Rho蛋白鸟苷酸交换因子11基因R1467H多态性与多囊卵巢综合征的相关性研究

目的研究Rho蛋白鸟苷酸交换因子11(ARHGEF11)基因R1467H多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)及其胰岛素抵抗(IR)的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对136例PCOS患者和117名健康对照者ARHGEF11基因R1467H位点进行基因分型;同时进行人体测量学和代谢指标的检测。结果在PCOS组和对照组中,ARHGEF11基因R1467H位点的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05);PCOS组GA/AA基因型的空腹胰岛素和HOMA2-IR水平明显高于GG基因型(P<0.05),对照组GA/AA基因型的空腹血糖显著高于GG基因型(P<0.05),这种统计学差异经年龄、体质量指数校正后依然存在(P<0.05)。结论 ARHGEF11基因R1467H多态性与PCOS的发病无关,但可能与PCOS患者IR抵抗有关。

鸟苷酸交换因子C3G过表达对高糖诱导心肌细胞H9C2凋亡的影响及机制

目的观察鸟苷酸交换因子C3G过表达对高糖诱导心肌细胞H9C2凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法将对数生长期的心肌细胞随机分为2组,每组备3份,分别用空白试剂、阴性病毒、过表达C3G慢病毒感染24 h,将上述其中一组培养基置换为含5. 5 mmol/L D-葡萄糖的培养基,标记为空白组、阴性病毒组、过表达C3G组;另一组培养基置换为含33. 3 mmol/L D-葡萄糖的培养基,标记为空白+高糖组、阴性病毒+高糖组、过表达C3G+高糖组;采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中C3G、接头蛋白L(Crk L)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)表达。结果与空白组、阴性病毒组比较,过表达C3G组细胞凋亡率降低,而空白+高糖组、阴性病毒+高糖组细胞凋亡率增加(P均<0. 05);与空白+高糖组、阴性病毒+高糖组比较,过表达C3G+高糖组细胞凋亡率降低(P均<0. 05)。与空白组、阴性病毒组比较,过表达C3G组C3G、p-ERK1/2蛋白表达均增加(P均<0. 05)而Crk L蛋白表达无差异,空白+高糖组、阴性病毒+高糖组C3G、p-ERK1/2和Crk L蛋白表达降低(P均<0. 05);与空白+高糖组、阴性病毒+高糖组比较,过表达C3G+高糖组C3G、p-ERK1/2蛋白表达均增加(P均<0. 05),而Crk L蛋白表达差异无统计学意义。结论 C3G过表达可显著抑制高糖诱导的心肌细胞H9C2凋亡,其作用机制可能与上调p-ERK1/2蛋白表达有关。

植物的内吞循环与ARF小G蛋白调节因子的研究进展

ARF小G蛋白鸟苷酸交换因子(ARF guanine nucleotide exchange factor,简称ARF-GEF)是一类在植物的器官发育、形态建成及信号感知方面发挥着不可或缺的作用的小G蛋白调节因子.这类蛋白在真核生物中普遍存在并且进化保守.关于ARF-GEF的研究越来越多并成为发育生物学领域的一个研究热点.在67篇文献基础上,比较了ARF-GEF在动物、植物以及酵母中的不同亚细胞定位,分析了不同ARF-GEF亚家族蛋白之间的进化关系,并总结了其在囊泡运输系统中的功能机制,为国内科研工作者进行这一领域的研究提供参考.

非肝炎病毒相关性肝细胞癌组织中鸟苷酸交换因子ECT2的表达变化及其意义

目的观察非肝炎病毒相关性肝细胞癌(以下简称肝癌)组织中鸟苷酸交换因子ECT2的表达变化,探讨其与肝癌患者临床病理特征的关系。方法 78例非肝炎病毒相关性肝癌手术切除标本,同时每例患者另取癌旁组织标本作为对照。采用免疫组织化学染色法检测肝癌及其癌旁组织中的ECT2蛋白,RT-PCR检测ECT2 mRNA,比较不同临床病理参数肝癌患者ECT2蛋白表达阳性例数。结果非肝炎病毒相关性肝癌及其癌旁组织ECT2蛋白表达阳性率分别为71. 8%(56/78)、38. 5%(30/78),ECT2 mRNA相对表达量分别为0. 53±0. 05、0. 38±0. 09,两者比较P均<0. 05。肝癌患者低肿瘤分化者、肿瘤直径≥5 cm者、甲胎蛋白水平≥100 ng/m L者、有微血管癌栓者均较中高肿瘤分化者、肿瘤直径<5 cm者、甲胎蛋白水平<100 ng/m L者、无微血管癌栓者ECT2蛋白表达阳性例数多(P均<0. 05)。结论非肝炎病毒相关性肝癌组织中ECT2表达高,ECT2蛋白表达可能与肝癌的复发、转移有关。

