大鼠心肌APJ受体及caveolin-1/ERK1/2表达的年龄变化研究

目的apelin是新发现的内源性肽,其受体是G蛋白偶联受体APJ,该实验比较不同年龄大鼠心肌APJ受体及信号分子caveolin-1/ERK1/2的表达差异。方法采用West-ern blot方法观察胎鼠、乳鼠、成年鼠、老龄鼠等不同年龄阶段心肌组织APJ受体、ERK1/2、pERK1/2、caveolin-1的表达及其增龄性变化。结果随年龄增长APJ受体、caveolin-1表达增加,ERK1/2及pERK1/2随年龄增长表达减少。结论APJ受体及其caveolin-1/ERK1/2途径可能与心脏的生长发育、衰老过程有关。

全反式维甲酸调节高血压大鼠肾脏AT_1/APJ受体表达平衡

目的探讨全反式维甲酸(atRA)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏血管紧张素1型受体(AT1)及其类似物APJ受体表达的影响。方法采用12wk♂SHR及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射atRA,为期1mon。分别用实时荧光定量PCR与免疫印迹技术测定atRA治疗后SHR肾脏组织AT1和APJ受体的表达情况。结果与WKY对照组相比,SHR肾脏组织中AT1受体mRNA和蛋白水平明显升高,APJ受体表达则出现下调(P均<0·01)。而atRA治疗后SHR肾脏AT1受体表达降低,APJ表达则得到回升,同时伴有血压下降(P均<0·05)。结论长期atRA治疗可调节SHR大鼠肾脏组织中AT1/APJ受体表达的平衡,提示转录调节剂atRA很可能对人类高血压病防治具有一定价值。

APJ受体参与压力诱导的心肌细胞肥大及其自噬、PI3K调节机制

目的：APJ受体是1993年发现的一种G蛋白偶联受体，与血管紧张素111型受体AT1有很高的同源性，其内源性配体为Apelim近来发现APJ受体在心肌肥厚形成中存在双重作用，心肌细胞中APJ受体的激活一方面可以改善心肌功能，另一方面却可以提高大鼠对压力诱导的心肌肥厚的敏感性。本文探讨APJ受体在压力诱导的心肌细胞肥大中的作用，并进一步探讨其自噬、P13K调节机制，为阐明APJ受体在压力诱导的心肌肥厚形成过程中的作用提供实验依据。

APJ受体的生物信息学分析

目的：APJ受体是apelin肽的G蛋白偶联受体，本实验室发现apelin／APJ系统促进血管平滑肌细胞增殖、促进单核细胞-血管内皮细胞粘附，为进一步了解APJ受体功能，将对褐家鼠APJ受体进行生物信息学分析，并预测其结构和功能。

APJ受体内源性配基apelin的组织分布及对血压的影响

目的观察APJ受体内源性配基apelin的心、脑、肾和血管等组织分布及对血压的影响,对apelin的心血管系统功能进行初步的探讨。方法用免疫组织化学方法检测apelin的组织分布。用PowerLab生物信号采集分析系统观察大鼠动脉血压、心率和动脉压力感受性反射敏感度的变化情况。结果apelin在心、脑、肾和血管等心血管系统有较广泛的分布;静脉注射apelin-13血压在2min内下降,并能维持5min,呈剂量依赖性,动脉压力感受性反射敏感度显著下降,但对心率无明显影响。结论apelin在心、脑、肾和血管等组织有分布,外源性apelin发挥降血压的作用。

高盐上调压力超负荷大鼠的脑内APJ受体表达

目的观察高盐对压力超负荷大鼠的交感神经活性和脑内Apelin和APJ系统的影响。方法♂SD大鼠,在肾动脉分支上方部分结扎腹主动脉,建立主动脉缩窄大鼠模型。术后4周,分别给予含8%Na Cl的高盐饲料或含0.3%Na Cl的常规饲料,喂养1周后,记录各组大鼠的血流动力学变化;ELISA分析24 h尿去甲肾上腺素(NE)水平;real-time RCR和Western blot方法观察室旁核Apelin和APJ的表达变化。另一组实验中,在给予高盐饲料的同时使用Alzet微渗透泵侧脑室灌流ML221或benzamil,观察24 h尿NE水平和心脏指数(HW/BW)变化。此外,在正常SD大鼠侧脑室灌流高钠脑脊液1周后,观察大鼠血压、24 h尿NE和APJ表达水平的变化。结果压力超负荷大鼠给予高盐饮食1周后,平均动脉血压(MAP)、心率(HR)、左室收缩末期压(LVESP)和24 h尿NE水平,以及室旁核的APJ mRNA和蛋白表达均较对照明显增加(P<0.05);而假手术组大鼠在进食高盐饲料后,血流动力学、24 h尿NE水平和APJ表达均未见明显改变。在侧脑室分别灌注APJ受体拮抗剂ML221或ENa C拮抗剂benzamil后,可以明显抑制高盐引发的压力超负荷大鼠24h尿NE水平和HW/BW比值变化(P<0.01)。在正常血压大鼠侧脑室灌注高Na+脑脊液1周后,也可出现脑内APJ表达上调以及MAP、HR和尿NE水平升高(P<0.01)。结论高盐可以增加压力超负荷大鼠模型的交感神经活性,而该效应与脑内的APJ受体表达上调和Na+敏感性增加密切相关。APJ受体可能是脑内盐敏感性形成的重要调控靶点。

