用。方法 :体外应用MTT法、生长抑制实验和集落形成实验 ,观察APBMV对HL 6 0、SMMC 772 1及H2 2 瘤细胞的作用 ;体内实验采用小鼠H2 2 实体瘤模型 ,检测肿瘤生长抑制率 (IR)、白细胞计数(WBC)和脾脏指数 (SI) ,观察APBMV对H2 2 带瘤小鼠的影响。结果 :APBMV对HL 6 0和SMMC 772 1细胞均具较强的毒性作用 ,其IC50 值分别为 10 .74 μg ml和 11.33μg ml;APBMV可显著抑制两种细胞的生长 ,剂量效应关系明显 ,HL 6 0和SMMC 772 1细胞 2 4h、4 8h和 96h的IC50 值分别为 19.4 1μg ml、9.90 μg ml、11.4 1μg ml和l5 .87μg ml、13.0 5μg ml、8.70 μg ml;APBMV浓度 >8μg ml时 ,可明显抑制SMMC 772 1细胞的集落形成 (P <0 .0 1) ,IC50 为 10 .83μg ml。H2 2 细胞经APBMV处理后 ,代谢MTT的能力明显低于对照组 ,但剂量效应关系不明显 (P >0 .0 5 )。APBMV能显著抑制H2 2 带瘤小鼠的肿瘤生长 ,IR最高达 4 0 .30 % (P <0 .0 1) ,小鼠WBC和SI无明显变化或略高于对照组 ,而 5 Fu组小鼠WBC和SI均明显下降 (P <0 .0 1)。结论 :APBMV是东亚钳蝎蝎毒中有效低毒的抗肿瘤成分 ,对HL 6 0、SMMC

蝎毒抗癌多肽及其分离组分分析及鉴定方法

目的 :探讨蝎毒抗癌多肽 (antineoplasticpolypeptidefromButhusmartensiivenom ,APBMV)及其分离组分的分析及鉴定方法。方法 :采用SepharoseFF阳离子交换凝胶柱 (2 5cm× 5cm交换柱 ,流速 0 .8ml/min ,梯度洗脱 12 0 0min)层析法分离APBMV ,用高效毛细管电泳 (highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE)及高效液相色谱法 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)分析检测。结果 :用SepharoseFF阳离子交换凝胶层析可将APBMV分离为 2个峰。经HPCE、HPLC分析显示 ,APBMV主要成分为峰Ⅰ～Ⅳ ,其分离组分分别以峰Ⅰ或峰Ⅲ为主 ,其纯度分别为86 .35 %、6 9.5 7%。结论 :SepharoseFF用于进一步分离APBMV可望获得较高纯度的单一有效成分 ,HPCE及HPLC均可较好地显示蝎毒中小分子多肽的组成及相对含量 。

蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响

目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌CNE 2Z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE 2Z细胞膜电位 ,MTT法观察APBMV对CNE 2Z细胞的毒性作用。结果 :CNE 2Z细胞经APBMV处理48h后 ,细胞膜负电位 (13 0 0± 3.5 8)mV明显小于空白对照组 (2 3 0 0± 8.2 1)mV ,P <0 .0 1,细胞膜呈去极化状态 ;CNE 2Z细胞代谢MTT的能力下降 ,显示明显的毒性反应。结论 :APBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过降低CNE 2Z细胞膜电位 。

蝎毒抗癌多肽对4种人肿瘤细胞系的作用

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓＭａｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对人肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、台盼蓝拒染法和集落形成观察为指标，丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）为阳性对照药品，以ＡＰＢＭＶ４ｍｇ／Ｌ，８ｍｇ／Ｌ，１２ｍｇ／Ｌ和１６ｍｇ／Ｌ处理４种人肿瘤细胞（人早幼粒白血病细胞株ＨＬ６０、人肝细胞癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１、人低分化鼻咽上皮癌细胞株ＣＮＥ２Ｚ和人胃癌细胞株ＭＧＣ８０３），选用不同的作用时间点，分别观察ＡＰＢＭＶ对上述细胞的影响。结果：ＡＰＢＭＶ对ＨＬ６０、ＳＭＭＣ７７２１、ＣＮＥ２Ｚ和ＭＧＣ８０３细胞均有显著的细胞毒性作用，ＨＬ６０和ＳＭＭＣ７７２１比后两者显示出更好的量效关系（ｒ＝０．９８２８，ｒ＝０．９８６３，Ｐ＝０．０２）。ＡＰＢＭＶ处理ＨＬ６０和ＳＭＭＣ７７２１细胞２４ｈ，４８ｈ和９６ｈ后，两种细胞的生长均受到抑制（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），并有显著的剂量效应关系；处理ＳＭＭＣ７７２１细胞２４ｈ，４８ｈ和９６ｈ时ＡＰＢＭＶ的ＩＣ５０分别是１５．８７ｍｇ／Ｌ、１３．０５ｍｇ／?