RABGEF1蛋白在卵巢肿瘤中的表达

目的探讨RAB鸟苷酸交换因子1（RABGEFl）蛋白在卵巢恶性肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达水平。方法应用免疫组织化学技术检测46例卵巢恶性肿瘤、21例卵巢良性肿瘤及15例正常卵巢组织中RABGEFl蛋白的表达水平。结果RABGEFl蛋白在卵巢恶性肿瘤中的阳性表达率为7l_7％，在卵巢良性肿瘤中的阳性表达率为38．1％，在正常卵巢组织中未检测到RABGEFl蛋白的表达；RABGEFl蛋白在卵巢恶性肿瘤中的表达率显著高于良性肿瘤（矿一6．87，P一0．0087）。结论RABGEFl蛋白可能参与卵巢肿瘤的发生及发展，卵巢组织中RABGEFl蛋白的表达检测或许有助于卵巢肿瘤的辅助诊断。

大鼠非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预

目的:探讨非梗死区心肌C3G蛋白的表达及苯肾上腺素对其的干预。方法:选择雄性SD大鼠32只。按Litwin方法建立心肌梗死(简称心梗)及假手术模型。术后3天仍存活的雄性SD大鼠分为假手术组、心梗组、假手术苯肾上腺素组和心梗苯肾上腺素组(各组n=8)。假手术组及心梗组给予生理盐水1ml/(kg.d),假手术苯肾上腺素组及心梗苯肾上腺素组给予苯肾上腺素0.65mg/(kg.d),腹腔注射,至干预后8周。干预后应用免疫印迹法检测非梗死区心肌C3G蛋白的表达。结果:干预后12周,非梗死区心肌C3G蛋白表达积分光密度值(免疫印迹)分别为:假手术组(0.33±0.06),心梗组(0.81±0.05),假手术苯肾上腺素组(0.40±0.06),心梗苯肾上腺素组(0.62±0.07)。与假手术组比较,心梗组、心梗苯肾上腺素组非梗死区心肌C3G蛋白表达均增加,差异均有统计学意义(P<0.05);心梗苯肾上腺素组较心梗组非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而假手术苯肾上腺素组较假手术组非梗死区心肌C3G蛋白表达差异无统计学意义。结论:非梗死区心肌C3G蛋白的表达显著增加,而苯肾上腺素可显著调低其表达,提示C3G蛋白与梗死后心室重塑有关。

GEFs与小分子G蛋白的作用机制

G蛋白在细胞的许多生理过程中都发挥了极其重要的作用,包括细胞生长、分化、小泡中介的胞内运输,以及细胞骨架的组成等,哺乳类的小分子G蛋白家族有60多个成员,它们可根据功能与氨基酸序列的不同分为Ras,Rho,Rab,Arf,Ran等亚家族。 调节小分子G蛋白的酶有两类,GTPase活化蛋白(GAPs)加快GTP水解为GDP,而鸟苷酸交换因子(GEFs)催化GDP与小分子G蛋白脱离,使G蛋白变构而更利于与GTP结合,从而达到活化状态。这里我们主要介绍GEFs。近年的研究已逐渐弄清了GEFs调节小分子G蛋白的机制,即通过占据GTPase的Mg^(2+)

鸟苷酸交换因子Vav1通过结合钙调素蛋白对T淋巴细胞钙信号进行调节

T淋巴细胞钙信号的活化能够调节核转录因子NFAT（nuclear factor of activated T cells）的活性，并控制IL-2等重要蛋白因子的表达，对T淋巴细胞的发育和功能具有重要意义．Vav1是一类在造血细胞中表达的鸟苷酸交换因子，能够控制细胞骨架重排以及T细胞的活化．研究表明，Vav1能够对T细胞受体（T cell receptor,TCR）介导的细胞钙信号传导进行调节．

C3G在卵巢癌组织中的表达及其在SKOV3细胞增殖中的作用

目的探讨鸟苷酸交换因子C3G(Crk SH3-domain-binding guanine nucleotide-releasing factor)在卵巢癌组织中的表达及在卵巢癌SKOV3细胞增殖中的作用。方法采用Western blot检测比较40例卵巢癌、8例卵巢良性肿瘤及4例正常卵巢组织中C3G的表达水平。应用特异性siRNA下调SKOV3细胞中C3G的表达,通过MTT法和平板克隆实验检测细胞增殖,建立裸鼠皮下种植瘤模型观察移植瘤生长情况。结果卵巢癌组织中C3G的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,其在卵巢癌、卵巢良性肿瘤分别是正常卵巢组织中的(1.832±0.200)(P<0.05)、(0.893±0.147)倍。siRNA干扰可使SKOV3细胞中内源性C3G的表达下调79.2%;与野生型细胞组、阴性对照组及空载体对照组相比,C3G干扰组细胞增殖变慢(P<0.05),克隆形成率下降(P<0.05),移植瘤的平均体积和质量显著下降(P<0.05)。结论鸟苷酸交换因子C3G在大多数上皮性卵巢癌中过表达,并促进卵巢癌细胞增殖。

