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三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响 被引量:9
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作者 钟振国 吕良 +6 位作者 柴立民 吴登攀 张雯艳 黄金兰 高艺文 李菲 朱博 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期77-80,共4页
目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模... 目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。 展开更多
关键词 三七总皂苷 快速老化模型小鼠 app基因
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海风藤对β-APP基因表达的影响 被引量:7
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作者 韩恩吉 胡洪涛 +3 位作者 何秀全 邓小梅 卢勇 周海涛 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2003年第1期87-89,共3页
目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。方法:用细胞培养和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察海风藤对β-APPmRNA的影响。结果:海风藤选择性抑制β-APP基因表达。结论:β-APP与Alzheimer病(AD)的... 目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。方法:用细胞培养和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察海风藤对β-APPmRNA的影响。结果:海风藤选择性抑制β-APP基因表达。结论:β-APP与Alzheimer病(AD)的发病关系密切,海风藤选择性抑制β-APP基因达,为其防治AD提供了更加可靠的实验依据。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 海风藤 淀粉样前体蛋白基因
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三种不同类型早发性阿尔茨海默病的临床、影像生物标志物及基因特点分析
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作者 李海涛 杨伊姝 +2 位作者 张伟 田园如画 李轩宇 《临床和实验医学杂志》 2024年第14期1462-1467,共6页
目的探讨3种不同类型早发性阿尔茨海默病(EOAD)的临床、影像生物标志物及基因特点。方法运用首都医科大学附属北京友谊医院医渡云临床数据平台,以“AD、AD源性轻度认知功能障碍”作为疾病名称关键词,限制年龄为<65岁,检索时间从2018... 目的探讨3种不同类型早发性阿尔茨海默病(EOAD)的临床、影像生物标志物及基因特点。方法运用首都医科大学附属北京友谊医院医渡云临床数据平台,以“AD、AD源性轻度认知功能障碍”作为疾病名称关键词,限制年龄为<65岁,检索时间从2018年8月至2024年1月。采用描述性统计对符合条件的所有病例从临床特点、生物学标志物、神经影像、基因检测等进行分析。总结并分析3种EOAD典型病例:PS1突变、APP突变、未知基因型患者的临床表现、头颅MR、糖代谢正电子发射计算机断层显像仪(PET)或Aβ-PET、生物学标志物、基因测序结果。结果39例患者致病基因PS1、APP突变为3例(7.7%),APOEε4携带率为17例(43.6%),内侧颞叶萎缩为31例(79.5%),糖代谢PET主要在后扣带回37例(94.8%);额、顶叶皮层34例(87.1%)代谢性降低等。Aβ-PET阳性9例,显像剂主要摄取部位集中在额顶叶(100%)。脑脊液Aβ42降低12例(100%),平均(393.07±90.86)pg/mL;Aβ42/Aβ40比值降低12例(100%),平均0.06±0.02;磷酸化Tau蛋白(p-Tau)升高10例(83.3%),平均(125.82±43.21)pg/mL。家族性PS1突变AD存在PSEN1 p.Tyr159Ser基因突变;APP突变AD存在APP基因有1个突变;未知致病基因突变早发性AD未发现PS1、PS2、APP突变基因,未发现痴呆相关风险基因突变。结论EOAD以“情景记忆力障碍”为主要临床特征,需要结合结构头颅核磁、糖代谢PET或Aβ-PET、生物学标志物、基因检测等综合因素进行临床诊断。 展开更多
关键词 早发型阿尔茨海默病 PS1基因突变 app基因突变 APOEε4基因 糖代谢PET Β-淀粉样蛋白 脑脊液Aβ Aβ-PET
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Alzheimer病患者APP及PS1基因的表达水平 被引量:1
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作者 张野 钱伊萍 +4 位作者 江开达 禹顺英 汪栋祥 张明园 江三多 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期525-528,共4页
