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高通量提取西红柿基因组DNA方法探究及其在SNP分型中的应用
被引量:
2
1
作者
王海英
韩德俊
李晓蕊
《中国农学通报》
2023年第9期45-51,共7页
随着植物分子生物学的发展,植物分子试验对于大规模样品DNA提取的需求越来越大。本研究旨在开发快速、简便、高通量的DNA提取技术。以西红柿叶片为试验材料,用96孔盒对西红柿叶片进行冷冻干燥及粉碎,基于改良的SDS提取DNA方法,采取排枪...
随着植物分子生物学的发展,植物分子试验对于大规模样品DNA提取的需求越来越大。本研究旨在开发快速、简便、高通量的DNA提取技术。以西红柿叶片为试验材料,用96孔盒对西红柿叶片进行冷冻干燥及粉碎,基于改良的SDS提取DNA方法,采取排枪“两步加样一步抽提”,简化提取步骤,实现DNA的高通量提取。该方法提取DNA样品的平均浓度在138.6 ng/µL左右,满足一般性的PCR扩增要求;琼脂糖凝胶电泳结果显示绝大部分样品泳道可见清晰完整的DNA条带,无明显降解,并伴有少量的RNA污染。利用3个等位基因特异的定量PCR基因分型系统(AQP)分子标记对192个样本进行检测,结果显示3个标记的整体检测结果良好,均能有效区分样品间的不同等位基因位点。样品的有效荧光值占比在97%~99%之间,可以用于分子标记检测或遗传群体的基因分型。本研究在前人基础上探讨了一种简便、快速、高通量的西红柿基因组DNA提取方法,对于提取其他植物叶片组织DNA同样适用,并且该方法能够成功应用于AQP等其他类似的荧光分子标记检测,为大规模分子标记检测等实验DNA样品准备提供了借鉴。
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关键词
西红柿
改良的SDS方法
高通量提取DNA
琼脂糖凝胶电泳
aqp分子标记检测
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职称材料
题名
高通量提取西红柿基因组DNA方法探究及其在SNP分型中的应用
被引量:
2
1
作者
王海英
韩德俊
李晓蕊
机构
西北农林科技大学园艺学院
西北农林科技大学农学院
西安高新区农业农村和水务局
出处
《中国农学通报》
2023年第9期45-51,共7页
基金
陕西省烟草公司项目“烟草赤星病生物防治与生态调控技术研发与应用”(KJ-2021-02)。
文摘
随着植物分子生物学的发展,植物分子试验对于大规模样品DNA提取的需求越来越大。本研究旨在开发快速、简便、高通量的DNA提取技术。以西红柿叶片为试验材料,用96孔盒对西红柿叶片进行冷冻干燥及粉碎,基于改良的SDS提取DNA方法,采取排枪“两步加样一步抽提”,简化提取步骤,实现DNA的高通量提取。该方法提取DNA样品的平均浓度在138.6 ng/µL左右,满足一般性的PCR扩增要求;琼脂糖凝胶电泳结果显示绝大部分样品泳道可见清晰完整的DNA条带,无明显降解,并伴有少量的RNA污染。利用3个等位基因特异的定量PCR基因分型系统(AQP)分子标记对192个样本进行检测,结果显示3个标记的整体检测结果良好,均能有效区分样品间的不同等位基因位点。样品的有效荧光值占比在97%~99%之间,可以用于分子标记检测或遗传群体的基因分型。本研究在前人基础上探讨了一种简便、快速、高通量的西红柿基因组DNA提取方法,对于提取其他植物叶片组织DNA同样适用,并且该方法能够成功应用于AQP等其他类似的荧光分子标记检测,为大规模分子标记检测等实验DNA样品准备提供了借鉴。
关键词
西红柿
改良的SDS方法
高通量提取DNA
琼脂糖凝胶电泳
aqp分子标记检测
Keywords
tomato
improved SDS method
high throughput DNA extraction
agarose gel electrophoresis
aqp
molecular detection
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高通量提取西红柿基因组DNA方法探究及其在SNP分型中的应用
王海英
韩德俊
李晓蕊
《中国农学通报》
2023
2
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