异甘草素通过Smad3/Arid2-IR/NF-κB轴改善顺铂诱导的急性肾损伤小鼠炎症反应

目的研究异甘草素(ISO)对顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠的作用并探讨潜在调控机制。方法 30只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组(NC组),模型组(AKI组),异甘草素药物低剂量(ISO-L)和高剂量(ISO-H)处理组,厄贝沙坦阳性对照组(Irb组)。通过单次腹腔注射顺铂(20 mg/kg)建立AKI模型。在干预过程中,NC组和AKI组予以生理盐水,而ISO-L组和ISO-H组分别予以异甘草素7. 5 mg/kg、30 mg/kg,Irb组予以20 mg/kg厄贝沙坦,药物灌胃3 d后处死小鼠,收集血清检测肌酐、尿素氮,HE和PAS染色检测肾病理改变,免疫组化和免疫印迹法检测炎症关键因子(IL-6、IL-1β)和Smad3、NF-κB等关键蛋白活性,Real-time PCR检测炎症因子和长链非编码Arid2-IR改变情况。结果与AKI组比,异甘草素干预能明显改善小鼠肌酐和尿素氮(P <0. 05),且呈浓度依赖性调节;病理染色结果显示药物干预后肾炎性细胞浸润减少,肾损伤明显改善;而炎症因子、Smad3、NF-κB活性和长链非编码Arid2-IR等表达均出现显著下调(P <0. 05),表明异甘草素可以抑制Smad3/Arid2-IR/NF-κB轴的活化。结论异甘草素可有效减轻AKI小鼠肾炎症反应,其机制可能与调节Smad3/Arid2-IR/NF-κB轴有关。

黄芪三七合剂通过调控Arid2-IR/NF-κB信号轴改善糖尿病肾病小鼠肾炎症反应

目的研究黄芪三七合剂对糖尿病肾病(DN)小鼠的治疗作用并探讨潜在调控机制。方法 50只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(NC组)、模型组(DN组)、黄芪三七合剂低/高剂量组(L-A&P,H-A&P组)和厄贝沙坦组(IRB组)。NC组给予普通饲料,其余组均高脂高糖饲料喂养2月后,腹腔连续5 d注射链脲佐菌素50mg/(kg·d)以诱导糖尿病肾病模型,建模后给予不同灌胃处理,治疗4周后处死小鼠,HE、PAS观察肾病理,检测肾功能及小鼠肾组织中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)、lncRNA Arid2-IR、NF-κB及其下游信号分子的表达。结果与DN组相比,A&P治疗后的小鼠24 h尿蛋白、血清肌酐和尿素氮明显下降,肾功能在一定程度上得到恢复;肾病理结构明显好转,炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的表达呈现剂量依赖性下降,Arid2-IR和NF-κB及其下游分子(COX2,IL-6)的表达下调,表明NF-κB信号通路活化受到抑制。结论 A&P可有效减轻DN小鼠肾炎症反应,其机制可能与调节Arid2-IR/NF-κB信号轴有关。

长非编码RNA ARID2-IR在慢性肾小球肾炎中的作用及机制研究

目的探讨慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)人群中长非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)ARID2-IR与肾功能的相关性及其机制。方法共有52例CGN患者(CGN组)和45名健康成年人(对照组)纳入本研究。收集两组一般资料(年龄、性别、血压、体质量指数等),检测血尿素氮、血肌酐水平。通过Starbase数据库进行靶基因预测,通过Tbtools软件进行KEGG通路富集分析。采用实时荧光定量PCR检测LncRNA ARID2-IR和靶基因的表达。采用ROC曲线分析LncRNA ARID2-IR和靶基因对于CGN的诊断价值。采用Logistic回归分析CGN的影响因素。结果CGN组的收缩压、舒张压、血尿素氮和血肌酐均显著高于对照组(P<0.05)。CGN组LncRNA ARID2-IR的表达显著高于对照组(P<0.05)。LncRNA ARID2-IR表达分别与血尿素氮(r=0.225,P<0.05)和血肌酐(r=0.266,P<0.05)呈显著正相关。靶基因预测显示LncRNA ARID2-IR共有88个靶基因,与LncRNA ARID2-IR匹配得分排名前5的靶基因为IFT80、IGHG4、RLBP1、ANKRD27和TSPAN6,其中IFT80和RLBP1在CGN组中的表达水平显著高于对照组(P<0.05)。ROC曲线显示,LncRNA ARID2-IR、IFT80和RLBP1预测CGN的曲线下面积分别为0.783、0.821和0.738,对于CGN具有诊断意义。Logistic回归分析显示,LncRNA ARID2-IR(OR=4.754,P=0.021)、IFT80(OR=3.518,P=0.001)和RLBP1(OR=4.718,P=0.021)水平升高会增加患CGN的风险。结论LncRNA ARID2-IR的表达上调在CGN中发挥了重要作用,LncRNA ARID2-IR可能是CGN防治的新靶点。

黄芪多糖对小鼠慢性肾功能衰竭保护作用的机制研究

目的探讨黄芪多糖(APS)对慢性肾功能衰竭小鼠的保护作用及其潜在分子机制。方法雄性Balb/c小鼠采用5/6肾切除建立慢性肾功能衰竭模型,随机分为模型组和黄芪多糖干预组(APS组),另设假手术组,每组10只。术后正常喂养7周,APS组给予黄芪多糖100 mg/(kg·d)灌胃,余组均给予等体积生理盐水。4周后收集粪便、尿、血液、肾脏与结肠组织样本,测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量;组织固定包埋切片后予以HE、天狼星红染色进行病理分析;Western blot、免疫组织化学染色检测紧密连接蛋白-1家族(Claudin-1、Occludin-1、ZO-1)及p-NF-κB表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;实时荧光定量PCR检测长链非编RNA(lnc RNA)Arid2-IR及IL-1β、IL-6、TNF-α的表达变化以及各组小鼠粪便的菌群变化。结果APS组小鼠血Scr、BUN、24 h尿蛋白较模型组下降;HE染色显示APS组肾脏、结肠组织病理损伤均较模型组改善;天狼星红染色可见APS组纤维化程度明显改善;Western blot、免疫组织化学染色结果可见APS组结肠组织紧密连接蛋白-1家族表达量升高及肾组织p-NF-κB蛋白表达量较模型组明显下降;ELISA结果显示APS组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平较模型组明显下降;实时荧光定量PCR结果可见APS组肾组织中lnc RNAArid2-IR、IL-1β、IL-6和TNF-α的相对表达水平较模型组明显下降,同时APS组乳酸杆菌、双歧杆菌的表达量较模型组增高,而大肠杆菌的表达量较其下降。结论黄芪多糖可能通过调控lncRNA Arid2-IR/NF-κB信号轴调节小鼠肠道菌群,从而修复肠道屏障损伤,维持正常肠道生理环境,改善慢性肾功能衰竭。