为了检测Alzheimer病(Alzheimer’s disease,AD)患者外周血中淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)基因及早老素1(Presenilin 1,PS1)基因的表达情况,进而探讨APP及PS1基因的表达与AD的相关性,采用SYBRGreenⅠ的方法对45例AD... 为了检测Alzheimer病(Alzheimer’s disease,AD)患者外周血中淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)基因及早老素1(Presenilin 1,PS1)基因的表达情况,进而探讨APP及PS1基因的表达与AD的相关性,采用SYBRGreenⅠ的方法对45例AD患者、25例血管性痴呆(vascular dementia,VD)患者及60名正常对照组样本的mRNA进行绝对定量,检测得到APP基因及PS1基因在对照组中的表达水平分别为0.026±0.005 amol/μg cDNA和0.026±0.004 amol/μg cDNA;在AD患者组中的表达量分别为0.044±0.006 amol/μg cDNA和0.051±0.011amol/μg cDNA;,在VD患者组中的表达水平分别为0.072±0.013 amol/μg cDNA和0.039±0.005 amol/μg cDNA。经显著性检验,AD患者组APP基因的表达水平上调,t=2.639,P<0.01;PS1基因的表达水平同样呈上调趋势,t=2.173,P<0.05,差异均具有统计学意义。VD患者组APP基因的表达水平上调,t=3.028,P<0.01;PS1基因的表达水平也同样呈上调趋势,t=2.012,P<0.05,均有显著性差异。因此,APP及PS1基因的表达水平的增高并不一定与AD发生特异性关联,而可能与多种导致痴呆的脑部病变发生关联。 展开更多
关键词 ALZHEIMER病 app基因 PS1基因 表达水平 关联
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APP、Fis1、KLRF1和PDCD7基因在急性髓系白血病中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 王巍 孟凡义 +3 位作者 黄走方 李利 蔡艳霞 孙启鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2259-2261,2265,共4页
目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)、裂殖1同源物(Fis1)、杀伤细胞凝集素样受体亚家族F成员1(KLRF1)和细胞程序性死亡7(PDCD7) mRNA在急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其预后意义。方法抽取34例AML及10例非恶性血液病患者骨髓,提取总RNA并... 目的探讨淀粉样前体蛋白(APP)、裂殖1同源物(Fis1)、杀伤细胞凝集素样受体亚家族F成员1(KLRF1)和细胞程序性死亡7(PDCD7) mRNA在急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其预后意义。方法抽取34例AML及10例非恶性血液病患者骨髓,提取总RNA并逆转录成cDNA,SYBR Green I实时定量PCR法检测各基因 mRNA表达水平,采用2-△Ct公式计算基因 mRNA相对表达量。结果AML患者组PDCD7 mRNA表达水平均显著高于对照组(Z=-2.213,P=0.027)。除M1(1例)、M2a(2例)外的AML各亚型基因表达同对照组比较,APP mRNA在伴有t(8,21)染色体异常的M2表达显著高于对照组(Z=-2.197,P=0.028),而在M4b和M5b中的表达则显著低于对照组(Z=-2.368,P=0.018)。APP mRNA在AML亚型间表达有差异,M2显著高于M4和M5(Z=-2.430,P=0.015;Z=-3.175,P=0.001)。结论AML患者高表达PDCD7基因,单核细胞白血病患者低表达APP基因。 展开更多
关键词 白血病 髓系 急性 基因表达 淀粉样前体蛋白 裂殖1同源物 细胞程序性死亡7
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补肾中药有效成分对SAMP8小鼠海马APP及PS1基因表达的影响 被引量:11
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作者 张玉莲 刘爽 +1 位作者 张琳琳 田涛涛 《天津中医药》 CAS 2012年第1期59-61,共3页
[目的]观察补肾中药有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对6月龄SAMP8小鼠淀粉样前体蛋白(APP)及早老素-1(PS1)基因表达的作用,为补肾中药防治老年性痴呆提供实验依据。[方法]选择6月龄健康雄性SMAP8小鼠40只,随机分为模型组、淫羊藿... [目的]观察补肾中药有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对6月龄SAMP8小鼠淀粉样前体蛋白(APP)及早老素-1(PS1)基因表达的作用,为补肾中药防治老年性痴呆提供实验依据。[方法]选择6月龄健康雄性SMAP8小鼠40只,随机分为模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组,每组10只。另取10只SAMR1小鼠作为对照组。治疗组分别给予淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸灌胃治疗(浓度为淫羊藿苷20 mg/kg,齐墩果酸、补骨脂素各50 mg/kg),每日1次,每次0.3 mL,连续灌胃4周。对照组与模型组均给予等量生理盐水灌胃。4周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测海马组织PS1基因表达。[结果]1)与对照组相比,淫羊藿苷组、齐墩果酸组及补骨脂素组对APP基因下调均具有统计学意义(P<0.05)。2)与对照组相比,补骨脂素组有下调小鼠海马组织PS1基因的趋势,淫羊藿苷组及齐墩果酸组对PS1基因下调具有统计学意义(P<0.05)。[结论]补肾中药可能通过下调APP及PS1基因的表达,进而达到治疗老年性痴呆作用。 展开更多
