芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

润肠通便合剂对便秘模型小鼠结肠MUC2、AQP3的影响

目的:研究润肠通便合剂对便秘模型小鼠的治疗作用及对结肠黏蛋白(MUC2)、水通道蛋白(AQP3)表达的影响。方法:将小鼠分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组及润肠通便合剂高、中、低剂量组(40、20、10 ml/kg)(n=10),通过复方地芬诺酯(30 mg/kg灌胃1次或20 mg/kg灌胃14 d)来复制便秘动物模型,观测润肠通便合剂给药3 d对便秘小鼠排便、小肠推进的影响,给药14 d对便秘小鼠结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平,观测润肠通便合剂给药3 d或14 d对便秘小鼠排便、小肠推进、结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平的影响。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠给予30 mg/kg复方地芬诺酯1次后,小肠推进长度及推进率显著降低,首便时间延长,6 h排便粒数减少;给予20 mg/kg复方地芬诺酯14 d后,小鼠结肠出现明显病理学变化,CLAF中Muc2的含量降低,近端结肠AQP3的基因表达水平升高,结肠湿干重比值降低(P<0.01)。与模型对照组比较,给予润肠通便合剂能明显增加小肠推进长度及推进率,缩短首便时间,增加6 h排便粒数,改善便秘小鼠结肠病理学,提高CLAF中Muc2的含量,抑制近端结肠AQP3的基因表达,提高结肠湿干重比值(P<0.05, 0.01)。结论:润肠通便合剂可加速排便,改善结肠病理学,其中促进Muc2分泌、下调AQP3 mRMA表达而改善结肠水代谢是其通便的机制之一。

结直肠癌中AQP3的表达及其与临床预后的关系

目的探讨水通道蛋白-3(AQP3)的表达与结直肠癌临床病理及预后关系。方法收集术前未予化疗治疗的临床病例资料齐全的原发性结直肠癌病例,取癌组织、癌旁组织、正常组织各40例,采用免疫组化法检测AQP3的表达。比较AQP3表达与年龄、肿瘤大小、临床分期、肿瘤部位、淋巴结转移、病理类型之间的关系,并结合随访资料分析AQP3表达与否和预后的关系。结果 40个肿瘤标本中,11例(27.5%)AQP3高表达,28例(70.0%)中度表达,1例(2.5%)无AQP3染色。癌旁和正常组织中AQP3阳性表达分别为4例(10.0%)和2例(5.0%)。AQP3的表达还与TNM分期(P=0.007)、淋巴结转移(P=0.009)、远处转移(P=0.000)成正相关。在不同年龄、性别、组织学分级和肿瘤大小中AQP3表达没有显著性差异(P>0.05)。除此之外,AQP3阴性组比阳性组明显具有生存优势。结论 AQP3可能是预测结直肠癌预后的良好指标。

三仁汤对脾胃湿热证小鼠Aquaporin-3的影响

目的研究三仁汤对脾胃湿热证小鼠肾组织AQP3变化。方法将30只SPF级BACB/C小鼠随机分为正常对照组、脾胃湿热模型组、三仁汤治疗组,测量小鼠体温、体重,测定肾组织AQP3的水平,病理切片观察小鼠肾脏病理变化。结果与正常对照组相比,脾胃湿热模型组体温偏高,体重增长缓慢,AQP3含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),病理提示肾脏存在炎症损伤,三仁汤治疗组AQP3稍升高,与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),与脾胃湿热模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),病理提示三仁汤对肾脏的炎症损伤有修复作用。结论脾胃湿热证小鼠肾组织AQP3呈高表达状态,三仁汤能调节脾胃湿热证小鼠肾脏AQP3的表达,恢复机体正常的水液代谢平衡。

控制性超排卵明显降低小鼠卵母细胞水通道蛋白的表达

目的了解控制性超排卵(COH)对小鼠卵母细胞上表达水通道蛋白(AQP3)的影响。方法模拟人类超排卵周期,对小鼠进行超促排卵,按随机表顺序分为COH组和对照组,每组各10只ICR小鼠,用半定量实时荧光PCR方法检测小鼠MⅡ卵母细胞上AQP3mRNA的表达。结果卵母细胞膨胀实验显示,ICR小鼠卵母细胞上有AQP3的表达,用半定量实时荧光PCR方法检测时以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参照,COH组和对照组ΔCT值分别是0·65±0·23和2·49±0·05,ΔΔCT值是1·84±0·18,两组比较P<0·001,具有统计学意义。结论控制性超排卵(COH)明显降低了ICR小鼠卵母细胞上AQP3mRNA的表达,这也可能是导致卵母细胞低冻融复苏率低的原因之一。

