大骨节病患者血清NO、NOS、sFas/APO-1检测分析

目的探讨一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、可溶性Fas(sFas)诱导大骨节病发生发展的作用与特点,为大骨节病防治研究提供新的思路。方法选择陕西省永寿县、榆林市榆阳区大骨节病区与咸阳市渭城区非大骨节病区120例调查对象,分为成人、儿童大骨节病组;成人、儿童病区对照组;成人、儿童非病区对照组,每组20例,平均年龄、性别无差别。用酶还原法检测了血清NO,化学比色法检测了血清NOS、iNOS,ELISA法检测了血清sFas水平。结果①大骨节病成人组血清NO、iNOS显著高于病区和非病区成人对照组(P< 0.05);血清NOS、sFas/APO鄄1水平高于非病区成人对照组(P< 0.005)。②大骨节病儿童组血清NO高于非病区儿童对照组(P< 0.05);血清NOS、iNOS均高于病区和非病区儿童对照组(P< 0.005)。结论儿童大骨节病发生发展中NO诱导途径起一定的作用,而Fas途径作用不明显。当疾病发展到成人大骨节病时,二者均起一定作用。

血清可溶性Apo-1/Fas水平对监测胃癌生物学行为和预后的临床价值

背景与目的:国内外研究检测发现一些恶性肿瘤血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平明显高于正常人,但有关化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究不多;本课题通过检测胃癌患者血清sApo-1/Fas水平及化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究,探讨其临床价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例胃癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并与30例正常人作对比分析。结果:胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与临床分期、细胞分化程度有关,与患者性别、年龄无关。Ⅳ期胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期(P<0.05～0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。中、高分化胃癌患者血清sApo-1/Fas水平低于低分化胃癌患者(P<0.05～0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前(P<0.01)。结论:血清sApo-1/Fas与胃癌的发生、发展相关,可作为胃癌生物学行为和预后的标记物。sApo-1/Fas有可能成为胃癌治疗的新靶点。

化疗对肝癌患者血清可溶性Apo-1/Fas水平的影响及其临床意义

目的:评价肝癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平变化的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及58例肝癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并作对比分析。结果:肝癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),Ⅲ期肝癌血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅱ期(P<0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前者(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与肝癌患者性别、年龄均无相关。结论:血清sApo-1/Fas可能参与调控肝癌的发生、发展过程,可作为化疗疗效和判断预后观察指标。

恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性Apo-1/Fas的检测及其临床意义

目的 :研究恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平变化及其临床意义。方法 :用 EL ISA法检测 15 7例恶性肿瘤患者和 2 5例正常对照组血浆以及 12 9例不同性质胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas浓度变化。结果 :恶性血液病中急性白血病、慢性白血病和多发性骨髓瘤 (MM)患者血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平均显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;慢性粒细胞白血病高于急性粒细胞白血病 ,慢性淋巴细胞白血病高于急性淋巴细胞白血病 (P<0 .0 5 ) ;急性白血病和 MM化疗完全缓解时 Apo- 1/ Fas水平显著下降 (P<0 .0 5 ) ,无效和复发病例均为高值。在实体恶性肿瘤中血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平也均显著高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且转移性癌显著高于非转移癌 (P<0 .0 1) ,术后好转或放疗后缓解患者较术前或放疗前明显回落 (P<0 .0 1) ,而术后复发转移患者显著升高 (P<0 .0 1)。恶性肿瘤患者胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显增高 ,并明显高于结核性和漏出性胸腹水 (P<0 .0 1)。结论 :恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显升高 ,并可能与肿瘤的发生、发展有关 ,观察其水平变化 ,有助于了解肿瘤的病理过程 ,鉴别胸腹水的不同性质。

