微RNA-224在体外对胆管癌细胞抗凋亡及促进增殖的作用

目的探讨微RNA-224（miR-224）在人胆管癌（CC）细胞凋亡与增殖中的调控机制以及在胆管癌细胞中是否存在miR-224-HOXD10-PAK4传导通路。方法利用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术测定CC和癌旁正常组织中miR-224的表达量。胆管癌QBC939细胞株病毒转染分为两组：细胞转染阴性对照组（NC组），细胞转染目的基因miR-224-down组（DOWN组）。记录NC组和DOWN组中QBC939细胞凋亡率及细胞克隆形成数。利用RT—PCR和蛋白印迹（Western blotting）检测NC组和DOWN组QBC939细胞中miR-224、AP15、PAK4、HOXD10的表达。结果（1）CC组织中miR-224的表达显著高于癌旁正常组织（P〈0．05）。（2）DOWN组QBC939细胞的miR-224表达显著低于NC组。DOWN组QBC939细胞凋亡率显著高于NC组。DOWN组QBC939细胞的克隆形成率显著低于NC组。（3）RT—PCR和Western blotting实验证实DOWN组QBC939细胞中AP15、HOXD10的表达明显高于NC组。（4）DOWN组QBC939细胞中PAK4的表达显著低于NC组。结论miR-224有体外抗QBC939细胞凋亡及促进QBC939细胞增殖的作用，是细胞增殖的重要调节因子。QBC939细胞中存在miR-224-HOXD10-PAK4信号传导通路。