地芝丸对D-半乳糖衰老小鼠表皮角蛋白K19、水通道蛋白AQP3及皮肤组织形态学结构的影响研究

目的:观察地芝丸对D-半乳糖衰老小鼠水通道蛋白AQP3、角蛋白K19、以及皮肤组织形态学结构的影响,探讨地芝丸延缓皮肤衰老的作用机制。方法:以D-半乳糖衰老小鼠为研究对象,测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,以及HE染色法观察各组小鼠皮肤组织形态学结构改变。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠皮肤AQP3的含量,免疫荧光法检测表皮角蛋白K19的表达。结果:与空白对照组比较,模型组皮肤表皮层和真皮层明显变薄;SOD、AQP3含量降低、K19表达下调、MDA含量升高。与模型组相比较,地芝丸剂量依赖地使SOD、AQP3明显增高,MDA降低,使VE组、地芝丸各组小鼠皮肤组织形态学结构有所改善,表皮层和真皮层厚度增厚,K19表达上调,尤以27.3 g/kg组最显著。结论:地芝丸通过改善皮肤组织形态学结构,促进D-半乳糖衰老小鼠表皮AQP3、K19的表达,起到延缓皮肤衰老作用。

大鵟肾脏组织结构及相关活性物质的表达

应用生物显微技术及免疫组织化学方法,对大鵟肾脏的组织结构进行观察,检测了AQP2、AQP3和Bax、Bcl-2蛋白在肾脏中的表达。结果表明,大鵟肾脏红褐色,表面覆以极薄的结缔组织膜,无肾脂囊。相对体积比哺乳类大,占体重的2.1%。肾小球毛细血管分支少,结构简单。但是肾小球单位面积上的数目比哺乳类多,这对于在旺盛的新陈代谢过程中,迅速排除废物、保持水盐平衡是有利的。集合管是尿重吸收的重要部位,上皮细胞有AQP2、AQP3免疫反应阳性表达,提示AQP2和AQP3对大鵟肾脏水的平衡有重要的调节作用。近曲小管上皮细胞有Bax和Bcl-2免疫反应阳性表达,说明Bax和Bcl-2的协同表达参与正常大鵟肾脏细胞凋亡的调控。

益气滋阴汤治疗慢传输型便秘大鼠的实验研究

目的:观察益气滋阴汤治疗慢传输型便秘模型大鼠的疗效,以及对大鼠结肠组织VIP、AQP3蛋白表达和c-kit mRNA表达的影响。方法:60只SD大鼠随机取15只为空白组,其余45只造模成功后随机分为益气滋阴汤组、莫沙必利对照组、模型组,每组15只。空白组、模型组采用生理盐水灌胃,益气滋阴汤组、莫沙必利对照组分别采用相应的药物治疗。治疗结束后观察各组大鼠粪便数量、含水比,检测大鼠结肠组织中VIP、AQP3蛋白表达及c-kit mRNA的表达强度。结果:模型组大鼠粪便数量及结肠组织中c-kit mRNA表达水平明显低于空白组,VIP、AQP3蛋白水平明显高于空白组,差异均有统计学意义(P<0.05)。益气滋阴汤组及莫沙必利对照组大鼠治疗后粪便数量及结肠组织中c-kit mRNA表达水平均高于模型组,VIP、AQP3蛋白水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。益气滋阴汤组大鼠粪便数量及含水比,结肠组织中VIP、AQP3蛋白表达水平及c-kit mRNA表达水与莫沙必利对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:VIP、AQP3蛋白水平升高,c-kit mRNA表达水平降低可能参与了慢传输型便秘的发病过程。益气滋阴汤可能通过降低VIP、AQP3蛋白表达,升高ckit mRNA表达水平,起到治疗慢传输型便秘的作用。

高脂血症大鼠AQP3和AQP4表达及泽泻汤加味方干预作用

目的观察泽泻汤加味方对高脂血症大鼠血脂及结肠组织水通道蛋白3和4(AQP3、AQP4)基因、蛋白表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组(辛伐他汀)及泽泻汤加味方高、中、低剂量组,采用喂饲高脂饲料方法复制大鼠模型,造模同时给予相应药物干预,连续5周;观察大鼠血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量变化,运用RT-PCR、Western blot方法检测大鼠结肠组织中AQP3和AQP4基因、蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量[分别为(2.183±0.204)、(2.013±0.250)、(1.267±0.087)mmol/L]升高,HDL-C含量[(0.731±0.085)mmol/L]降低(P <0.05);与模型组比较,高剂量泽泻汤加味方组大鼠血清中TG、TC、LDL-C含量[分别为(1.205±0.139)、(1.164±0.197)、(0.787±0.057)mmol/L]下降,HDL-C含量[(0.904±0.115)mmol/L]升高(P <0.05)。与对照组比较,模型组大鼠结肠组织中AQP3和AQP4蛋白表达水平[分别为(0.944±0.052)、(0.701±0.067)]升高(P <0.01);与模型组比较,高剂量泽泻汤加味方组大鼠结肠组织中AQP3和AQP4蛋白表达水平[(0.502±0.085)、(0.366±0.061)]均降低,呈剂量效应关系(P <0.05)。结论泽泻汤加味方具有调节血脂作用,其机制可能与结肠组织AQP3和AQP4蛋白表达调控有关。