稻瘟菌Cdc42若干推测互作蛋白的结构和表达特点

目的已有研究表明稻瘟菌Cdc42(MgCdc42)与酵母Cdc42(ScCdc42)高度同源,参与调控其形态分化和侵染过程,通过分析可能的MgCdc42互作蛋白,以明确这些蛋白结构和功能。方法用ScCdc42互作蛋白经BLAST搜索获得了稻瘟菌基因组中的相应同源物,分析了这些同源物的结构,并通过半定量RT-PCR分析MgCdc42不同突变情况下这些可能的调控蛋白及效应蛋白的表达情况。结果MgCdc42正显性突变后,导致所有推测互作蛋白表达量均有所提高;MgCdc42负显性突变,除MgBem1、Chm1、MgGic1表达量未见明显变化外,其余表达量均有所降低;当MgCdc42失活后,所有可能的MgCdc42调控蛋白及效应蛋白之表达量均有所降低。结论稻瘟菌可能存在酵母Cdc42相似的信号途径,MgCdc42在其中起着重要的调控作用。

植物生长素极性运输调控机理的研究进展

生长素极性运输特异地调控植物器官发生、发育和向性反应等生理过程。本文综述和分析了生长素极性运输的调控机制。分子遗传和生理学研究证明极性运输这一过程是由生长素输入载体和输出载体活性控制的。小G蛋白ARF附属蛋白GEF和GAP分别调控输出载体(PIN1)和输入载体(AUX1)的定位和活性,并影响高尔基体等介导的细胞囊泡运输系统,小G蛋白ROP也参与输出载体PIN2活性的调节。本文基于作者的研究工作提出小G蛋白在调控生长素极性运输中的可能作用模式。

小G蛋白Ran的研究进展

真核细胞中含量最丰富的小G蛋白Ran(Ras relatednuclearprotein) ,具有与其所属的Ras家族其它成员不同的生化特点。其活性主要受到Ran的鸟苷酸交换因子 (RanGEF)RCC1(regulatorofchromosomecondensation 1) ,GTP酶激活蛋白 (GTPase activatingprotein ,GAP)以及Ran结合蛋白 (Ranbindingprotein ,RanBP)的调节。Ran主要参与了物质的核浆转运 ,此外在RNA出核、RNA合成、加工及细胞周期调控中也起到一定作用 ,并且是LPS活化基因的产物。

靶向Rho通路的抗高血压治疗策略研究进展

在过去几十年中,高血压的患病率呈逐年上升趋势。它不但增加左心室肥厚、心绞痛、心肌梗死和心力衰竭等心血管疾病的患病风险,还可能导致卒中(中风)、肾衰竭等相关后遗症。尽管目前有多种降压方案可供选择,但经过药物治疗后,只有半数患者可有效控制血压,这意味着需要进一步了解潜在的致病因素并寻求更有效的治疗方法。然而血压稳态非常复杂,涉及多个系统的综合控制,其中平滑肌收缩力和动脉阻力是重要因素。来自临床前动物模型和全基因组关联研究的有力证据表明,平滑肌收缩和血压稳态受小分子GTP酶RhoA及其下游靶点Rho激酶控制。本文总结了平滑肌细胞中对RhoA活性进行严格控制的信号通路及调节器的相关进展,并讨论了当前针对这些RhoA通路成分的高血压治疗策略。还讨论了RhoA通路中已知的等位基因变异,并介绍了这些遗传多态性对高血压遗传风险的影响及其临床表现。

KNDC1功能的研究进展

激酶非催化C-叶结构域蛋白( KNDC)1又称V-KNDC1 ( KIND )、RASGEF2、C10 orf23、Very-KIND、bB439 H18. 3 ,是近年来发现的新基因,在脑的不同区域表达水平不同,尤其在小脑颗粒细胞中表达最高〔1〕.其在许多信号传导通路的蛋白间分子识别和功能调控中扮演重要角色〔2〕.研究表明, KNDC1与神经元树突的生长、人脐静脉内皮细胞( HUVEC)的衰老及纤维核心蛋白的修饰有关,有望成为新的研究热点.本文将 KNDC1 这一新调控因子的结构特点与其功能作用及其机制进行综述.

CARMA3调控NF-κB信号通路激活的研究进展

含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白3(caspase recruitment domain and membrane-associated guanylate kinase-like domain protein 3,CARMA3)属于CARMA家族,是一个新型的骨架蛋白。CARMA3通过调控NF-κB信号通路的激活,影响细胞的周期进程、增殖和信号转导,从而影响癌症的发生和细胞应答。论文介绍了NF-κB信号通路的激活过程、G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)的配体、DNA损伤和感染可激活CARMA3介导的NF-κB信号通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的活性水平受CARMA3介导的NF-κB信号通路的影响、A20负调控CARMA3介导的NF-κB信号通路,以及CARMA3与癌症发生的关联,旨在为基于NF-κB信号通路的细胞周期进程、增殖和细胞应答方面的研究提供参考。

cAMP的传感器Epac2是磺脲类降糖药的一个直接作用靶点

Epac2,作为鸟嘌呤核苷酸的小分子G蛋白Rap1的交换因子,被腺苷3＇,5＇-单磷酸激活。通过荧光共振能量转移和结合实验表明,被广泛应用的磺脲类降糖药物,能够直接作用于Epac2。磺脲类通过Epac2活化Rap1。