期刊文献+
共找到13篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人可溶性APO2L/TRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
1
作者 郑晓勇 官孝群 +1 位作者 林芷英 宋后燕 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第4期277-279,共3页
目的 利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法 用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子 1 1 4~ 2 81 )并克隆至表达载体 ,重组体转化大肠杆菌JF1 1 2 5摇瓶发酵 ,筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经... 目的 利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法 用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子 1 1 4~ 2 81 )并克隆至表达载体 ,重组体转化大肠杆菌JF1 1 2 5摇瓶发酵 ,筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经盐酸胍溶解 ,空气氧化法稀释复性 ,超滤 ,Q SepharoseFF阴离子交换柱层析等方法纯化人可溶性APO2L。利用流式细胞术检测产物对细胞的诱导凋亡活性。结果 表达产物约占菌体总蛋白质的 2 0 %并在菌体内形成了包涵体 ,SDS PAGE鉴定表达产物相对分子质量约 2 1 0 0 0。经上述纯化蛋白质纯度达 90 %以上 ,蛋白质可溶性好。观察到人可溶性APO2L诱导人宫颈癌HeLa细胞发生明显的凋亡。 展开更多
关键词 apo2K/trail 克隆 大肠杆菌 细胞凋亡 宫颈癌
下载PDF
TRAIL/APO-2L与神经胶质瘤细胞凋亡
2
作者 赵忠伟 张云汉 《河南大学学报(医学科学版)》 CAS 2004年第4期11-14,共4页
关键词 trail/apo-2l 细胞凋亡 神经胶质瘤
下载PDF
Reciprocal expression of TRAIL and CD95L in Th1 and Th2 cells: role of apoptosis in T helper subset differentiation
3
作者 XIAORENZHANG SATISHDEVADAS 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第3期282-282,共1页
Upon activation, naive T-helper cells can differentiate into two major distinct subsets, T helper 1 (Th1) and T helper 2 (Th2), as defined by their effector functions and cytokine secretion patterns. Cytokine milieu a... Upon activation, naive T-helper cells can differentiate into two major distinct subsets, T helper 1 (Th1) and T helper 2 (Th2), as defined by their effector functions and cytokine secretion patterns. Cytokine milieu and costimulatory molecules have been shown to play an essential role in determining T helper differentiation. However, it is still unclear how the effects of signals of co-stimulatory molecules and cytokines are exerted during T helper differentiation. We show evidence suggesting that while cytokine signals initiate differentiation program, the selective action of death effectors determines the endpoint balance of differenti- 展开更多
关键词 TH1细胞 TH2细胞 细胞凋亡 trail CD95l 交互表达 细胞凋亡 亚型分化
下载PDF
TRAIL蛋白的体外活性稳定性初步研究
4
作者 张红 魏东芝 +6 位作者 周文瑜 陶欣艺 沈亚领 周劲松 张国钧 孙菁 球谊 《工业微生物》 CAS CSCD 2011年第1期9-14,共6页