关键词 老年性痴呆 补肾中药 淫羊藿苷 补骨脂素 齐墩果酸 淀粉样前体蛋白基因 早老素质1基因 SAMP8鼠
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突变型APP双荧光融合基因的构建和FRET对其表达的研究 被引量:1
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作者 李晓晴 张苏明 +1 位作者 骆清铭 张智红 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期388-390,513,共4页
目的探讨Alzheimer病的发病机制,研究淀粉样蛋白前体(APP)酶解过程,构建含有Swedish突变的双荧光真核表达系统。方法通过聚合酶链式反应(PCR)得到蓝色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白碱基序列(YFP),生物合成含有Swedish突变的APP中间54个... 目的探讨Alzheimer病的发病机制,研究淀粉样蛋白前体(APP)酶解过程,构建含有Swedish突变的双荧光真核表达系统。方法通过聚合酶链式反应(PCR)得到蓝色荧光蛋白(CFP)和黄色荧光蛋白碱基序列(YFP),生物合成含有Swedish突变的APP中间54个碱基片段(54bp),利用基因工程技术将CFP、54bp、YFP片段克隆至载体质粒pcDNA3.0中,得到重组质粒pcDNA3.0-CFP-54bp-YFP,将其转染至人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中,利用激光共聚焦显微镜观察荧光表达,检测荧光共振能量转移(FRET)。结果酶切和基因序列分析证明重组质粒构建成功;对转染细胞的荧光和FRET检测发现融合基因能够准确表达荧光,同时可以观测到FRET现象。结论含有Swedish突变的荧光融合基因的构建为探索AD的发病机制、活体观察APP裂解奠定了基础。 展开更多
关键词 荧光共振能量转移 淀粉样前体蛋白 融合基因 阿尔茨海默病
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蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量:7
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作者 教亚男 姚璎珈 +4 位作者 孔亮 李少恒 陶震宇 闫宇辉 杨静娴 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2053-2058,共6页
目的:研究蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y细胞的作用,以探讨其可能的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,并转染APP595/596基因,体外构建研究Aβ致病作用的细胞模型。采用CCK-8法检测细胞存活率;检测LDH评价细胞的损伤程度;流... 目的:研究蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y细胞的作用,以探讨其可能的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,并转染APP595/596基因,体外构建研究Aβ致病作用的细胞模型。采用CCK-8法检测细胞存活率;检测LDH评价细胞的损伤程度;流式细胞术检测细胞凋亡;用RT-PCR和Western blot法检测β-分泌酶(又称β位点APP裂解酶1,β-site APP cleaving enzyme 1,BACE 1)的mRNA及蛋白的表达;采用免疫荧光细胞化学和Western blot法检测Aβ的表达。结果:蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y神经细胞有保护作用,可增加细胞的存活率,降低LDH的释放,抑制细胞的凋亡,减少BACE1的mRNA与蛋白的表达,抑制Aβ的生成。结论:蛇床子素可保护转染APP595/596基因的SH-SY5Y神经细胞,其保护机制可能与减少BACE l的mRNA与蛋白表达有关。 展开更多
关键词 蛇床子素 app595/596基因 β位点app裂解酶1
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还脑益聪方靶向HAMP调节铁代谢改善AD模型小鼠认知障碍的机制研究
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作者 孙宁宁 贺小平 +5 位作者 刘珊 赵炎 钟健民 郝雅煊 张烨华 董贤慧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1240-1248,共9页
