miR-423-5p靶向水通道蛋白1对雨蛙肽诱导的急性胰腺炎AR42J细胞损伤的影响

目的:研究miR-423-5p对雨蛙肽诱导的胰腺AR42J细胞损伤的影响及其分子作用机制。方法:通过雨蛙肽处理AR42J细胞建立胰腺炎损伤模型,qRT-PCR检测AR42J细胞中miR-423-5p的表达,Western blot检测水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达,ELISA法检测培养上清中IL-6和TNF-α的分泌水平,流式细胞术测定细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-423-5p与AQP1间的调控关系。结果:在雨蛙肽诱导的AR42J细胞中miR-423-5p表达上调,AQP1表达下调;抑制miR-423-5p和过表达AQP1均可减轻雨蛙肽诱导的AR42J细胞损伤,抑制细胞凋亡;双荧光素酶报告系统结果显示miR-423-5p靶向负调控AQP1的表达;抑制AQP1逆转了抑制miR-423-5p对雨蛙肽诱导的胰腺AR42J细胞损伤的作用。结论:miR-423-5p通过靶向AQP1减轻雨蛙肽诱导的胰腺AR42J细胞损伤,抑制细胞凋亡。

不同胆汁酸诱导AR42J细胞凋亡与坏死的作用

目的:探讨7种不同胆汁酸对AR42J胰腺腺泡细胞的损伤作用,检测在各种胆汁酸作用下胰腺腺泡细胞的存活率和凋亡/坏死的改变.方法:以大鼠AR42J胰腺腺泡细胞系为研究对象,应用MTT法检测7种不同胆汁酸对细胞存活率的影响和剂量与时间依赖性,采用光学显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变与凋亡/坏死的变化,流式细胞术AV/PI双染法检测细胞的凋亡/坏死率.结果:CA,GCA和GDCA在0.1-1.0mmol/L内对AR42J细胞不具有损伤作用;而DCACDCA和LCA分别从0.3mmol/L开始,TDCA从0.4mmol/L开始,呈剂量依赖性对AR42J细胞产生损伤作用.0.8mmol/LCA组细胞凋亡率与坏死率同CON组无明显区别(1.2%vs0.9%;1.0%vs1.0%,均P>0.05);0.4mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为45.2%和8.9%;0.8mmol/LDCA组细胞凋亡率和坏死率分别为18.6%和45.4%.