大肠杆菌发酵表达的TRAIL蛋白经过两步纯化可得到纯度95%以上的活性蛋白,得率为40%。天然TRAIL蛋白为同源三聚体形式,在三聚体中心隐蔽结合Zn^(2+),Zn^(2+)可维持TRAIL蛋白天然结构的稳定性。研究发现在纯化后的重组可溶性TRAIL蛋白中添... 大肠杆菌发酵表达的TRAIL蛋白经过两步纯化可得到纯度95%以上的活性蛋白,得率为40%。天然TRAIL蛋白为同源三聚体形式,在三聚体中心隐蔽结合Zn^(2+),Zn^(2+)可维持TRAIL蛋白天然结构的稳定性。研究发现在纯化后的重组可溶性TRAIL蛋白中添加Zn^(2+),并且Zn^(2+)与TRAIL单体的摩尔比例达到2:1时,TRAIL蛋白的活性达到最高。本文初步研究了TRAIL蛋白的体外活性稳定性问题,发现在添加了最适Zn^(2+)后的TRAIL蛋白保存溶液中添加25mmol/L LArg与50mmol/L L-Glu有助于抑制TRAIL蛋白活性下降、并可能长期稳定蛋白活性。 展开更多
关键词 trail 纯化 ZN^2%PlUS% l-ARG l—Glu 蛋白稳定性
下载PDF
TRAIL包涵体在细胞内重折叠现象的初步研究
5
作者 汤亚南 潘若鋆 +5 位作者 周劲松 张国钧 孙菁 球谊 魏东芝 沈亚领 《工业微生物》 CAS CSCD 2009年第4期32-37,共6页
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Apo2L/TRAIL)是一种新型的抗肿瘤蛋白。但在大肠杆菌表达系统中,表达的TRAIL蛋白往往容易聚集形成包涵体。本文对重组TRAIL包涵体在胞内重折叠转化成可溶性TRAIL蛋白作了初步探索,结果表明:当蛋白表达后,... 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Apo2L/TRAIL)是一种新型的抗肿瘤蛋白。但在大肠杆菌表达系统中,表达的TRAIL蛋白往往容易聚集形成包涵体。本文对重组TRAIL包涵体在胞内重折叠转化成可溶性TRAIL蛋白作了初步探索,结果表明:当蛋白表达后,迅速降低温度至30℃并添加50μg/mL氯霉素继续培养4 h,可溶性TRAIL产量可提高至16.7%。这一结果在3.7L罐上也得到了证实,可溶性TRAIL表达量达到14.5%。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 重折叠 包涵体 重组大肠杆菌
下载PDF
重组人凋亡素2配体治疗晚期恶性肿瘤Ⅰ期临床耐受性研究 被引量:3
6
作者 周生余 陈闪闪 +5 位作者 刘鹏 罗扬 邢镨元 何静 石远凯 冯奉仪 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期71-75,共5页
目的:观察晚期恶性肿瘤患者对重组人凋亡素2配体(rh—Apo2L,又称肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)静脉滴注后的安全性。方法:rh—Apo2L皮试阴性的志愿者,接受该药静脉滴注2h,qd,连用14d,观察14d;按“3+3”原则进行剂量爬坡,每... 目的:观察晚期恶性肿瘤患者对重组人凋亡素2配体(rh—Apo2L,又称肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)静脉滴注后的安全性。方法:rh—Apo2L皮试阴性的志愿者,接受该药静脉滴注2h,qd,连用14d,观察14d;按“3+3”原则进行剂量爬坡,每组3~6例。结果:入组22例,2例皮试阳性退出研究。rh—Apo2L由10递增至300μg·kg^-1·d^-1共6个剂量组。除Ⅲ度全身炎性反应综合征,其余均为Ⅰ~Ⅱ度不良反应,包括发热、疲劳、乏力、皮肤黏膜改变、消化道反应、心血管系统毒性、骨髓抑制和肝肾功能损伤;所有毒性均可在停药2周内恢复;最大耐受剂量为200μg·kg^-1·d^-1.结论:恶性肿瘤患者采用rh—Apo2L静脉滴注后的安全性良好,推荐进行Ⅱ期临床研究。 展开更多
关键词 重组人凋亡素2配体 Ⅰ期临床研究 耐受性 晚期恶性肿瘤
下载PDF
顺铂在TRAIL/APO-2L致胶质瘤细胞凋亡作用中影响机制的研究 被引量:4
7
作者 李卫国 李新钢 +2 位作者 石梅 王东海 鲍修风 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第5期274-278,共5页
目的探讨TRAIL对胶质瘤细胞凋亡的影响,并进一步研究DNA破坏药物顺铂(CDDP)在与其联合作用诱导细胞凋亡中影响作用的机制。方法行人脑胶质瘤U251细胞株的培养,应用不同浓度TRAIL和CDDP作用于胶质瘤U251细胞,MTT法检测TRAIL和CDDP分别及... 目的探讨TRAIL对胶质瘤细胞凋亡的影响,并进一步研究DNA破坏药物顺铂(CDDP)在与其联合作用诱导细胞凋亡中影响作用的机制。方法行人脑胶质瘤U251细胞株的培养,应用不同浓度TRAIL和CDDP作用于胶质瘤U251细胞,MTT法检测TRAIL和CDDP分别及联合作用于U251细胞后的存活率,并以亚毒剂量的TRAIL和CDDP联合作用后,流式细胞仪检测其凋亡率。Westernblot方法检测CDDP作用前后TRAIL受体DR5表达量的变化。结果MTT结果:在一定时间范围内,随着药物浓度增加,TRAIL和CDDP分别及联合作用皆使胶质瘤U251细胞存活率逐渐降低,其中两者的联合作用效果明显,与分别作用组差异有统计学意义(P<0.01)。亚毒剂量的TRAIL(50ng·ml-1)、CDDP(4μg·ml-1)分别及联合作用人脑胶质瘤U251细胞24h后,存活率分别为:72.43%,75.56%,23.45%。亚毒剂量的TRAIL(50ng·ml-1)、CDDP(4μg·ml-1)单独或联合作用组致胶质瘤细胞凋亡率分别为25.61%、20.59%、62.33%。单独应用组与联合组之间差异有统计学意义(P<0.01)。Westernblot法检测显示:CDDP作用后较作用前DR5表达有明显增高,随CDDP剂量增多,DR5表达量逐渐增加。结论TRAIL和CDDP联合作用能显著增强其对人U251胶质瘤细胞凋亡的诱导,其机制可能与CDDP能上调TRAIL死亡受体DR5的表达有关。 展开更多
