砷对雄性大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响

[目的]研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响。[方法]将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组以及低、中、高剂量砷染毒组,每组10只;采用自由饮水方式染毒,低、中、高剂量染毒组饮水中亚砷酸钠浓度分别为2.4、12.0、60.0 mg/L,连续染毒15周,对照组饮用蒸馏水;染毒试验结束后,对各组大鼠进行精子计数,计算精子存活率;制备睾丸组织切片进行病理学观察;利用免疫组化及Western blotting法测定大鼠睾丸组织中AQP-8及survivin蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠精子计数与精子存活率均降低,且差异显著(P<0.05)。低剂量染毒组大鼠生精小管无明显变化;中剂量染毒组大鼠生精上皮层数减少,小管间隙增宽;高剂量染毒组大鼠部分生精小管出现基膜溶解,生精上皮细胞层次紊乱,细胞间隙增大,间质出现水肿、渗出。免疫组化分析结果显示,AQP-8蛋白主要表达于各级生精细胞的细胞膜和精子细胞,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中AQP-8阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)升高;survivin蛋白主要表达于次级精母细胞和精子细胞的胞浆,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中survivin阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)降低。Western blotting分析结果显示,对照组和各剂量染毒组大鼠睾丸组织中均存在AQP-8及survivin蛋白的表达;与对照组相比,低、中、高剂量染毒组AQP-8蛋白表达量显著(P=0)增加,survivin蛋白表达量显著(P=0)降低。[结论]砷暴露使睾丸组织AQP-8蛋白表达量增加,survivin蛋白表达量下降,这可能是导致其雄性生殖毒性效应的机制之一。

黄芪白术汤治疗脾虚型便秘患儿的效果及对水通道蛋白-8的影响

目的:分析黄芪白术汤治疗脾虚型便秘患儿的临床效果及对水通道蛋白-8(AQP-8)的影响。方法:将2020年1月-2021年6月于济南市儿童福利院就诊的60例脾虚型便秘患儿作为研究对象,根据随机数字表法分为对照组30例和研究组30例,对照组患儿给予乳果糖治疗,研究组患儿则在对照组基础上给予黄芪白术汤辨证治疗,并对两组患儿的临床疗效、治疗前后便秘症状变化及血清AQP-8变化、药物不良反应发生情况进行比较。结果:研究组患儿临床总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,研究组排便次数、排便时间、大便性质以及排便难度积分均明显低于对照组(P<0.05);治疗后,两组患儿血清AQP-8水平较治疗前有所降低,且研究组血清AQP-8水平低于对照组(P<0.05);两组患儿治疗过程中药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芪白术汤辨治小儿脾虚型便秘效果确切,可有效提高临床总有效率,改善临床便秘症状,降低患儿外周血AQP-8水平,且不会增加药物不良反应发生率,值得临床推广及应用。

黄芪白术汤辨治儿童脾虚型便秘的临床疗效及其机制研究

芪白术汤辨治儿童脾虚型便秘的临床疗效及其机制研究。方法 入我院于2022年5月至2023年5月间收治的130例脾虚型便秘患儿为本研究对象,根据患儿就诊日期奇偶性划分组别,对照组(n=65)疗法为乳果糖口服,观察组(n=65)疗法为乳果糖口服联合黄芪白术汤辨证加减治疗;分析两组患儿的临床疗效以及便秘症状积分、血清水通道蛋白-8(AQP-8)水平、结肠传输试验评分(CTT)变化情况、不良反应。结果 察组疗效达标患儿89.23%,对照组则为75.38%,差值有意义(P<0.05);经治疗后发现两组患儿的便秘症状积分、血清ZQP-8水平以及CTT评分均有改善,但同期数据组间对比可见,观察组便秘症状积分、血清AQP-8水平与CTT评分下降幅度明显大于对照组(P<0.05);在不良反应方面,观察组的7.69%与对照组的13.85%数据接近,统计学分析差值无意义(P>0.05)。结论 虚型便秘患儿给予黄芪白术汤辨证治疗可以改善血气水通道蛋白-8水平与结肠传输试验评分,帮助患儿更好的缓解、消除便秘症状,且不会增加不良反应风险,具有推广价值。