目的探讨还脑益聪方(Huannao Yicong decoction,HYD)对APP/PS1小鼠学习记忆能力与脑铁代谢的影响以及HAMP基因敲除小鼠(HAMP^(-/-)小鼠)和APP/PS1双转基因模型小鼠的相关性。方法实验分5组,HAMP^(-/-)组:6月龄HAMP基因敲除小鼠;APP/PS1... 目的探讨还脑益聪方(Huannao Yicong decoction,HYD)对APP/PS1小鼠学习记忆能力与脑铁代谢的影响以及HAMP基因敲除小鼠(HAMP^(-/-)小鼠)和APP/PS1双转基因模型小鼠的相关性。方法实验分5组,HAMP^(-/-)组:6月龄HAMP基因敲除小鼠;APP/PS1组:6月龄APP/PS1双转基因小鼠;HAMP^(-/-)+还脑益聪方组(HAMP^(-/-)+HYD);APP/PS1+还脑益聪方组(APP/PS1+HYD);阴性对照组:6月龄C57BL/6J小鼠,每组6只。还脑益聪方灌胃给药(还脑益聪方13.68 g·kg^(-1)体质量),其余各组给予蒸馏水灌胃,每天1次,给药2个月。给药结束后,Morris水迷宫测试每组小鼠学习记忆能力;生化法检测各小鼠脑组织铁含量;Western blot与RT-qPCR检测各组小鼠海马转铁蛋白(transferrin,TF)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor1,TFR1)、膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)蛋白、二价金属离子转运体1(divalent metal transporter1,DMT1)与β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)及mRNA表达水平。结果与正常组相比,HAMP^(-/-)组小鼠与APP/PS1组小鼠学习记忆能力均降低,脑组织铁含量升高,HAMP^(-/-)组与APP/PS1组小鼠海马中Aβ蛋白表达升高(P<0.01),TF、TFR1、DMT1蛋白及mRNA表达均升高(P<0.01),FPN1蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);分别与HAMP^(-/-)组和APP/PS1组相比,HAMP^(-/-)+HYD组与APP/PS1+HYD组小鼠学习记忆能力均提高,脑组织铁含量降低,Aβ蛋白表达下降(P<0.01),TF、TFR1、DMT1蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),FPN1蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。结论HAMP^(-/-)小鼠和APP/PS1小鼠之间具有一定关联性,HYD可以改善HAMP^(-/-)与APP/PS1小鼠学习记忆能力,减少Aβ沉积,其机制可能与调节TF、TFR1、DMT1、FPN1的表达,改善脑铁超载有关。 展开更多
关键词 还脑益聪方 HAMP基因敲除小鼠 铁代谢 app/PS1 认知障碍 Β淀粉样蛋白
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中医药治疗阿尔茨海默病APP/PS1双转基因小鼠的研究进展 被引量:1
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作者 孙宁宁 张松江 +3 位作者 武鑫 苏少华 王冬慧 高剑峰 《中国中医药现代远程教育》 2019年第8期110-112,共3页
中医药在治疗阿尔茨海默病方面具有多靶点、多方式、多途径的优势。目前,APP/PSI双转基因小鼠是一种比较理想的能反映AD特征的AD动物模型,且该模型已成功应用于中医药防治AD的领域。本文结合该领域的最新研究进展,对近年来中药复方及有... 中医药在治疗阿尔茨海默病方面具有多靶点、多方式、多途径的优势。目前,APP/PSI双转基因小鼠是一种比较理想的能反映AD特征的AD动物模型,且该模型已成功应用于中医药防治AD的领域。本文结合该领域的最新研究进展,对近年来中药复方及有效成分治疗阿尔茨海默病APP/PSI双转基因小鼠进行综述。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 app/PS1 双转基因 中医药疗法 研究进展 呆证
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装载温控双基因裂解质粒的App菌影检测方法研究
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作者 魏延宏 徐良 +5 位作者 李媛 孙颖 刘颖 孙铭君 宋桂敏 金天明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期104-106,共3页
为了提高对前期试验中制备的胸膜肺炎放线杆菌(App)菌影的检测效率,试验通过形态学鉴定、电镜扫描、PCR鉴定和间接ELISA法对App及其菌影进行检测。结果表明:PCR检测方法特异性显著,可检测AppⅠ、pMC-WK AppⅠ及其裂解情况,具有准确、灵... 为了提高对前期试验中制备的胸膜肺炎放线杆菌(App)菌影的检测效率,试验通过形态学鉴定、电镜扫描、PCR鉴定和间接ELISA法对App及其菌影进行检测。结果表明:PCR检测方法特异性显著,可检测AppⅠ、pMC-WK AppⅠ及其裂解情况,具有准确、灵敏、容易操作等优点。说明将菌影的形态学检查、电镜扫描、PCR和血清学检测相结合,可准确检验试验中不同阶段的App及其菌影。 展开更多
关键词 温控双基因 胸膜肺炎放线杆菌(app) 菌影 电镜扫描(SEM) PCR 间接ELISA
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The Functions of the Amyloid Precursor Protein Gene and Its Derivative Peptides: III Pharmacological Studies
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作者 Peter K. Panegyres Emily R. Atkins 《Neuroscience & Medicine》 2011年第4期397-409,共13页