关键词 trail/apo-2l 胶质瘤细胞 影响机制 凋亡作用 Western CDDP U251细胞株 流式细胞仪检测 trail受体 瘤细胞凋亡 人脑胶质瘤 顺铂 诱导细胞凋亡 细胞存活率 细胞凋亡率 BlOT法 DR5 影响作用 不同浓度 时间范围 药物浓度
原文传递
肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体与放、化疗联合应用诱导喉癌Hep-2细胞凋亡途径研究 被引量:1
8
作者 张明 周梁 田洁 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期127-131,共5页
目的探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的敏感性及其与放、化疗联用时的凋亡途径。方法采用CCK-8法检测TRAIL、顺铂、紫杉醇作用下Hep-2细胞生长抑制率;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡率;Westernblot法检测He... 目的探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的敏感性及其与放、化疗联用时的凋亡途径。方法采用CCK-8法检测TRAIL、顺铂、紫杉醇作用下Hep-2细胞生长抑制率;流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡率;Westernblot法检测Hep-2细胞内caspase蛋白表达变化。结果Hep-2细胞对TRAIL诱导的凋亡不敏感,24hIC50为596.92μg/L;顺铂、紫杉醇、放射线与TRAIL联合应用时Hep-2细胞凋亡率显著高于单药应用(P<0.05);caspase-9抑制剂Z-LETD-FMK使TRAIL、顺铂、紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制率显著下降(P<0.05);联合用药组caspase-8、caspase-9表达量均有显著升高(P<0.05)。结论人喉癌Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感,TRAIL通过内源性途径诱导Hep-2细胞凋亡;活化后的caspase-9、caspase-3通过环状反馈作用激活caspase-8,增强了Hep-2细胞对TRAIL的敏感性,是联合用药对Hep-2细胞发挥协同效应的机制之一。 展开更多
关键词 喉肿瘤 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 细胞凋亡 CASPASE-9 CASPASE-8
下载PDF
选择性杀癌细胞物:TRAIL/Apo-2L
9
作者 郑晓勇 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 1999年第1期43-45,共3页
研究发现了一种能选择性诱导癌细胞发生自杀的蛋白-TRAIL,肿瘤细胞对它比正常细胞敏感得多,且其作用独立于P53。关于其选择性杀伤作用机制的研究,近期取得了突破性进展。现将其蛋白、基因及其受体的结构、分布及作用机制进行综述。
关键词 trail apo2l 细胞凋亡 受体 基因治疗 肿瘤杀伤
原文传递
TRAIL/APO-2L及其受体系统在脑肿瘤中的研究进展
10
作者 吴惺 袁先厚 袁忠惠 《国外医学(神经病学.神经外科学分册)》 2001年第4期281-285,共5页
TRAIL/APO - 2L及其受体是TNF家族中的新成员。该系统以其独特的凋亡诱导方式参与抗病毒免疫 ,免疫赦免以及肿瘤细胞的免疫逃逸等生理作用。TRAIL能诱导多种脑肿瘤细胞系发生凋亡而对神经细胞没有毒性 。
关键词 trail/apo-2l 受体 凋亡 脑肿瘤
原文传递
Apo2L和足叶乙甙、阿糖胞苷体外协同抑制白血病细胞增殖 被引量:1
11
作者 王玲玲 张茂宏 徐从高 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期593-595,共3页
目的 研究化疗药足叶乙甙 (Vp16 )或阿糖胞苷 (Ara C)上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强凋亡素 2配体 (Apo2L)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 通过AnnexinⅤ /PI染色 ,流式细胞仪检测HL 6 0细胞的凋亡率 ;通过MTT试验检测Apo2L对白... 目的 研究化疗药足叶乙甙 (Vp16 )或阿糖胞苷 (Ara C)上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强凋亡素 2配体 (Apo2L)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 通过AnnexinⅤ /PI染色 ,流式细胞仪检测HL 6 0细胞的凋亡率 ;通过MTT试验检测Apo2L对白血病原代细胞的生长抑制率 ;利用半定量RT PCR检测HL 6 0细胞DR5基因表达的变化。