金思维提取物对APPV717I转基因小鼠早期学习记忆和突触结构与功能的影响

目的:研究金思维提取物(GEPT)对APPV717I转基因小鼠痴呆早期学习记忆的影响,并进一步探讨其可能的机制。方法:将3月龄的APPV717I转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐治疗组(0.92mg·kg-1·d-1)、GEPT低、中、高(0.075,0.15,0.3g·kg-1·d-1)剂量组,并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常组,每组6只,每天灌胃给药1次。给药4个月后(7月龄)用Morris水迷宫进行行为学测试,用免疫组化方法测定海马CA1区突触相关蛋白Shank1的表达变化,同时用透射电镜观察海马CA1区突触的超微结构变化。结果:行为学检测,GEPT治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验均有显著差异(P<0.05)。突触相关蛋白Shank1,模型组小鼠大脑海马CA1区中Shank1阳性细胞总面积以及阳性细胞积分吸光度与正常组相比明显减少,而GEPT治疗组与模型组相比能显著提高Shank1阳性细胞总面积以及阳性细胞积分吸光度(P<0.05)。电镜结果显示,模型组小鼠可见突触数量减少,突触间隙增宽,突触界面曲率下降,突触后致密区厚度减小,GEPT治疗组能剂量依赖性的对突触损害起到修复作用。结论:GEPT能通过修复突触损伤以及提高Shank1蛋白的表达进而改善APPV717I转基因小鼠痴呆早期的学习记忆能力。

中药复方金思维对APPV717Ⅰ转基因小鼠海马神经损伤的保护作用

目的研究中药复方金思维对APPV717Ⅰ转基因小鼠海马神经损伤的保护作用。方法将3月龄的APPV717Ⅰ转基因小鼠随机分为模型组,多奈哌齐治疗组(0.92 mg/kg),金思维小、中、大剂量(0.075、0.15、0.3g/kg)治疗组,并以同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠作为正常对照组,每组6只,每天ig给药1次。给药8个月后(11月龄)用Morris水迷宫进行行为学测试,用电镜观察海马CA1区超微结构变化,同时用免疫组化方法观察海马CA1区Shank1蛋白的表达变化。结果行为学检测显示,金思维治疗组与模型组相比逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),目标象限游泳时间明显延长(P<0.05、0.01),并且与对照组比较无显著差异。海马超微结构显示,模型组小鼠海马CA1神经元出现明显变性及坏死,突触结构不完整,数量明显减少。而金思维各剂量组与模型组相比,剂量依赖性的减轻神经元变性、坏死,增加突触的数目。突触相关蛋白Shank1,模型组小鼠海马CA1区Shank1阳性细胞总数、总面积以及阳性细胞积分吸光度与对照组相比明显减少(P<0.05、0.01),而金思维治疗组与模型组相比能显著提高Shank1阳性细胞总数、总面积以及阳性细胞积分吸光度(P<0.05、0.01)。结论金思维能明显改善APPV717Ⅰ转基因小鼠海马神经损伤,增加突触相关蛋白Shank1的表达,进而改善了APPV717Ⅰ转基因小鼠的学习记忆能力。

补肾化痰益智方对APPV717I小鼠学习记忆能力和海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响

目的:观察补肾化痰益智方(BSHT)对APPV717I转基因小鼠干预效果,揭示其可能作用机制。方法:将3月龄APPV717I转基因小鼠120只分为2批,每批60只,每批又随机分为5组,分别为多奈哌齐(0.000 92 g·kg^(-1)·d^(-1))组,补肾化痰益智方低、中、高剂量组(5.2,10.4,20.8 g·kg^(-1)·d^(-1)),模型组(APP),每组12只(雌雄各半);同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠24只作为正常组,灌胃给药,模型组及正常组予等容积双蒸水灌胃,每日1次。第1批小鼠给药8个月,第2批给药4个月,最后同时以Morris水迷宫进行行为学检测,分别以酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫印迹法测定(Western blot)海马神经元Tau蛋白磷酸化(p-Ser 199/202,Tau-1)的表达水平。结果:行为学实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠的潜伏期有所延长(P<0.05,P<0.01);各治疗组与模型组比潜伏期明显缩短(P<0.05)。ELISA和Western blot实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠海马神经元的Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度显著升高(P<0.01);各治疗组Ser199/202磷酸化位点磷酸化水平较模型组比明显缩短(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾化痰益智方可以改善Ser199/202磷酸化位点磷酸化程度,防止神经原纤维缠结(NFT)的形成,从而改善APPV717I转基因小鼠早期的学习记忆能力。

中药金思维对APPV717I转基因小鼠早期学习记忆能力和CaMK Ⅱ表达水平的影响

目的:通过观察金思维对APPV717I转基因小鼠早期空间学习记忆能力及突触蛋白表达水平的影响,揭示其可能的作用机制。方法:将3月龄APPV717I转基因小鼠60只随机分为模型组、多奈哌齐组(0.00092g.kg-1.d-1)、金思维小(0.075g.kg-1.d-1)、中(0.15g.kg-1.d-1)和大剂量组(0.3g.kg-1.d-1),每组12只;同月龄遗传背景相同的C57BL/6J小鼠12只作为正常组,灌胃给药(0.01mL/g体质量),每日1次。在给药4个月后(7月龄)以Morris水迷宫进行行为学检测,以免疫组化的方法测定海马CA1区突触蛋白CaMKⅡ的表达水平。结果:行为学实验结果表明,与模型组比较,GEPT各剂量组能不同程度改善APPV717I转基因小鼠的空间学习记忆能力(P<0.05),免疫组化结果显示GEPT小剂量组CaMKⅡ平均光密度与模型组比较明显增加(P<0.05)。结论:GEPT可能通过提高突触相关蛋白CaMKⅡ在海马CA1区的表达从而改善APPV717I转基因小鼠早期的学习记忆能力。