Pharmacological studies reveal APP and Aβ have interactions with glutamate and calcium, cytokines, copper/zinc chelators, secretases and presenilins, nicotinic receptors, acetycholinesterase, neurotrophins, non-stero... Pharmacological studies reveal APP and Aβ have interactions with glutamate and calcium, cytokines, copper/zinc chelators, secretases and presenilins, nicotinic receptors, acetycholinesterase, neurotrophins, non-steroidal anti-inflame-matory drugs, monoclonal antibodies to Aβ, protease inhibitors, oestrogen, homocysteine, immediate early genes such as c-fos or c-jun and cholesterol. These functional and pharmacological observations highlight the need for greater understanding of APP and Aβ in brain function and have implications for clinical trials. 展开更多
关键词 AMYLOID Precursor Protein app genes DEMENTIA Alzheimer’s Disease
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佛山醒狮文化基因挖掘与数字化保护及活化应用研究 被引量:1
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作者 刘捷 《中华武术》 2023年第12期122-125,共4页
佛山醒狮文化是我国重要的非物质文化遗产。然而,受到种种因素的影响,佛山醒狮文化传承受到巨大局限,如何对佛山醒狮文化进行保护和传承成了迫在眉睫的问题。数字化技术的产生让醒狮文化传承的路径得以拓宽,基于此,本研究在对佛山醒狮... 佛山醒狮文化是我国重要的非物质文化遗产。然而,受到种种因素的影响,佛山醒狮文化传承受到巨大局限,如何对佛山醒狮文化进行保护和传承成了迫在眉睫的问题。数字化技术的产生让醒狮文化传承的路径得以拓宽,基于此,本研究在对佛山醒狮文化基因挖掘分析的基础上,介绍了佛山醒狮文化数字化保护的方法,并提出了佛山醒狮活化应用研究的策略。 展开更多
关键词 佛山醒狮 文化基因挖掘 数字化保护 活化应用策略
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龟形蛇纹寿图案的文化基因分析与设计应用研究 被引量:1
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作者 刘凯雄 潘邦龙 《包装工程》 CAS 北大核心 2023年第20期414-425,共12页
目的天水龟形蛇纹寿是建筑装饰的吉祥图案,蕴含着丰富的地域文化特色,在造型文化等方面凸显着时代印记和审美趋向,但该图案目前并没有完全融入当代生活。应借助现代的、科学的、合理的设计方法,拉近传统与时尚的距离,提升龟形蛇纹寿图... 目的天水龟形蛇纹寿是建筑装饰的吉祥图案,蕴含着丰富的地域文化特色,在造型文化等方面凸显着时代印记和审美趋向,但该图案目前并没有完全融入当代生活。应借助现代的、科学的、合理的设计方法,拉近传统与时尚的距离,提升龟形蛇纹寿图案的知名度,从而实现传统优秀地域文化资源的活化再生。方法首先通过文献资料、书籍资料、实地考察等方法对该图案的文化基因进行分析,包括显性和隐性两部分,从而为后文的设计演化应用提供了强有力的理论支撑;接着,依据理论分析结果从不同的层次出发,绘制CGM设计要素模型,形成造型库,通过用户调研法,提取核心文化因子;然后,构建数字化APP的应用模型和界面设计,以现代传播平台的方式提升受众的参与感和互动性;最后,进行具体的案例实践,形成新图案,并运用到室内装饰设计中,以验证此APP的可行性。结论将龟形蛇纹寿图案进行设计演化,不仅是形式上的创新,更是基因的流变,使其更符合现代的审美需求,扩大受众圈,促使文化的用途变得更广泛,展示的机会变得更多样。 展开更多
关键词 龟形蛇纹寿图案 文化基因分析 CGM模型 app 设计应用
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猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立 被引量:14
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作者 刘建杰 何启盖 +5 位作者 陈焕春 吴斌 徐晓娟 刘军发 唐先春 贝为成 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期148-151,共4页