抗APO-1单抗诱导人膀胱癌多药耐药细胞凋亡的研究

目的：探讨人膀胱癌多药耐药细胞凋亡诱导途径。方法：应用免疫细胞化学、原位ＤＮＡ末端转移酶标记法、相差显微镜及电镜技术，观察ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞表面Ｆａｓ抗原的表达和抗ＡＰＯ－１单抗对该细胞存活的影响及其特征。结果： Ｆａｓ抗原在ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ中有高表达，经抗ＡＰＯ－１单抗作用后，ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞存活率明显降低，光镜及电镜下观察到凋亡细胞的形态学改变，原位ＤＮＡ末端转移酶标记阳性。结论：抗ＡＰＯ－１单抗能与肿瘤细胞表面的Ｆａｓ抗原结合，触发人膀胱癌多药耐药细胞凋亡。

冬凌草乙素诱导GBC-SD细胞的凋亡及对Bcl-2、p53、Fas/APO-1、C-myc表达的影响

目的 探讨冬凌草乙素对人胆囊癌GBC SD细胞增殖抑制和诱导调亡的机制。方法 不同浓度的冬凌草乙素处理GBC SD细胞后 ,用MTT法检测GBC SD细胞的存活率 ,通过倒置显微镜、扫描电子显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计观察和分析凋亡细胞 ,用免疫组织化学法和流式细胞仪检测细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达。结果 冬凌草乙素浓度依赖性地抑制GBC SD细胞增殖及诱导其凋亡 ;药物作用 2 4h后 ,细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达有不同程度的下调 ;Caspase 3活性与凋亡程度相关。结论 冬凌草乙素抑制GBC SD细胞的增殖和诱导其凋亡与Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C

慢性心力衰竭患者外周血中可溶性Fas/Apo-1、肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ水平的变化及美托洛尔对其影响

目的 :观察慢性心力衰竭 (心衰 )患者外周血中可溶性Fas/Apo 1、肿瘤坏死因子α (TNF α)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的变化及美托洛尔对其影响。 方法 :60例慢性心衰患者随机分为两组 ,常规治疗组 (n =3 0例 ) ,美托洛尔治疗组 (n =3 0例 )。分别采用酶联免疫吸附法及放射免疫法测定心衰患者治疗前后和 3 0例健康体检者 (正常对照组 )外周血中可溶性Fas/Apo 1及TNF α、AngⅡ水平。同时使用彩色超声心动图测定心衰患者左心室舒张末期内径和左心室射血分数。 结果 :心衰患者外周血中可溶性Fas/Apo 1、TNF α及AngⅡ水平较正常对照组显著升高 ,其中可溶性Fas/Apo 1水平与左心室射血分数、TNF α及AngⅡ无关 ,但与左心室舒张末期内径相关。治疗后美托洛尔组外周血中AngⅡ、TNF α及可溶性Fas/Apo 1水平较常规治疗组下降更明显。 结论 :可溶性Fas/Apo 1在慢性心衰的病理生理机制中起着重要作用 ,对心衰患者的左心室具有独立于TNF α及AngⅡ之外的影响。β受体阻滞剂用于治疗心衰除了可纠正内分泌紊乱外 。

食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的 探讨食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo 1/Fas(sApo 1/Fas)水平及其临床意义。 方法 应用酶联免疫吸附试验法 (ELISA)检测 4 9例食管癌患者化疗前后血清sApo 1/Fas水平 ,并同时检测 30例正常人血清sApo 1/Fas水平作对比分析。结果 食管癌患者血清sApo 1/Fas水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,血清sApo 1/Fas水平与临床分期有关、与食管癌患者性别、年龄、细胞分化程度无相关 ,Ⅳ期食管癌血清sApo 1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,Ⅲ期明显高于Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,化疗后有效 (完全缓解和部分缓解 )患者血清sApo 1/Fas水平明显低于化疗前 (P <0 .0 1)。 结论 血清sApo 1/Fas与食管癌的发生及发展有一定关系 ,检测血清sApo 1/Fas有可能成为食管癌辅助诊断、病情发展及化疗疗效观察的一项有价值的指标。

