改进ARRB模型下的平面交叉口信号配时优化

道路交叉口的通行能力是道路服务水平的重要组成部分,交叉口信号配时的优化是改善通行能力、提高车辆运行效率的重要手段。以某道路交叉口为例,进行实地调查并收集相应数据,运用Vissim软件对其进行模拟仿真,并输出最大排队长度、停车延误和人均延误等参数。根据相关标准对该道路交叉口运行状况进行评价,通过ARRB信号周期模型对该道路交叉口的绿灯时长进行优化,运用Vissim软件进行模拟并输出相关参数,与优化前各参数进行对比。结果表明:在优化后的信号配时方案下,平均最大排队长度下降29.83%,平均停车延误下降40.17%,平均人均延误下降34.49%,该道路交叉口的通行效率显著提升。

基于ARRB1探讨亮菌多糖干预5-FU诱导的肠黏膜损伤的作用及机制

目的探讨β-抑制蛋白1(ARRB1)对亮菌多糖(ATPS)逆转5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的化疗性肠黏膜损伤的影响及机制。方法ARRB1基因敲除型(ARRB1^(-/-))和野生型(WT)C57BL/6J小鼠各12只,分别随机分成Control组、Model组和ATPS组(200 mg/kg),连续7 d 5-FU(50 mg/kg)腹腔注射建立化疗性肠黏膜损伤模型;比较各组小鼠体质量变化,肉眼观察肠道组织大体外观;HE染色评价空肠组织病理损伤;试剂盒测量血清中超氧化物歧化酶(SOD)和二胺氧化酶(DAO)的活性;免疫组织化学检测紧密连接蛋白(TJ)标志物ZO-1、Occludin、Claudin-1和增殖相关蛋白Ki-67的表达情况;隐窝分离和类器官培养,检测小肠类器官生长状态。结果5-FU化疗减轻小鼠体质量,加重小肠组织病理损伤,降低SOD水平、TJ蛋白和Ki-67蛋白表达,升高血清DAO水平,降低球形结构形成率和类器官形成率;与模型组比较,WT小鼠ATPS处理后体质量恢复,病理损伤减轻,血清SOD水平、TJ蛋白和Ki-67蛋白表达增加,DAO水平降低,球形结构形成率和类器官形成率明显升高;而ARRB1^(-/-)小鼠在ATPS治疗后未能逆转5-FU的效应。结论ATPS通过ARRB1的肠道屏障和类器官生长保护作用,逆转5-FU诱导的肠黏膜炎。

Arrb2基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定

目的 探讨Arrb2基因敲除鼠的繁育和基因型分析,验证聚合酶链式反应(PCR)法对Arrb2基因敲除鼠基因型检测的适用性。方法 将引进的Arrb2纯合♂小鼠和野生型♀鼠进行交配繁殖出子一代,获得的F1代杂合子小鼠继续进行交配,待小鼠2周龄时剪尾部组织提取DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。将获得的纯合子小鼠与异性杂合子交配,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠。Western blot检测验证获得的Arrb2基因敲除纯合子小鼠的主要脏器中β-arrestin2蛋白的表达情况。结果 Arrb2基因敲除鼠的繁育和鉴定取得了成功,获得了一批基因敲除鼠。F1代杂合子小鼠交配获得的F2代小鼠出现3种基因型:Arrb2+/+、Arrb2+/-、Arrb2-/-,使用PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型。Western blot结果表明,Arrb2基因敲除纯合子小鼠肝、肾组织中几乎不表达β-arrestin2蛋白。结论 正确的繁殖和鉴定是得到纯合Arrb2基因敲除鼠的重要途径,PCR法鉴别小鼠基因型具有简便、快捷、可靠的特点。

ARRB1融合蛋白表达载体ARRB1-EGFP的构建及其在神经胶质瘤细胞中的表达

目的构建重组表达载体ARRB1-EGFP,在细胞中表达与鉴定,为进一步研究其功能奠定基础。方法 RT-PCR获得编码人ARRB1的全基因序列,克隆到真核表达载体pEGFPN1,构建重组表达载体ARRB1-EGFP,并转化于E.coli DH5α中筛选阳性重组子,通过限制性内切酶酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转染入HEK293细胞中表达,表达产物经Western blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光方法比较融合蛋白与内源性ARRB1在SNB19细胞的定位。结果成功构建了ARRB1融合蛋白的真核表达载体,并经Western blot鉴定正确。免疫荧光提示融合蛋白与内源性ARRB1定位相似。结论 ARRB1-EGFP融合蛋白可以安全、高效地转导入HEK293以及SNB19细胞中。

ARRB2基因在新疆哈萨克族患者食管癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨新疆哈萨克族患者食管鳞状细胞癌中基因ARRB2 mRNA的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测ARRB2基因在40例哈萨克族食管癌患者组织及其对应的远端无癌组织中的表达。结果 ARRB2基因在癌组织和远端无癌组织中的表达阳性率分别为62.5%,60.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。ARRB2的表达与组织分化、TNM分期有关(P<0.05)。T内参/N内参≤0.5阳性表达差异率为42.5%(17例),T内参/N内参≥2阳性表达差异率为25.0%(10例)。结论新疆哈萨克族食管癌患者肿瘤组织ARRB2阳性表达率与组织分化、TNM分期有关。