蝎毒抗癌多肽对肝癌小鼠免疫功能的影响

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对肝癌Ｈ２２带瘤小鼠ＮＫ细胞活性，外周血白细胞计数，淋巴细胞增殖，迟发型超敏反应和血清溶血素水平的影响。方法：将接种Ｈ２２细胞２４ｈ后的带瘤小鼠随机分为４组，每组１０只：空白对照组（等体积生理盐水，腹腔注射），５Ｆｕ组（５Ｆｕ１０ｍｇ·ｋｇ－１），ＡＰＢＭＶ组（ＡＰＢＭＶ００３ｍｇ·ｋｇ－１，腹腔注射），ＡＰＢＭＶ＋５Ｆｕ组（ＡＰＢＭＶ００３ｍｇ·ｋｇ－１＋５Ｆｕ１０ｍｇ·ｋｇ－１，腹腔注射），连续给药５ｄ。给药期间及给药后对带瘤小鼠进行相应的处理，观察经治疗后Ｈ２２带瘤小鼠上述指标的变化。结果：ＡＰＢＭＶ组及ＡＰＢＭＶ＋５Ｆｕ组带瘤小鼠的ＮＫ细胞活性和ＤＮＣＢ诱导的皮肤迟发型超敏反应明显增强，淋巴细胞转化指数明显增高，与对照组及单用５Ｆｕ组相比有显著差异（Ｐ＜００５或Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．００１）；ＡＰＢＭＶ单独应用使带瘤小鼠白细胞计数显著提高（与对照组相比Ｐ＜００１），５Ｆｕ组白细胞计数明显减少（与对照相比Ｐ＜００１），ＡＰＢＭＶ与５Ｆｕ联合应用?

蝎毒抗癌多肽对移植性肿瘤的抑制作用

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对小鼠肝癌（Ｈｅｐａｔｏｍａ２２，Ｈ２２）和小鼠黑色素瘤（ｍｅｌａｎｏｍａＢ１６）两种动物移植性肿瘤的抑制作用。方法：采用肿瘤质量和肿瘤生长抑制以及带瘤小鼠外周血白细胞计数和脾脏指数为观察指标。将接种Ｈ２２和Ｂ１６２４ｈ后的带瘤小鼠分为对照组，５Ｆｕ治疗组和ＡＰＢＭＶ的３个治疗组。ＡＰＢＭＶ治疗组小鼠分别给予ＡＰＢＭＶ０．０３ｍｇ·ｋｇ－１，０．０４ｍｇ·ｋｇ－１和０．０６ｍｇ·ｋｇ－１腹腔注射，５Ｆｕ组和对照组分别给予５Ｆｕ２０ｍｇ·ｋｇ－１和等体积生理盐水；给药１０ｄ后处死带瘤小鼠，取实体瘤称重并计算肿瘤生长抑制率。Ｈ２２带瘤小鼠于处死前眼球取血，计数外周血细胞，并取小鼠脾脏，称重，计算脾脏指数（ｓｐｌｅｅｎｉｎｄｅｘ，ＳＩ）。结果：ＡＰＢＭＶ在应用的３个剂量范围内对Ｈ２２均具有明显的抑制作用，抑制率均＞３０％，与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．００１）；ＡＰＢＭＶ的中、高剂量对Ｂ１６具有显著的抑制作用，抑制率分别为４０．３６％和４４．５８％，其对Ｂ１６的抑制作用强于５?