孤儿G蛋白耦联受体APJ的天然配体——Apelin

Apelin在体内分布广泛,不同结构形式的Apelin具有不同的生物学效应。对其功能的研究发现Apelin具有调节体液平衡、影响摄食及抗HIV感染和炎症的作用;Apelin在心血管系统具有增强心肌收缩力、舒张血管和降低血压的作用,文中拟对Apelin的生物学特性、心血管效应及其病理生理意义作一综述。

Apelin receptor(APJ)拮抗剂F13A对小鼠抑郁样行为的影响及起效时间

目的:明确apelin receptor(APJ)拮抗剂F13A对小鼠抑郁样行为的影响及起效时间。方法:实验小鼠随机分成对照组(Control),F13A组(F13A)和氯胺酮组(ketamine),每组9只,对照组小鼠腹腔注射生理盐水(10 ml/kg,ip)+侧脑室注射生理盐水(每职1μl,i.c.v),F13A组小鼠腹腔注射生理盐水(10 ml/kg,ip)+侧脑室注射F13A(6μg/μl,i.c.v),氯胺酮组小鼠腹腔注射氯胺酮(10 ml/kg,2 mg/ml,ip)+侧脑室注射生理盐水(1μl,i.c.v);实验分三批进行,第一批实验在注射后30 min,进行第一次强迫游泳测试(FST1),FST1后24 h进行第二次强迫游泳测试(FST2);第二批实验在注射后30 min进行第一次自发活动测试(LMT1),LMT1前24 h进行自发活动习惯化,LMT1后24 h进行第二次自发活动测试(LMT2);第三批实验注射后30 min进行FST1,FST1前24 h进行强迫游泳应激(FSS),FST1后24 h进行第二次强迫游泳测试(FST2)。结果:与对照组比较,在无FSS时,氯胺酮组小鼠不动时间显著性减少(P﹤0.01),而F13A组小鼠无明显变化;在FST2中,F13A组小鼠不动时间显著性增加(P﹤0.01),而氯胺酮组小鼠无显著性差异;在LMT1和LMT2中各组小鼠活动度均无显著性差异;在经历FSS后,在FST1中氯胺酮组、F13A组小鼠不动时间均显著性减少(P﹤0.01);在FST2中,F13A组小鼠的不动时间显著性减少(P﹤0.05),而氯胺酮组小鼠无显著性差异(P>0.05)。结论:APJ受体拮抗剂F13A在强迫游泳测试中发挥快速起效(30 min)且持久作用(24 h)的抗抑郁样潜力,并且这种作用可能与应激有关。

Apelin-APJ系统研究进展

Apelins是由同一基因编码的具有不同分子结构的一组内源性活性肽,该类肽通过作用于7次跨膜的G蛋白偶联受体APJ而参与心血管功能、体液平衡、神经系统功能、胰岛素敏感性、摄食与饮水行为控制等多种生理与病理状态的调节,apelin-APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点。

Apelin/APJ信号在心血管系统的生理和病理生理作用

Apelin是G蛋白耦联受体APJ的内源性配体,在心血管系统高度表达。Apelin/APJ信号具有增强心肌收缩力、降低血压、促进新生血管形成、保护心肌缺血及再灌注损伤、调控脂肪-胰岛素轴等作用。在治疗心力衰竭、高血压、缺血性心血管疾病、心肌缺血-再灌注损伤等方面具有很大潜力。