结果 ①Apo2L能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,存在剂量 效应关系 ;②Apo2L能抑制白血病原代细胞生长 ,但不同类型原代细胞敏感性存在明显差异 ;③Vp16或Ara C能上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,Vp16或Ara C可和Apo2L协同诱导HL 6 0细胞凋亡。结论 Apo2L能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,抑制白血病原代细胞生长 ;化疗药Vp16或Ara C能上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强Apo2L的诱导细胞凋亡作用 ;Apo2L有可能成为一种新型抗肿瘤制剂。 展开更多
关键词 apo2l 足叶乙甙 阿糖胞苷 白血病 细胞增殖 化疗药
原文传递
WtCosmc质粒转染对Tn^+肿瘤细胞恶性行为的影响 被引量:1
12
作者 杜镇镇 刘栋 +4 位作者 孙旭红 于晓锋 石传芹 徐雪 胡涛 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期262-267,共6页
目的:以Tn+肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc(WtCosmc)质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法:流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn+与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn+肿瘤细胞经Fugene ... 目的:以Tn+肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc(WtCosmc)质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法:流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn+与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn+肿瘤细胞经Fugene 6转染WtCosmc质粒,并用免疫荧光检测细胞表面Tn抗原表达状况.分别采用荧光法、CCK-8和Transwell检测转染前后Tn+肿瘤细胞的T-synthase活性、细胞增殖、迁移能力及对Apo2L/TRAIL的敏感性.结果:与Tn-细胞相比,Tn+肿瘤细胞T-synthase活性及对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性较低;细胞增殖、迁移能力较强.经WtCosmc质粒转染后,Tn+细胞T-synthase活性及其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性明显增高;Tn抗原表达受抑;细胞增殖及迁移能力明显下降.结论:转染WtCosmc可恢复Tn+细胞T-synthse活性,抑制Tn抗原的表达,进而增强其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性,降低细胞增殖、迁移能力,有效抑制Tn+肿瘤细胞的恶性行为. 展开更多
关键词 WtCosmc Tn抗原 细胞增殖 细胞凋亡 apo2l/trail
下载PDF
提高重组TRAIL表达产率的优化策略 被引量:3
13
作者 鲍熹珺 魏东芝 +4 位作者 沈亚领 周劲松 张国钧 孙菁 球谊 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期74-80,共7页
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Apo2L/TRAIL)是一种新型的抗肿瘤蛋白。针对缩短发酵周期,提高生产效率这一目标,首先在摇瓶中利用响应面设计优化发酵表达条件,总TRAIL蛋白的表达量提高到25.7%。在此基础上研究了发酵条件对可溶性TRAIL... 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Apo2L/TRAIL)是一种新型的抗肿瘤蛋白。针对缩短发酵周期,提高生产效率这一目标,首先在摇瓶中利用响应面设计优化发酵表达条件,总TRAIL蛋白的表达量提高到25.7%。在此基础上研究了发酵条件对可溶性TRAIL蛋白表达量的影响。于3.7L发酵罐放大进行补料-分批发酵实验时,单位菌体可溶性TRAIL蛋白的表达量提高了67%,实现了在大肠杆菌高密度培养过程中单位细胞重组TRAIL蛋白的可溶性表达和体积生产率的提高。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 重组大肠杆菌 响应面法 发酵优化
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部