蝎毒抗癌多肽对人低分化鼻咽癌上皮细胞的抑制作用

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对人低分化鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２Ｚ）的毒性作用，从而找出ＡＰＢＭＶ抑制人鼻咽癌的最佳浓度。方法：用ＭＴＴ法测定ＡＰＢＭＶ对人低分化鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２Ｚ）的毒性。ＣＮＥ２Ｚ细胞培养于ＲＰＭＩ１６４０培养液中；选增生活跃，形态良好的细胞接种在９６孔培养板。细胞浓度为５×１０４ｍｌ－１。细胞被分为１０个实验组，ＭＭＣ阳性对照组、阴性对照组和８个ＡＰＢＭＶ实验组，实验组的ＡＰＢＭＶ质量浓度分别为１ｍｇ·Ｌ－１，２ｍｇ·Ｌ－１，３ｍｇ·Ｌ－１，４ｍｇ·Ｌ－１，５ｍｇ·Ｌ－１，６ｍｇ·Ｌ－１，７ｍｇ·Ｌ－１，８ｍｇ·Ｌ－１。加药后，细胞培养４８ｈ，然后加入ＭＴＴ１０μｌ·孔－１，继续培养４ｈ，加入２００ｇ／ＬＳＤＳ５００ｇ／ＬＤＭＦ混合溶液溶解细胞内的结晶体，测定５６０ｎｍ和６３０ｎｍ波长处的Ｄ值，并计算生长抑制率（Ｇｒｏｗｔｈｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｅ，ＧＩ）。结果：ＡＰＢＭＶ在２～８ｍｇ·Ｌ－１浓度范围内，ＧＩ＜５０％，ＣＴ＞５０％，其中在３～６ｍｇ·Ｌ－１浓度范围内，ＣＴ?

注射用蝎毒抗癌多肽热稳定性研究

目的：热稳定性实验，可望为蝎毒抗癌多肽（ＡＰＢＭＶ）粉针的生产、运输、储存和使用提供更科学的理论依据。方法：利用紫外分光光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳等法，测定了ＡＰＢＭＶ制剂的热稳定性。结果：在５０℃～８０℃的范围内，随着加热时间延长，样品Ａ２８０吸收度逐渐升高，聚丙烯酰胺凝胶电泳主色带逐渐变浅，但ｐＨ值、水溶性及外观色泽无明显改变。结论：根据上述结果，注射用ＡＰＢＭＶ在４℃下有效期暂定为５ａ。

3种蝎毒抗癌多肽制剂抑制小鼠肝癌及增强免疫的作用比较

目的：探讨不同的蝎毒抗癌多肽（ＡＰＢＭＶ）制剂经不同的给药途径对肿瘤及免疫的影响，并为ＡＰＢＭＶ制剂的临床应用提供实验依据。方法：肝癌（Ｈ２２）荷瘤小鼠６５只，雄性，体重（２０±２）ｇ，分别给予ＡＰＢＭＶ３种制剂（针剂、胶囊及乳剂）及５氟尿嘧啶（５Ｆｕ），给药１０ｄ后处死，观察外周血白细胞数、瘤块及脾脏重量的变化。结果：５Ｆｕ对Ｈ２２荷瘤小鼠肿瘤的抑制最高，可达４８．８１％；ＡＰＢＭＶ针剂对肿瘤的抑制率亦达４０．５９％，与阴性对照相比，差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）。ＡＰＢＭＶ乳剂、针剂及胶囊组的脾重指数分别为７４．２７ｍｇ／１０ｇ、７１．４２ｍｇ／１０ｇ及７３．３１ｍｇ／１０ｇ，与阴性对照组相比，均有显著增加（Ｐ＜０．０１）。ＡＰＢＭＶ乳剂及胶囊组的白细胞数目分别达到１４．２１×１０９Ｌ－１、１４．３６×１０９Ｌ－１，与阴性对照组相比，均有显著增加（Ｐ＜０．０１）；而ＡＰＢＭＶ针剂组的白细胞数目为１０．４１×１０９Ｌ－１，虽与阴性对照组相似，但较阳性对照组显著增加（Ｐ＜０．００１）。结论：ＡＰＢＭＶ３种制剂均可抑制肿瘤的生长、促进脾脏功能、升高白细胞数目及增强机体免疫能力。在实际应用过程中，ＡＰＢＭ?

蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞生长周期移行和p53表达的影响

目的 :观察蝎毒抗癌多肽 (APBMV)对CNE 2Z细胞生长周期和p5 3表达的影响。方法 :采用流式细胞仪双标法。结果 :APBMV处理CNE 2Z细胞 48h后 ,进入S期的细胞明显减少 ,处于G1期和G2期的细胞明显增多 ,APBMV 16mg/L处理CNE 2Z细胞 48h后 ,G1期、S期和G2期细胞的百分比分别为 5 9.7%、32 .3 %和 7.9% ,空白对照组的百分比分别为 5 3 .3%、45 .2 %和 1.5 % ,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 1或P <0 .0 0 1)。空白对照组CNE 2Z细胞P5 3蛋白 2 4h和 48h表达量处于较高水平 (2 7.2 3± 0 .93)和 (31.6 7± 1.75 ) ,经APBMV处理 2 4h或 48h后 ,P5 3蛋白表达量明显下降 ,与空白对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :APBMV能够阻止CNE 2Z细胞周期的移行 ,并抑制抑癌基因p5

蝎毒抗癌多肽对人白血病细胞生长的影响

目的:观察蝎毒抗癌多肽(APBMV)对体外培养的人早幼粒白血病细胞株HL-60生长的影响。方法:细胞毒性实验(MTT法)和生长抑制实验。结果:APBMV可使HL-60代谢MTT的能力显著低于对照组,其IC_(50)值为10.74μg/ml;在适当浓度,APBMV可显著抑制HL-60细胞的生长(P<0.01),剂量效应与时间效应关系明显,24h、48h和96h的IC_(50)值分别为19.41μg/ml、9.90μg/ml、11.41μg/ml,且24h与48h间、48h与96h间效应相比,均有显著相关关系(r=0.9660,P<0.05;r=0.9940,P<0.01);APBMV对HL-60细胞的生长抑制作用以48h为著,96h时效应不增强。结论:APBMV是东亚钳蝎蝎毒中有效低毒的抗肿瘤成分,可显著抑制白血病细胞的生长。

蝎毒抗癌多肽抗乙型肝炎肝纤维化20例疗效观察

１９９７年２月～１９９８年３月本院采用河南医科大学生物毒素中心研制的蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）静脉滴注方法治疗慢性乙型肝炎肝纤维化２０例，观察ＡＰＢＭ...

东亚钳蝎毒抗癌多肽抗肿瘤作用的体内试验

目的研究东亚钳蝎毒抗癌多肽(anticancerpolypeptidefromButhusMartensiiVenom,APBMV)的细胞毒作用和体内抗癌作用。方法体外试验用噻唑蓝还原法(MTT法)检测APBMV对体外培养的人结肠癌细胞(Lovo,HT-29)、人胃癌细胞(SGC-7901)的生长抑制作用。建立小鼠移植瘤模型,观察APBMV腹腔注射以及口服给药对S-180肉瘤的体内抑瘤作用。结果体外试验表明,APBMV对Lovo、SGC-7901和HT-29细胞的半数抑制浓度(IC50)依次为60、71、139μg/ml。体内试验表明,APBMV9、6、3mg/kg,腹腔注射作用10d后,对小鼠S-180肉瘤的平均抑瘤率依次为64%、53%和47%,与对照组相比有统计学意义。结论APBMV对多种人消化道肿瘤细胞有较强的生长抑制作用,并对小鼠移植癌具有抑制作用。

马氏钳蝎毒抗癌多肽与5-Fu对小鼠肝癌的联合治疗作用

目的 探讨马氏钳蝎毒抗癌多肽 (APBMV)单独及其与 5 Fu联合对小鼠肝癌抑瘤作用。方法 采用小鼠腹水型肝癌H2 2 的荷瘤模型观察了APBMV的体内抑瘤作用和对 5 Fu抑瘤作用的影响。结果 APBMV在所用剂量 [(0 .0 3 0 .0 6)mg (kg·d) ,用 10d]范围内对H2 2 荷瘤小鼠无显著的抑瘤作用。 5 Fu 2 0mg (kg·d)用 10d虽有较好的抑瘤效应 ,却有明显毒性反应。将 5-Fu剂量降低 1 2、1 4与APBMV合用则有良好的抑瘤作用 (生命延长率为 10 3 .8%、2 0 .4 % ,P <0 .0 5)且无明显的毒性反应。结论 APBMV可显著增强 5 Fu对肝癌的疗效、降低其毒性。