Apelin/APJ系统在心血管疾病中的研究进展

Apelin是APJ受体的内源性配体,发挥着正性肌力、扩张血管、降低血压、降低胰岛素抵抗等多种心血管调节作用。近年来研究表明,Apelin/APJ系统与高血压、心力衰竭、冠心病、心房颤动、肺动脉高压等心血管疾病有关。本文就Apelin/APJ系统在心血管疾病中的研究进展进行综述。

Apelin-APJ系统与心血管疾病

APJ是一种孤儿G蛋白偶联受体,自从其内源性配基Apelin被发现后,Apelin-APJ系统参与了广泛的生理过程,在心血管系统方面的效应如调节血压、增强心肌收缩力、调节水盐代谢平衡,从而参与心功能衰竭、心肌肥大、冠心病及糖尿病等疾病的发生和发展,Apelin-APJ系统有望成为临床上新的治疗靶点。

体外诱导人脐带华通胶间充质干细胞向内皮细胞分化过程中APJ表达变化

目的研究人脐带华通胶间充质干细胞(human umbilical cord Wharton's Jelly-mesenchymal stem cells,HUW-MSCs)体外诱导向内皮细胞分化过程中表面APJ受体表达的变化,探讨APJ是否可作为鉴定内皮细胞的早期细胞表面标志物。方法剖宫产取脐带后分别用酶消化和组织贴壁法培养获得脐带华通胶间充质干细胞,用酶消化法获得人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。取2×10~7第2代HUW-MSCs用单克隆APJ-APC荧光抗体标志后行流式分选,测定HUW-MSCs实验前细胞表面表达APJ的水平。实验分3组:诱导组MSCs用含血管内皮细胞生长因子5μg/L、碱性成纤维细胞生长因子10μg/L、表皮生长因子10μg/L和10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)M199培养基培养;共同培养组MSCs先与HUVECs在Transwell 6孔培养板中,用含10%FBS的M199培养5-7 d后转入25 cm^2培养瓶中继续培养,培养液为含10%FBS的M199和培养1 d内皮细胞的M199(2:1)混合培养基:单纯培养组细胞培养基为含10%FBS的M199。培养周期为14 d。分别于第7、10、14天流式检测各组细胞APJ表达水平,同时检测内皮细胞表面APJ水平作为阳性对照。另外于第7、14天检测3个实验组、内皮细胞组、HUW-MSCs组内皮细胞早期标志物CD309表达变化情况,比较各实验组之间APJ与CD309变化趋势。结果HUW-MSCs流式分选出5×10~3APJ^+-HUW-MSCs,表面表达APJ基本呈阴性。诱导组、共同培养组和单纯培养组细胞形态均较HUWMSCs有显著改变,诱导组呈圆形、线性、网状,共同培养、单纯培养组细胞呈卵圆形、长梭形。另外,诱导组生长最快,增殖能力最强;单纯培养组次之;共同培养组细胞生长缓慢,增殖能力最弱。第7、10、14天,3组细胞CD309表达分别为诱导组1.8%、2.6%和8.8%,共培养组0.5%、2.5%和4.7%,单纯培养组0.3%、2.1%和2.7%。第7、10、14天各组APJ阳性表达率分别为诱导组0.5%、0.9%和5.2%,共培养组0.4%、0.8%和3.0%,单纯培养组0.2%、0.6%和2.1%。结论HUW-MSCs表面APJ表达基本呈阴性,HUW-MSCs向内皮细胞诱导分化过程中APJ表达逐渐上调,与内皮细胞早期标志物CD309变化趋势基本一致,可作为早期内皮细胞鉴定的标志物。

apelin-APJ系统对心血管活动的调节

APJ受体及其内源性配体apelin自从1993年、1998年相继被发现后,引起了人们的广泛关注。ape-lin-APJ系统在心血管活动调节,在中枢与血管升压素的相互作用及对摄食、摄水、体液平衡的调节、对胰岛素释放及能量代谢的调节,以及HIV感染、心血管系统发育、血管新生等方面都有作用。本文主要对该系统在中枢及外周对心血管活动的调节做一综述。

Apelin/APJ系统与心血管系统相关性研究进展

Apelin作为一种新近发现的心血管调节物质,是血管紧张素II1型受体相关蛋白的内源性配体。Apelin/APJ系统在心血管系统中分布广泛,具有扩张血管、降血压,增强心肌收缩力,抑制心肌细胞肥大、纤维化、自噬,促进血管生成等保护作用,参与心力衰竭、冠心病,高血压,心房纤颤等多种疾病的病理生理过程,因此Apelin/APJ系统与心血管系统相关性日益受到人们的重视。