根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87~ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和... 根据胸膜肺炎放线杆菌S4 0 74菌株毒素I的序列 ,设计了 1对引物 ,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因 (apxICA) ,扩增的DNA片段大小为 36 4 0bp(4 6 87~ 832 6bp) ,将其克隆到pMD18 T载体中 ,酶切鉴定和序列测定后 ,进一步将其插入pET 2 8a中构建了原核表达载体 ,SDS PAGE和Westernblotting分析表明 ,该基因在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中获得了表达 ,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板 ,建立了检测毒素I血清抗体的ELISA方法。临床应用表明 。 展开更多
关键词 胸膜肺炎 放线杆菌毒素 I基因克隆 基因表达 ELISA检测
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饲粮纤维水平对高黎贡山仔猪与杜洛克仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1及组织急性期蛋白基因表达影响的比较研究 被引量:2
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作者 李美荃 信爱国 +5 位作者 张春勇 安清聪 王荣蛟 潘洪彬 陈克嶙 郭荣富 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1759-1768,共10页
本试验旨在比较饲粮纤维水平对杜洛克仔猪、高黎贡山仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1(MT1)和组织急性期蛋白(APPs)基因表达的影响。选用35日龄高黎贡山断奶仔猪和杜洛克断奶仔猪各24头(公母各占1/2)为研究对象,试验设对... 本试验旨在比较饲粮纤维水平对杜洛克仔猪、高黎贡山仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1(MT1)和组织急性期蛋白(APPs)基因表达的影响。选用35日龄高黎贡山断奶仔猪和杜洛克断奶仔猪各24头(公母各占1/2)为研究对象,试验设对照组和试验组(每组12个重复,每个重复1头猪),分别饲喂纤维水平为3.53%和7.04%饲粮,饲养至60日龄结束。考察仔猪生产性能,观察小肠形态学变化,检测十二指肠、空肠、回肠黏膜MT1 mRNA相对表达量以及肝脏、胰脏、脾脏、肾脏、十二指肠、空肠、回肠7种组织中4种APPs[C-反应蛋白(CRP)、触珠蛋白(HP)、α1-酸性糖蛋白(AGP)和血清淀粉样蛋白A(SAA)]mRNA相对表达量。结果表明:饲粮纤维水平为7.04%时,高黎贡山仔猪日增重、日采食量显著高于杜洛克仔猪(P<0.05),料重比显著低于杜洛克仔猪(P<0.05);高黎贡山仔猪十二指肠、空肠、回肠的绒毛长度极显著大于杜洛克仔猪(P<0.01);十二指肠、空肠隐窝深度极显著低于杜洛克仔猪(P<0.01);十二指肠、空肠、回肠绒毛长度/隐窝深度极显著大于杜洛克仔猪(P<0.01)。饲喂纤维水平为7.04%饲粮的高黎贡山仔猪十二指肠黏膜中MT1 mRNA相对表达量极显著高于饲喂纤维水平为3.53%饲粮的高黎贡山仔猪及饲喂纤维水平为7.04%或3.53%饲粮的杜洛克仔猪(P<0.01)。被测组织中均能检测出CRP、HP、AG P、SAA mRNA的表达。饲粮纤维水平为7.04%时,绝大部分组织的APPs mRNA相对表达量均为高黎贡山仔猪显著高于杜洛克仔猪(P<0.05)。上述结果表明,高黎贡山仔猪相对杜洛克仔猪更加适应高纤维水平饲粮;高黎贡山仔猪通过上调MT1及APPs mRNA的表达,增加仔猪的抗病能力,从而改善仔猪的生产性能。 展开更多
关键词 高黎贡山仔猪 杜洛克仔猪 纤维水平 MT1 appS 基因表达
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猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅠA基因的克隆及其原核表达 被引量:6
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作者 王冬梅 刘磊 +3 位作者 逯忠新 赵萍 高鹏程 储岳峰 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第5期373-376,共4页
参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5 型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3 069 bp的片段,将其克隆到pMD 18 T载体,经酶切、PCR鉴定和序列分析,表明克隆是成功的。再将长为1 14... 参照GenBank上登录的猪胸膜肺炎放线杆菌血清5 型菌株(AF363361)的apxⅠA基因序列设计了1对特异性引物,用PCR法扩增apxⅠA基因,获得了3 069 bp的片段,将其克隆到pMD 18 T载体,经酶切、PCR鉴定和序列分析,表明克隆是成功的。再将长为1 149 bp的apxⅠA基因的部分片段(编码ApxⅠ的N 端的片段)插入到原核表达载体pET 28(a)中,构建了重组表达质粒pET apxⅠA,转化大肠埃希氏菌JM109(DE3),在IPTG 诱导下获得了高效表达,经SDS PAGE检测,证实表达产物大小约为41 ku。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅠA基因 克隆 原核表达
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海风藤抑制淀粉样前体蛋白基因表达的研究 被引量:20