针刺眼针穴区与非穴区对D-IBS模型大鼠结肠组织VIP及AQP8表达的影响

目的:探讨眼针穴区的特异性及眼针疗法对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠40只,采用慢性应激结合束缚法建立D-IBS大鼠模型,随机分为正常组、模型组、穴区组和非穴区组。后3组先造模,穴区组针刺眼针"下焦区""大肠区""肝区""脾区";非穴区组选取同名眼针穴区外3mm处。模型组与正常组不予任何干预。测定各组大鼠粪便含水率;RT-PCR法检测各组大鼠结肠组织水通道蛋白8(AQP 8)的mRNA表达;SABC免疫组化法检测各组大鼠结肠组织血管活性肠肽(VIP)和AQP 8的蛋白表达。结果:与正常组比较,18d及25d时模型组、穴区组和非穴区组大鼠粪便含水率均明显增加(均P<0.01),结肠组织黏膜层、肌间神经丛和黏膜下神经丛VIP的蛋白表达水平均显著升高(均P<0.01),结肠AQP 8的mRNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),而模型组和非穴区组结肠黏膜层AQP 8蛋白表达明显减少(均P<0.01);与模型组比较,25d时穴区组大鼠粪便含水率明显减少(P<0.01),结肠组织VIP蛋白表达水平明显降低(P<0.05),结肠AQP 8的mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与穴区组比较,25d时非穴区组大鼠粪便含水率明显升高(P<0.01),VIP蛋白表达水平显著升高(均P<0.01),结肠AQP 8的mRNA及蛋白表达显著降低(均P<0.01)。结论:针刺眼针穴区能够有效治疗D-IBS,其可能的作用机制之一与上调结肠组织中AQP8并同时抑制VIP的表达有关。而针刺眼周非穴区部位则无明显疗效,从而说明眼针穴区部位具有相对特异性。

吲哚美辛对人羊膜上皮细胞水通道蛋白8表达的影响

目的探讨吲哚美辛对人羊膜上皮细胞水通道蛋白(Aquaporin,AQP)8表达的影响。方法原代培养人羊膜上皮细胞,采用免疫细胞化学法进行鉴定。将细胞分为实验组和对照组,实验组以不同浓度的吲哚美辛(10、20、50、100、200μmol/L)作用24 h,另以200μmol/L吲哚美辛分别作用6、12、24、36和48 h,以正常培养的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot检测各组细胞AQP 8 mRNA及蛋白的表达变化。结果除10μmol/L作用细胞外,其他浓度的吲哚美辛均可显著下调人羊膜上皮细胞AQP 8 mRNA及蛋白的表达(P<0.01),其中200μmol/L吲哚美辛作用组的表达水平最低;200μmol/L吲哚美辛作用的细胞,从作用12 h开始,AQP 8 mRNA和蛋白的表达水平均显著低于对照组(P<0.01),且呈时间依赖性,48 h时达最低。结论吲哚美辛可下调人羊膜上皮细胞AQP 8 mRNA和蛋白的表达。

水通道蛋白-8在羊水过少人胎盘、胎膜中的表达

目的了解水通道蛋白-8(aquaporin-8,AQP-8)在羊水过少人胎盘、胎膜中的表达。方法随机选择2008年12月至2009年1月在广东省深圳市福永医院妇产科行选择性剖宫产孕妇16例为研究对象,满足单胎、足月、无妊娠合并症、未临产、无胎儿窘迫及胎儿畸形条件。将产前超声监测羊水深度<8cm的孕妇纳入研究组(羊水过少组,n=6),其余孕妇纳入对照组(n=10)(本研究遵循的程序符合深圳市福永医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。两组患者年龄、妊娠情况及妊娠结局等比较,差异无显著意义(P>0.05)。采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物霉(streptavidin enzyme complex,SABC)法检测两组胎盘和胎膜组织标本中水通道蛋白-8表达水平。结果水通道蛋白-8在人胎盘及胎膜的羊膜上皮细胞均有表达,对照组胎膜中水通道蛋白-8表达明显低于研究组,且差异有显著意义(P<0.05)。结论水通道蛋白-8在人羊水过少的胎盘、胎膜中表达显著减少,提示水通道蛋白-8在母、胎液体交换及羊水膜内吸收途径中,可能发挥重要作用。