APOA2基因表达与慢性乙型肝炎病情进展的相关性探讨

目的 分析APOA2基因表达对乙型肝炎病毒(hepatitis B,HBV)复制和转录的影响,探究APOA2基因与慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)病情进展的相关性。方法 构建重组APOA2基因过表达质粒,设计、合成APOA2 siRNA,分别转染至HepG2.2.15细胞,培养72 h后利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantity polymerase chain reaction, RT-qPCR)、Western blot和ELISA等方法对比检测转染前后细胞内外APOA2、HBV-DNA、HBsAg、HBeAg、HBcAg等指标的变化,阐明APOA2基因表达对HBV复制和转录的影响。依据纳入标准收集临床样本,对照组(N组)、慢性HBV携带组(CHB1)、HBeAg阳性组(CHB2)和肝硬化失代偿期组(CHB3),各收集50例作为研究对象;另外,选择首次检测HBV-DNA>10~7 IU/mL的患者作为研究群体,依据治疗前和治疗6个月HBV-DNA含量降低程度进行分组,HBV-DNA≥10~5 IU/mL者为第1组,10~5 IU/mL>HBV-DNA≥10~2 IU/mL为第2组,低于检测下限为第3组;利用免疫透射比浊及qPCR分别检测上述临床样本中APOA2及HBV-DNA含量,采用t检验分析2组间差异,观察APOA2含量与CHB病情进展的相关性。结果 HepG2.2.15细胞APOA2 mRNA和蛋白水平明显低于HepG2细胞,差异均有统计学意义(P均<0.05);HepG2.2.15细胞中APOA2基因过表达时,细胞内外HBV-DNA、HBsAg、HBeAg和HBcAg含量均明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);APOA2基因沉默时上述指标均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);APOA2含量在N组、CHB1组、CHB2组、CHB3组之间呈现逐渐降低趋势,且组间两两比较均有统计学意义(P均<0.05);反之,在1、2、3组之间APOA2含量呈递增趋势,组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 APOA2基因可能具有抑制HBV-DNA复制、转录的作用;在HBV引起的CHB中,APOA2基因起着抑制病情进展的作用。