微小RNA-124调控APLN表达在癫痫神经元损伤中的作用及机制研究

目的研究微小RNA-124(microRNA-124,miR-124)对癫痫神经元Apelin(APLN)表达的调控作用及其对神经元损伤的影响。方法采用低镁细胞外液培养建立癫痫神经元模型。双荧光素酶报告基因系统验证miR-124与APLN的靶标关系,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miR-124与APLN mRNA的表达,western blotting检测APLN、Bax、Bcl-2与caspase 3蛋白的表达,流式细胞仪检测神经元凋亡情况。结果miR-124 mimics+APLN基因野生型组荧光素酶活性明显低于对照组,但尚未达到统计学差异。qRT-PCR与western blotting检测均提示上调miR-124表达可促进APLN表达,下调miR-124可抑制APLN mRNA表达。流式细胞仪检测发现,上调miR-124表达可促进癫痫神经元凋亡,其机制为上调促凋亡蛋白Bax、caspase 3表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达。结论本研究结果提示miR-124与APLN基因可能存在靶标关系,可能正调控APLN表达;除APLN基因外,miR-124可能通过调控其他基因表达,最终表现为促进癫痫海马神经元凋亡。