Caspase家族与Fas/APO-1介导凋亡的信号传导

Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导的细胞凋亡在多细胞生物免疫自稳、免疫耐受、免疫调控、免疫赦免（Ｐｒｉｖｉｌｅｇｅ）、免疫防御过程中具有极其重要的作用。对Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导凋亡的信号传导研究表明：一个命名为Ｃａｓｐａｓｅ的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（亦称ＩＬ－１β转化酶相关蛋白酶）家族成员是Ｆａｓ／ＡＰＯ－１介导凋亡信号传导途径的关键效应分子。本文对Ｃａｓｐａｓｅ家族成员与Ｆａｓ死亡受体介导凋亡信号传导的关系加以概述。

顺铂诱导颊癌细胞凋亡及凋亡分子(Apo-1)表达的实验研究

目的:研究细胞毒类化疗药——顺铂诱导人颊癌细胞凋亡发生的规律以及凋亡分子Apo-1的表达。探讨口腔癌化疗的细胞凋亡机制。方法:以建株人颊癌细胞系BcaCD885为对象,采用光镜、电镜以及流式细胞术等手段观察顺铂诱导颊癌细胞凋亡的形态特征及规律,同时检测顺铂对颊癌细胞Apo-1表达的影响。结果:顺铂作用后的颊癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学特征;顺铂诱导颊癌细胞凋亡呈现时间及剂量依赖性效应关系;顺铂能上调颊癌细胞Apo-1的表达。结论:细胞凋亡可能是顺铂杀灭颊癌细胞的重要机制。

老年重症肌无力患者Treg、APO-1、RyR-Ab、干扰素-αAb、AchR-Ab的水平变化及意义

目的探讨老年重症肌无力(MG)患者外周血Treg、APO-1、RyR-Ab、干扰素(IFN)-αAb、AchR-Ab的表达及意义。方法采用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)测定MG患者和健康者Treg、APO-1、RyR-Ab、IFN-αAb、AchR-Ab的表达情况。结果老年组外周血Treg明显低于非老年组(P<0.05)。老年组外周血APO-1、RyR-Ab、IFN-αAb明显高于非老年组和健康对照组(P<0.05)。老年组外周血AchR-Ab明显高于健康对照组(P<0.05),与非老年组无统计学差异(P>0.05)。MG患者RyR-Ab、IFN-αAb与年龄呈正相关,RyR-Ab与Oosterhuis评分呈正相关。结论老年MG患者与非老年患者免疫机制存在差异,检测老年MG患者免疫指标对临床判断病情有指导意义。

独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1的影响

目的:观察独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1(细胞凋亡抑制因子)的影响,探讨其治疗腰椎间盘突出症的机制。方法:将80例腰椎间盘突出症(肝肾亏虚型)患者随机分为治疗组和对照组各40例。对照组予以卧床休息、腰椎牵引、腰背肌功能锻炼、推拿、中药熏洗治疗。治疗组在对照组的基础上予独活寄生汤口服。治疗2周后观察两组患者Fas/APO-1变化,并评价疗效。结果:治疗2周后,治疗组Fas/APO-1值明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症有较好疗效,可能机制为降低Fas/Apo-l的升高。

bcl-2和Fas/Apo-1基因在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达

目的:观察凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因Fas/Apo-1在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达情况。方法:制备家兔心肌缺血-再灌注损伤(RI)、缺血预适应(IP)、持续缺血(CI)和control模型。实验方法:①采用免疫组织化学方法观察bcl-2基因表达。②采用逆转录扩增(PCR)方法观察Fas/Apo-1表达情况。结果:①免疫组化检测bcl-2基因蛋白标记阳性者,在病变边缘区,IP组为(46.5±11.0)%,CI组为(42.9±9.9)%,两者之间无明显差别(P>0.05),但均明显高于RI组(19.4±5.6)%和对照组(1.92±0.88)%(P<0.01);在病变中心区,IP组为(52.5±8.8)%,均明显高于RI组(32.2±10.2)%和CI组(28.0±10.2)%(P<0.01);而RI组与CI组之间比较则无显著性差异(P>0.05);在正常对照组分别仅为(1.92±0.88)%和(1.92±1.02)%,说明正常心肌中bcl-2无表达或弱表达。从自身不同部位对照来看,RI组在病变中心区bcl-2基因蛋白的表达明显强于边缘区(P<0.01);而IP组2个部位比较无明显差别(P>0.05);CI组则表现出病变边缘区bcl-2基因蛋白的表达增强(P<0.01)。②在RT-PCR方法观察Fas蛋白的表达中,可见凝胶电泳在control和IP组的心肌细胞中Fas基因蛋白的表达水平极低,在RI组和CI组的心肌细胞中则见Fas基因蛋白的表达明显增高(P<0.01);而对照β-actin基因的mRNA表达水平在各组基本一致,无显著性差异(P>0.05)。结论:缺血可诱发凋亡促进基因Fas/Apo-1基因蛋白的表达增强,而再灌注则加重这一过程。