Apelin/APJ系统:动脉粥样硬化治疗新靶点

动脉粥样硬化性(As)疾病已成为人类死亡的首要病因。Apelin/APJ受体广泛存在于心血管系统,参与多种心血管疾病的发生发展。Apelin/APJ系统对动脉粥样硬化作用的研究提示,Apelin对动脉粥样硬化的发生发展具有双重作用。一方面,Apelin可促进血管平滑肌细胞、内皮细胞增殖和迁移,诱导单核细胞向内皮细胞黏附,还可促进血管新生,影响As斑块的稳定性。另一方面,Apelin可拮抗AngⅡ的作用,调控细胞内脂代谢,减少内皮细胞活性氧的产生和细胞衰老,防止巨噬细胞转化为泡沫细胞,对已形成As斑块具有一定的稳定作用,还可以抑制血小板活化,减少动脉粥样硬化并发症的发生。同时,作为保护或损伤机体的双刃剑,自噬可能是Apelin作用于动脉粥样硬化的重要靶点之一。本文从以上几个方面对Apelin/APJ系统与动脉粥样硬化的研究进行总结分析,探讨Apelin/APJ受体成为预防或治疗动脉粥样硬化靶点的可能性。

代谢综合征大鼠主动脉Apelin及其受体的表达及意义

目的观察代谢综合征(MS)大鼠主动脉Apelin及其受体(APJ)的表达变化。方法16只雄性SD大鼠按随机数字表法均分为对照组和MS组,每组8只。MS组采用高果糖饲料(60%)喂养,对照组采用常规饲料喂养,喂养周期为10周。采用Masson染色法检测血管胶原沉积情况,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和主动脉组织Apelin含量,免疫组化法检测大鼠主动脉组织APJ的表达。结果高果糖饮食可成功诱导高血压、高三酰甘油(TG)血症和高血糖等特征的代谢综合征模型,MS组大鼠主动脉胶原沉积明显,血清Apelin浓度和主动脉组织Apelin/APJ表达较对照组明显下调(P<0.05)。结论MS大鼠主动脉发生重构,Apelin/APJ表达下调。提示Apelin可能为新的血管保护因子。

Apelin的研究进展

G蛋白偶联受体(GPCRs)是膜受体最大的一个家族,参与了广泛的生理和病理过程。孤儿GPCRs(oGPCRs)是一类内源性配基未定、功能未知的GPCRs。APJ受体(APJr)是一个古老的oGPCR,它与血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)有同源性,但是它不与血管紧张素Ⅱ(angⅡ)结合。其配基Apelin于1998年发现,被认为在体内具有重要的生理功能。ApelinAPJr有望成为临床上新的治疗靶点。

Apelin在能量平衡中的作用

新发现的生物活性肽apelin是APJ受体的天然配体,广泛分布于中枢系统和外周组织。研究表明apelin具有广泛的生理作用。该文总结了近几年来关于apelin在摄食、消化、体液平衡、肥胖和糖代谢等方面所取得的最新进展,并结合本实验室的工作,提出了今后的发展趋势。

黄芩汤基于调控Apelin-13、Ghrelin、Obestatin的表达及肠道菌群构成改善冠心病机制研究

目的:探讨黄芩汤基于肠道菌群改善冠心病(CHD)患者以及对G蛋白偶联受体APJ的内源性配体(Apelin-13)、胃饥饿素(Ghrelin)、肥胖抑制素(Obestatin)的表达的影响。方法:选取150例CHD患者临床资料进行前瞻性研究,根据患者入院的先后顺序,采用随机数字表达法将所有CHD患者分为治疗组与对照组,每组各75例。对照组采用基础西药治疗,治疗组在基础西药治疗基础上加黄芩汤治疗。比较两组患者的疗效、Apelin-13、Ghrelin、Obestatin表达水平及肠道菌群构成情况。结果:治疗组总有效率明显高于对照组(86.67%>72.00%),差异有统计学意义(P<0.05),结果提示,黄芩汤可以明显的改善CHD患者的临床症状。进一步对两组患者的Apelin-13、Ghrelin,Obestatin表达情况进行测定结果发现,黄芩汤对CHD患者Apelin-13、Obestatin的下调和Ghrelin的上升均起到了加速的作用;肠道菌群构成的结果提示,黄芩汤改变CHD患者的厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)两种细菌的构成。结论:黄芩汤通过调控Apelin-13、Ghrelin、Obestatin体内表达和调控肠道菌群构成的两个角度改善CHD。