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作者 韩恩吉 Jose.,R 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第11期691-693,共3页
目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞系列淀粉样前体蛋白(βAPP)基因表达的抑制作用。方法:应用Northern印迹杂交观察βAPPmRNA的变化,应用细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)释放、细胞集落观察海风藤对... 目的:研究海风藤对人类神经母细胞瘤细胞系列淀粉样前体蛋白(βAPP)基因表达的抑制作用。方法:应用Northern印迹杂交观察βAPPmRNA的变化,应用细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)释放、细胞集落观察海风藤对神经细胞的直接作用。结果:海风藤选择性的抑制βAPP基因表达。实验浓度内未发现细胞毒性作用。结论:βAPP与Alzheimer’s病(AD)的发病关系密切。 展开更多
关键词 海风藤 淀粉样 前体蛋白 基因 早老性痴呆 防治
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxIA基因在大肠杆菌中的融合表达与纯化 被引量:3
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作者 黄琦 谢芝勋 +4 位作者 庞耀珊 刘加波 邓显文 谢志勤 谢丽基 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1063-1067,共5页
选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apxIA基因序列中的抗原决定簇集中的区域,采用PCR方法从APP血清1型参考株259的基因组DNA中,扩增apxIA基因中约954bp的片段,连接到pMD-18T载体,经测序正确后,以EcoRI和NotI双酶切,亚克隆到原核表达载体... 选取猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)apxIA基因序列中的抗原决定簇集中的区域,采用PCR方法从APP血清1型参考株259的基因组DNA中,扩增apxIA基因中约954bp的片段,连接到pMD-18T载体,经测序正确后,以EcoRI和NotI双酶切,亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌DH5α,经0.4mmol/LIPTG诱导表达,产物通过尿素变性复性,并以Glutathione Sepharose 4B亲和层析的方法对目的蛋白进一步纯化。SDS-PAGE分析结果显示,目的基因在大肠杆菌DH5α中以包涵体形式高效表达,经薄层凝胶扫描分析占菌体总蛋白的32%,纯化后的GST融合蛋白纯度达到95%,为亚单位疫苗和诊断抗原的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxIA基因 大肠杆菌 融合表达 纯化
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胸膜肺炎放线杆菌血清型特异的疫苗候选基因的筛选及痤疮丙酸杆菌异源免疫 被引量:4
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作者 雷连成 韩文瑜 +2 位作者 孙长江 杨鹏 冯新 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期838-842,共5页
目的筛选猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型特异的疫苗候选基因,并研究痤疮丙酸杆菌对猪传染性胸膜肺炎的异源免疫。方法采用cDNA代表性差异分析、大肠杆菌核糖体展示、免疫筛选和RT-PCR技术筛选APP1型和5型血清型特异的疫苗候选基因,进... 目的筛选猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型特异的疫苗候选基因,并研究痤疮丙酸杆菌对猪传染性胸膜肺炎的异源免疫。方法采用cDNA代表性差异分析、大肠杆菌核糖体展示、免疫筛选和RT-PCR技术筛选APP1型和5型血清型特异的疫苗候选基因,进行克隆、测序及同源序列分析。并用与APP疫苗候选基因具有同源序列的痤疮丙酸杆菌(PA)免疫小鼠,研究其对APP感染的异源免疫。结果获得血清1型APP6条疫苗候选基因,2条为未知基因,2条与PA同源性为98%,2条与人cDNA有同源性。获得血清5型APP7条疫苗候选基因,其中2条为未知基因,2条与PA同源性分别为93%和100%。用PA全菌免疫小鼠,产生的抗血清可与1型和5型APP发生强的免疫反应,ELISA检测效价达1∶3200;脾淋巴细胞检测结果显示,免疫组CD3+、CD4+T细胞的百分率及CD4+/CD8+比值与对照组相比均升高,两组CD3+T细胞百分率差异有显著意义。以10倍LD501型和5型APP分别感染PA免疫小鼠,小鼠存活率分别为95%和90%,并且在攻毒后第15天体内APP可全部被清除。结论1型与5型APP存在不同的疫苗候选基因,痤疮丙酸杆菌与之存在共同抗原,能够产生交叉免疫应答,对血清1型和5型APP的感染具有预防作用。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 疫苗候选基因 痤疮丙酸杆菌 异源免疫
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