桑叶水提物改善肠肌运动及缓解便秘的作用

目的:研究桑叶水提物对豚鼠离体回肠收缩活动及对便秘大鼠的影响,探讨其改善便秘的作用及相关机制。方法:通过离体肠肌张力测定手段,观察桑叶水提物对豚鼠离体回肠运动的影响。采用洛哌丁胺(10 mg/kg/d)构建3 d及7 d便秘大鼠模型,并以桑叶水提物(5 g/kg/d)同期灌胃给药进行干预,观察大鼠第一白便时间、24 h粪便粒数和小肠推进率等,以及卡巴胆碱(carbachol,CCh)诱发各组大鼠回肠收缩反应的情况;通过石蜡切片HE染色观察大鼠结肠组织形态学变化,免疫组化检测结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)的表达。结果:桑叶水提物能促进豚鼠回肠的自主运动,表现为收缩幅度增强,平均张力升高。桑叶水提物对造模3 d和造膜7 d大鼠的第一白便时间、24 h粪便粒数(造模7 d,P<0.05)及小肠推进率(造模7 d,P<0.05)等指标均有不同程度改善;桑叶水提物明显改善卡巴胆碱诱发的便秘大鼠离体回肠平均张力的降低(P<0.05);桑叶水提物对洛哌丁胺引起的大鼠结肠组织肌层变薄有改善作用,并显著降低洛哌丁胺引起的结肠AQP3表达的增加(P<0.05)。结论:桑叶水提物明显促进豚鼠回肠运动,并可能通过降低AQP3的表达,抑制结肠水分过度吸收,使粪便含水量增加,促进肠肌运动而改善便秘。

中药双向发酵液制备及其抗衰老、保湿、美白功效研究

通过对中国灵芝、铁皮石斛、黄精、晚香玉进行双向发酵工艺优化,筛选制备出最优发酵液,利用不同质量分数中药双向发酵液对体外抑制蛋白质非酶糖基化、酪氨酸酶活性抑制、水通道蛋白Aquaporin3(AQP3)含量、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、小鼠黑素B16-F10细胞黑色素含量进行测定。研究结果发现,中药双向发酵液能够显著抑制蛋白质非酶糖基化、酪氨酸酶活性、小鼠B16-F10细胞黑色素含量(P<0.05),并且能够显著清除DPPH和ABTS自由基,促进角质形成细胞AQP3蛋白表达(P<0.01),这为化妆品原料的开发提供了新的方向和数据依据。

归芪白术方联合奥沙利铂通过调节VIP/cAMP/PKA/AQPs信号通路保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障

目的:探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽(VIP)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路调控下游水通道蛋白3(AQP3)和水通道蛋白4(AQP4)从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法:将密度为1×10^(7)个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液,经荷瘤小鼠右腋下接种细胞悬液0.2 mL,构建胃癌荷瘤小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为5组,模型组、奥沙利铂组(10mg·kg^(-1))、奥沙利铂加归芪白术方高、中、低剂量组(17.68、8.84、4.42 g·kg^(-1)),每组10只,另外余10只作为空白组。各组小鼠经灌胃或腹腔注射中药、奥沙利铂或生理盐水,治疗14 d。末次给药后,次日眼球取血分离血清并取其结肠样本。苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态的变化。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组小鼠结肠组织中VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组黏膜下层水肿,黏膜层中肠腺排列紊乱,杯状细胞缺失,可见大量炎性细胞浸润及绒毛脱落的现象。而各给药组均有不同程度的改善;与正常组比较,模型组血清中DAO和D-LA水平均显著上升(P<0.01),与模型组比较,联合用药高剂量组DAO和D-LA水平及联合用药中剂量组D-LA水平均有所下降(P<0.05,P<0.01),与奥沙利铂组比较,联合用药高、中剂量组D-LA水平有所下降(P<0.05),其余组DAO和D-LA表达水平也有所下降,但差异无统计学意义;与正常组比较,模型组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平均有所升高,其中联合用药高剂量组VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),联合用药中剂量组cAMP蛋白表达水平升高(P<0.05);与奥沙利铂组比较,联合用药高剂量组cAMP蛋白表达水平明显升高(P<0.05),其余组mRNA及蛋白表达也有所升高,但差异无统计学意义。结论:归芪白术方联合奥沙利铂通过VIP/cAMP/PKA信号通路调节AQP3和AQP4达到保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。

GIL血型抗原的研究进展

GIL血型抗原在2002年由国际输血协会（ISBT）确认为独立的系统抗原,编号为029,命名为GIL。该系统只有1个抗原,抗原命名为GIL1,编号为029001。至今只有很少的篇幅报道该抗原,是目前我们已知的36个红细胞血型抗原系统、308个系统抗原中认知较少的一个系统抗原。但该抗原却是一个可以引起输血性溶血反应和新生儿溶血病有临床意义的抗原。本文就该抗原的最新研究进展,综述如下。