ARMCX1对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

目的:通过RNA干扰技术敲减含Armadillo重复序列X连锁蛋白1(Armadillo repeat-containing X-linked protein 1,ARMCX1)的表达,观察ARMCX1对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响,为研究ARMCX1在宫颈癌发病机制中的作用提供依据。方法:敲减ARMCX1表达后,通过流式细胞术检测SiHa细胞的周期分布和凋亡的变化,利用平板技术观察敲减10 d后宫颈癌SiHa细胞的集落形成情况。利用Western blot实验检测细胞增殖和凋亡相关蛋白水平的变化。结果:敲减ARMCX1表达后SiHa细胞的集落形成能力明显受抑制(P<0.05),细胞周期阻滞在S期,细胞中细胞周期蛋白E(cyclin E)和磷酸化细胞分裂周期蛋白25A(cell division cycle 25A,Cdc25A)的蛋白水平降低。同时,敲减ARMCX1表达促进SiHa细胞的凋亡,Bcl-2蛋白表达量显著减少,Bax和active caspase-3蛋白量显著增加(P<0.05)。结论:敲减ARMCX1的表达抑制SiHa细胞增殖,诱导细胞凋亡。

miR-223通过靶向ARMCX1基因调控宫颈癌细胞的增殖和侵袭

目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-223对宫颈癌siha细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法应用Real-time PCR技术检测宫颈癌患者癌组织及其癌旁组织中miR-223及Arm重复蛋白1(ARMCX1)mRNA的表达。建立miR-223过表达的siha细胞株(miR-223 mimic组),利用CCK8实验和Transwell实验观察对siha细胞生物学功能的影响。构建野生型和突变型ARMCX1双荧光素酶报告基因载体,并检测荧光素酶活性。Real-time PCR及Western blotting检测过表达miR-223的siha细胞的ARMCX1 mRNA和蛋白表达。结果与癌旁组织相比,宫颈癌组织中miR-223的表达明显降低(P<0.05),ARMCX1 mRNA表达明显升高(P<0.05)。与NC mimic组相比,miR-223 mimic组的宫颈癌siha细胞中miR-223的表达明显升高(P<0.05),且细胞增殖和侵袭能力明显降低(P<0.05)。而转染GV230-ARMCX1后,miR-223+GV230-ARMCX组细胞增殖和侵袭能力较miR-223+GV230-NC组增强(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实,miR-223可以直接靶向结合ARMCX1的3’UTR区序列,Real-time PCR和Western blotting结果显示,ARMCX1 mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05)。结论miR-223在宫颈癌中低表达,并且可通过靶向ARMCX1基因抑制宫颈癌细胞的增殖和侵袭。

宫颈鳞癌组织ARMCX1和MMP-9表达及临床意义

宫颈鳞癌临床较为常见,发生具有双峰的特征,病变形成与机体基因表达失常有关[1-2]。ARM重复蛋白家族是肿瘤进展相关的蛋白质,其含有多个Armadillo repeat结构,在正常机体中极少表达,在肿瘤细胞表达明显上调,对细胞间通信有明显的调节作用。ARM重复X连锁蛋白1(ARMCX1)是家族中最早发现的成员,细胞损伤后其分泌增多,对细胞增殖和细胞的迁移有明显的促进作用。基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是基质金属蛋白酶中的重要成分,具有显著降解明胶的作用,还能引起Ⅳ型胶原、基底膜的降解,同时对层粘连蛋白有一定的调节作用[4-5]。本研究探讨宫颈鳞癌组织ARMCX1和MMP-9表达及其临床意义,报道如下。

口腔鳞癌中ARMCX1的表达及其对预后判断价值的研究

目的:检测口腔鳞癌中ARM重复X连锁蛋白1(ARMCX1)的表达,分析其临床意义。方法:以112份口腔鳞癌患者切除的肿瘤组织标本作为观察组1,选择上述标本中距肿物边缘>3cm的正常口腔黏膜组织45份作为对照组1,留取术后的蜡块组织。以上述标本中15份口腔鳞癌患者切除的肿瘤组织作为观察组2,距肿物边缘>3cm的正常口腔黏膜组织15份作为对照组2,留取术后新鲜组织。应用免疫组化方法检测观察组1和对照组1中ARMCX1蛋白的表达,应用荧光PCR技术检测观察组2和对照组2中ARMCX1mRNA的表达。结果:观察组1和对照组1中ARMCX1蛋白表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05),观察组1中ARMCX1蛋白表达的阳性率与脉管累犯、淋巴结转移、肿瘤最大径和增殖指数相关(P<0.05),与分化程度、神经侵犯无明显相关性(P>0.05)。观察组2和对照组2中ARMCX1 mRNA表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示观察组1中ARMCX1蛋白的表达与生存时间密切相关(P<0.05)。结论:ARMCX1蛋白和mRNA在口腔鳞癌组织中表达下调,对病变形成和进展具有促进作用,ARMCX1蛋白的表达对判断口腔鳞癌的预后可能有一定价值。