分析方法质量源于设计(AQbD)用于疫苗质控和评价进展

分析方法是生物制品质量控制的基础,准确可靠的分析方法能够提升标准制定的科学性。生物制品分析方法具有变异大的特点,更加凸显了对分析方法质量控制的要求。分析方法质量源于设计(analytical quality by design,AQbD)为质量源于设计(quality by design,QbD)在分析方法生命周期管理中的应用。近年随着分析方法开发的相关法规文件不断推出,AQbD已用在药品包括疫苗的分析方法中,主要通过分析目标概要(analytical target profile,ATP)设定、风险分析、实验设计(design of experiment,DOE)和方法验证来获得符合ATP要求的准确度、精密度和专属性等指标,并明确容忍区间、预测区间、方法总变异、方法能力指数和方法误判率等能力指标,为疫苗分析方法的开发和评价提供支持。本文介绍AQbD国内外相关法规文件及其在疫苗中的应用进展,推动AQbD用于我国疫苗质控和评价。

基于AQbD理念的吡罗昔康凝胶体外释放研究

目的基于分析方法质量源于设计(AQbD)理念,建立并优化吡罗昔康凝胶体外释放实验(IVRT)。方法建立分析目标、确定关键分析属性[体外释放速率(IVRR)、初始采样时间累积释放量(Q0)、释放度];基于先前的知识与经验,从分析目标中推导出有影响的方法变量,并利用石川图进行系统总结,对影响的变量进行风险等级评估,筛选出关键方法变量(膜的种类、释放介质的种类、上样量);对2种上样量(150、300 mg)、3种释放介质(0.9%NaCl溶液、pH 5.5的磷酸盐缓冲液和pH 7.2的磷酸盐缓冲液)和3种膜[混合纤维素膜(MCE)、聚醚砜膜(PES)、聚四氟乙烯膜(PTFE)]进行2×3×3全析因实验设计,采用扩散池法进行IVRT,将各时间点样品进行HPLC定量分析,进一步计算Q0、释放度和IVRR。利用JMP Pro软件对实验结果进行建模分析,筛选最优参数。参考美国食品药品监督管理局(FDA)、欧洲药品管理局(EMA)要求对建立的IVRT进行膜惰性验证,释放介质验证,线性、精密度和重复性考察,敏感性和特异性考察及耐用性考察。结果吡罗昔康凝胶IVRT采用静态垂直扩散池(扩散面积1.767 cm^(2),接收池体积12 mL),温度32℃,转速600 r·min^(−1),释放介质为pH7.2磷酸盐缓冲液、膜为MCE、上样量为300 mg,取样时间为0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 h,取样方式为全部取样。方法学验证均符合要求。结论所建立的吡罗昔康凝胶IVRT可靠、耐用、具有区分力。

培植牛黄中7种胆汁酸类成分含量测定方法的建立及验证

目的:基于分析方法质量源于设计理念,建立与优化同时测定培植牛黄中7种胆汁酸含量分析方法。方法:应用Plackett-Burman和全析因设计筛选和优化色谱参数;应用设计空间确定关键色谱参数的最优值和控制范围。最后,对所建立的分析方法进行方法学验证。结果:设计空间确定关键色谱参数范围和最优值:柱温可接受范围:30~40℃,最优值35℃;乙腈初始浓度范围可接受范围:38.8%~41.6%,最优值40%;乙腈终点浓度可接受范围:61.3%~64.60%,最优值63%。方法学验证各项指标均合要求。鹅去氧胆酸、去氧胆酸、牛黄脱氧胆酸钠、甘氨胆酸钠、甘氨脱氧胆酸钠的相对校正因子分别为1.15、1.19、1.29、1.54、1.49。结论:所建立的胆汁酸含量测定分析方法准确稳定,可用于同时测定培植牛黄中7种胆汁酸的含量。

新型冠状病毒Omicron XBB.1.5中和抗体检测方法的建立

目的依据全球最新的分析方法质量源于设计(Analysis Quality by Design,AQbD)和全生命周期理念,建立适用于新型冠状病毒Omicrion XBB.1.5变异株的临床中和抗体和流行病学调查用中和抗体检测方法。方法在已建立的新型冠状病毒原型株中和抗体(CPE法)检测方法的基础上,针对XBB.1.5变异株变更对中和抗体检测方法可能引入的影响因素进行风险评估,对主要风险因素进行条件优化,获得适应XBB.1.5变异株的检测方法,经方法验证明确该方法各项性能指标,并证明方法可满足分析目标概要(Analysis Target Profile,ATP)。结果由XBB.1.5变异株变更引入的主要风险因素为检测细胞、培养基种类和结果判定时间;通过对实验条件优化,最终确定将Vero-E6细胞(DMEM培养基)作为XBB.1.5变异株的最佳培养条件,第5天作为最佳观察时间;经验证得到方法相对准确度和中间精密度的平均相对偏倚为-9.2%~2.9%、几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)为33.2%~47.1%,满足方法预设ATP,方法误判率低于1.6%。结论依据AQbD和全生命周期的研究理念建立了针对新型冠状病毒XBB.1.5变异株的中和抗体检测方法,经验证该方法满足预设ATP,可用于临床中和抗体和流行病学调查用中和抗体检测。

质量源于设计(QbD)在药物分析方法开发中的应用研究进展

质量源于设计(quality by design,QbD)是一种始于预先定义的目标,采用科学和风险管理的方法来增加对产品和过程的理解并用于过程质量控制的系统方法。QbD主要用于制药工艺开发过程,但其核心思想与分析方法开发过程具有相通之处,因而分析方法质量源于设计(analytical quality by design,AQbD)应运而生。应用AQbD时,需首先定义分析方法目标(analytical target profile,ATP),并根据目标对关键方法属性(critical method attributes,CMAs)和关键方法参数(critical method parameters,CMPs)进行全面评估,结合实验设计(design of experiment,DOE)和统计分析建立分析方法设计空间(design space,DS),并基于设计空间制定方法控制策略(control strategy),通过系统化、结构化、层层递进的方式建立分析方法,以提高分析结果的准确性和可靠性。目前,AQbD已应用于HPLC、UPLC、CE、ELISA、UPLC-MS、LC-MS/MS和GC-MS/MS等分析方法的开发过程。本文综述了AQbD基本组成部分、实施路径、在分析方法开发中的应用和未来发展趋势,以期对药物分析和药品质量控制工作提供借鉴。

应用质量源于设计提升我国疫苗研发水平的思考

目前,药品质量管理模式已从“检验控制质量”和“生产控制质量”模式发展为“设计控制质量”模式,强调风险评估、过程控制及持续监测和改进在生产过程中的应用。质量源于设计(Quality by Design,QbD)的理念在治疗性单克隆抗体领域应用较多,但在其他生物制品,特别是疫苗类产品中应用较少,这与疫苗结构复杂、工艺较为传统及质控方法变异度较大等因素有关。加快QbD理念和框架在我国疫苗行业的实施,对提升我国疫苗特别是新型疫苗的质量、安全性和有效性具有重要意义。本文对QbD在疫苗研发中的应用进展作一综述,并分析存在的问题和挑战,以期推动QbD理念在疫苗行业的应用,为进一步提升我国疫苗研发和质控水平提供参考。