Rho GTP酶激活蛋白9基因在急性髓细胞白血病中的作用机制

目的研究Rho GTP酶激活蛋白9(ARHGAP9)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的作用机制。方法收集2016年1月至2018年12月在新乡医学院第一附属医院初诊的52例AML患者和48例健康者的骨髓液或外周血样本,分离骨髓液或外周血细胞,提取总RNA,用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测AML患者和健康者样本中ARHGAP9基因的表达水平;用ARHGAP9小干扰RNA转染AML细胞系SKNO-1、Kassumi-1细胞后,采用CCK-8法检测第0、24、48、72 h细胞增殖情况;分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的AML和其他肿瘤的基因表达数据及临床数据,探讨ARHGAP9基因表达与预后的关系,基因集富集分析挖掘ARHGAP9基因的生物学功能与机制。结果AML患者样本中ARHGAP9基因表达水平较健康者升高(P<0.05),而且其高表达与不良预后相关(P<0.05)。在其他多种肿瘤如多形性胶质母细胞瘤、脑胶质瘤、肾嫌色细胞癌和葡萄膜黑色素瘤中,ARHGAP9基因的表达水平与患者的生存率呈负相关(P<0.05)。在AML患者临床样本中也发现ARHGAP9基因表达水平高于健康对照组(P<0.05)。对TCGA数据库中的AML数据进行分析,结果发现ARHGAP9基因低表达与FAB-M3、FAB-M5相关(P<0.001,P=0.029);高表达与FAB-M1相关(P=0.047)。在细胞遗传学方面,ARHGAP9基因的高表达与正常核型及复杂核型相关(P=0.045,P=0.038)。在预后分层方面,ARHGAP9基因的低表达与良好预后相关,ARHGAP9基因的高表达与中等预后相关。体外ARHGAP9小干扰RNA转染AML细胞系SKNO-1、Kassumi-1细胞后,ARHGAP9基因表达水平下降,细胞增殖受到抑制。基因集富集分析发现ARHGAP9基因与AML患者的细胞与细胞黏附、白细胞增殖、移动、分化等生物学功能呈正相关,与MAPK、VEGF、NOTCH、JAK-STAT信号通路呈正相关。结论ARHGAP9基因是AML患者的不良预后标志,可以作为AML靶向治疗的潜在靶点。