康莱特注射液对肾癌细胞Fas/Apo-1、FasL和PCNA表达的研究

目的探讨康莱特注射液（KLT）对肾癌细胞（GRC－1）Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。材料和方法利用免疫细胞化学法分析KLT对肾癌细胞Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。结果免疫细胞化学证明康莱特注射液组GRC－1细胞Fas／Apo－1基因表达标记指数（LI）为74．6％，而空白乳组为21．2％。空白乳组和0．2mg／ml康莱特组GRC－1细胞无FasL基因表达改变，康莱特组GRC－1细胞PCNA表达的LI为15．2％，空白乳组GRC－1细胞几乎无PCNA表达。结论康莱特注射液的抗肾癌细胞作用可能是通过上调Fas／Apo－1和PCNA基因表达，对FasL基因表达没有明显的影响。

非霍奇金淋巴瘤血清可溶性Apo-1/Fas的表达及意义

应用ELISA法检测36例非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者和22例正常对照组血清sApo-1/Fas水平。发现NHL患者sApo-1/Fas水平高于正常对照组(P<0.05),临床分期高级别患者sApo-1/Fas水平高于低级别(P<0.05)。化疗有效者血清sApo-1/Fas低于化疗前(P<0.05),化疗无效者血清sApo-1/Fas与化疗前无明显差异(P>0.05)。认为血清sApo-1/Fas水平与NHL的发生、发展有关,检测sApo-1/Fas水平对NHL发生发展、疗效观察以及预后判断具有一定的临床意义。

bcl-2和Fas/APO-1在宫颈癌的表达及其意义

目的 :探讨bcl 2和Fas/APO 1基因在宫颈癌患者血浆中的表达水平及与宫颈癌发生发展的关系。方法 :用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 2 1例宫颈癌患者血浆中bcl 2和Fas/APO 1基因的表达水平 ,与 18例宫颈正常妇女的表达水平比较。结果 :bcl 2在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (2 2 3.5 6 3± 1.6 19)U/ml(x- ±s) ,显著高于 18例宫颈正常者的 (6 6 .4 2 0± 1.4 0 1)U/ml(x- ±s) ,两者比较经t检验P <0 .0 5 ,差异有显著性 ;Fas/APO 1在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (5 2 0 .116± 1.15 8)ng /L(x- ±s) ,明显低于 18例宫颈正常者 (6 38 2 6 3± 1 2 4 1)ng/L(x- ±s) ,两者比较P <0 .0 5 ,差异有显著性。结论 :在宫颈癌中bcl 2高表达 ,而Fas/APO 1低表达 ,bcl 2和Fas/APO

