人APP基因C-末端片段在PC12细胞中的稳定表达及其对细胞生长和发育的影响

APP在AD病因学中是一个重要的分子，但到目前为止尚缺乏良好的动物和细胞模型用来探讨APP在AD发病中的作用。本研究旨在建立过表达人APP基因C－末端片段的遗传工程细胞系。将人APP695cDNA中编码C－末端105个氨基酸的片段重组到真核表达载体pDORneo中形成重组质粒pDORneo－CT，然后用脂质体将其转染到大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）中。用800μg／mlG418筛选获得了在mRNA和蛋白质水平均表达相应片段的稳定细胞系。细胞形态学观察和MTT，LDH分析表明，该片段在细胞内的表达未能对NGF处理的PC12细胞产生明显的毒性作用。