血清IL-8和sApo-1/Fas与乳腺癌患者临床病理学参数的关系

目的:探讨外周血IL-8和sFas在不同绝经状态、不同雌激素受体状态(ER)、不同转移情况的乳腺癌术后复发及转移患者中的表达及其临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法检测94例乳腺癌术后复发及转移患者和30例正常人的血清IL-8和sFas水平,并比较它们与绝经状态、ER状态、不同转移情况的关系以及化疗对其影响。结果:1)乳腺癌患者血清IL-8及sFas水平明显高于正常人(P<0.05)。2)血清IL-8与雌激素受体(ER)状态和骨转移关系密切:ER(-)者高于ER(+)者(P<0.05);有骨转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及肝、肺转移者(P<0.05)。3)血清sFas水平与绝经状态及肝、肺转移关系密切:绝经后患者高于绝经前患者(P<0.05);有肝、肺转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及骨转移者(P<0.05)。4)化疗后血清sFas水平较化疗前下降(P<0.05),而血清IL-8无明显变化。结论:血清IL-8和sFas水平与乳腺癌患者的生物学行为及预后有一定关系,值得进一步研究。

Fas/APO-1基因真核表达质粒的构建

目的 :构建凋亡信号受体Fas/APO - 1基因真核表达质粒 ,为进一步研究Fas/APO - 1在肿瘤细胞凋亡中的作用提供物质基础。方法 :将质粒pBluscript-FascDNA酶切后 ,回收DNA片段并提纯 ;用连接酶连接到真核表达载体pBK CMV内 ,克隆出重组基因载体pBK FascDNA。结果 :原始质粒pBluscript-FascDNA及重组质粒pBK -FascDNA酶切后 ,凝胶电泳鉴定均含有大小正确的Fas/APO - 1碱基片段。结论 :本实验成功地构建了Fas/APO - 1基因的真核表达质粒。

血浆sFas/Apo-1和Bcl-2在卵巢癌的表达水平及意义

目的 :研究凋亡相关基因sFas/Apo - 1和Bcl- 2血浆中的表达水平 ,探讨二者在卵巢癌发生发展中的作用及临床应用价值。方法 :采用ELISA法对 2 0例上皮性卵巢癌、19例卵巢良性肿瘤、18例正常人群血浆中sFas/Apo - 1和Bcl- 2水平进行检测。结果 :卵巢癌患者血浆sFas/Apo - 1是 (10 2 5 6 5 2± 1 5 73)ng/L ,明显高于卵巢良性肿瘤组 (6 86 12 0± 1 36 1)ng/L ,和正常人群组 (6 38 2 6 4± 1 2 4 1)ng/L ,差异有极显著意义 (P <0 0 1)。而卵巢良性肿瘤组与正常人群组间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。卵巢癌患者血浆Bcl- 2是 (179 14 3±2 6 84 )U/ml,也明显高于卵巢良性肿瘤组 (82 4 71± 1 94 3)U/ml,和正常人群组 (6 6 4 2 0± 1 4 0 1U/ml) ,差异有极显著意义 (P <0 0 1)。卵巢囊肿组与正常人群组间差异也无显著意义 (P >0 0 5 )。血浆sFas/Apo - 1水平诊断卵巢癌的敏感性为 35 % ,特异性为 88 89%。血浆Bcl - 2水平诊断卵巢癌的敏感性为 5 5 % ,特异性为84 6 1%。结论 :Fas/Apo - 1和Bcl- 2基因通过细胞凋亡的调控共同参与了卵巢癌的发生发展 ,对二者的血清学检测有助于卵巢癌的诊治。

凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌中的表达及与生物学特性的关系

目的 研究肿瘤凋亡调控基因Fas/APO 1、bcl 2在胆囊癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化法对 2 8例胆囊癌及其癌旁组织、2 0例胆囊息肉和腺瘤组织检测基因Fas/APO 1、bc1 2的表达 ,并分析它们与胆囊癌生物学特性的关系。结果 胆囊癌组织中bc1 2表达率与癌旁组织、息肉和腺瘤组织相比显著增高 ,而Fas/APO 1表达明显降低 (均P <0 .0 5 ) ;与肿瘤生物学特性的关系 ,bc1 2蛋白表达率在高、中分化组中明显低于低、未分化组 ,NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期低于Ⅳ、Ⅴ期 ,而Fas/APO 1蛋白表达则相反 (均P <0 .0 5 )。结论 bc1 2为胆囊癌细胞凋亡抑制基因 ,而Fas/APO 1则为促进基因 。