基于ARRB模型的交叉口多目标信号配时优化研究

城市交叉口交通拥堵和机动车尾气排放是近年来城市发展面临的重要问题,而信号配时优化是提高城市交通运行效率、缓解车辆因频繁起停而加剧尾气排放的有效手段之一。本文基于ARRB模型下的信号配时设计方法,综合考虑效率与环境的双重目标,研究不同停车次数惩罚系数下的信号配时方案。同时,以成都市某大型十字交叉口为验证实例,结合VISSIM计算仿真,分析了交通延误、停车次数与排放、油耗的影响关系,继而得到了综合最优的停车次数惩罚因子与配时方案。该方案使延误和停车次数平均提高了36.4%,排放及油耗平均降低了19.4%。

ARRB多功能道路检测车在路况检测中应用与探讨

公路技术状况的定期检测是一项艰巨的工作,公路养护部门在起步阶段都是通过人工调查来完成,随着现代科技发展,使得应用智能化道路检测设备在不影响正常交通情况下,高效率地获取路况信息成为可能,并在道路预防性养护方面得到较好的应用。通过对澳大利亚鹰眼2000型多功能道路检测车功能介绍和使用总结,全面阐述了路况评价的原理和方法,并进行评价与展望。

改进ARRB法下考虑PM2.5排放的交叉口多目标信号控制优化

机动车尾气排放已成为城市PM2.5污染中不可忽视的一部分,车辆的运行工况直接影响着交通PM2.5的排放量,运用交通管理与控制手段优化机动车运行工况对提高交通效率和控制交通PM2.5排放具有重要意义。本文综合考虑城市大型交叉口待行/转区信号设置及最短行人过街时间,以交通效率和PM2.5排放指标为多重目标,建立了改进ARRB法下的信号控制优化模型。以成都市某十字交叉口为算例构建基于实际路网的VISSIM＆MOVES联合仿真平台,实现各信号控制方案的评估,验证模型优化效果。仿真结果表明,优化后交通效率指标平均提高40%以上,PM2.5排放总量下降127.78克。

Arrb1基因敲除对小鼠T淋巴细胞发育的影响

该文旨在研究Arrb1(β-arrestin1)基因敲除对小鼠T细胞发育的影响,进一步探讨急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphocytic leukemia,T-ALL)发病机制。该文使用q-PCR、Western blot分别检测Arrb1基因敲除的C57BL/6J小鼠中Arrb1的m RNA和蛋白质水平;流式细胞术检测Arrb1基因敲除小鼠及野生型小鼠的胸腺、外周血、淋巴结的T细胞比例。结果显示,与野生型相比,Arrb1基因敲除小鼠的胸腺CD4CD8双阴(double negative,DN)细胞比例明显增加,DN1期细胞比例增加最为显著(P<0.05),而DN4期细胞比例减少(P<0.05);CD4CD8双阳(double positive,DP)细胞比例显著减少(P<0.05)。外周血CD4阳性T细胞比例减少(P<0.05),淋巴结CD4阳性T细胞比例以及CD4/CD8阳性T细胞比值减少(P<0.05)。研究结果证明,Arrb1基因敲除显著影响小鼠T细胞发育,使T细胞发育阻滞在DN期,从而可能成为影响T-ALL发病的重要因素。

人类ARRB1和GNMT蛋白相互作用的初步研究

GNMT(甘氨酸-N-甲基转移酶,glycine N-methyltransferase)是人体内一个多功能蛋白.最近研究发现GNMT是一个潜在的抑癌基因,但GNMT抑癌的机理却不清楚.研究以GNMT为"诱饵",利用酵母双杂交系统筛选人肝cDNA文库,获得了GNMT的一个相互作用蛋白ARRB1(-βarrestin1),并通过GST Pull-down、免疫共沉淀的方法在体内体外验证了相互作用的特异性.进一步研究发现GNMT和ARRB1的相互作用不依赖于GNMT的四聚体高级结构和甲基转移酶活性.免疫荧光共定位实验发现,当ARRB1与GNMT共转染HeLa细胞后,ARRB1蛋白的亚细胞定位发生改变,表现出与GNMT蛋白共定位,有入核的趋势.这为研究GNMT的抑癌作用机理提供了新的线索.

转录因子SP1对急性T淋巴细胞白血病进程的影响

目的:研究转录因子SP1对支架蛋白ARRB1的转录调节及其在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)中的作用。方法:构建p GL3-ARRB1-luc、p CDNA3.1-SP1及其他可能结合的转录因子质粒,采用双荧光素酶报告基因实验证明ARRB1启动子区与转录因子结合;利用慢病毒感染构建SP1过表达的稳定细胞株JK-SP1,RT-PCR及Western blot验证SP1与ARRB1表达的关系;进一步流式细胞术检测SP1对细胞凋亡、细胞周期以及细胞活性氧含量的作用。构建NCG小鼠异种移植模型,探讨SP1对白血病小鼠成模能力的影响。结果:p GL3-ARRB1-luc、p CDNA3.1-SP1质粒共转入HEK293T细胞后,虫荧光素高表达(P<0.001);同时,与对照组相比,稳定细胞株JK-SP1中ARRB1 m RNA水平、蛋白水平均增加(均P<0.01)。进一步体外实验结果显示,与对照组相比,JK-SP1细胞凋亡比例更高(x=22.78%),细胞周期多阻滞于G1期(63.00%),活性氧含量增加。体内实验证明,尾静脉输注JK-SP1细胞的NCG小鼠生存时间更长(平均33.8 d),肝脾肿瘤细胞浸润相对较少。结论:转录因子SP1通过直接结合于ARRB1启动子区,促进ARRB1转录与表达,进而延缓体内、体外T-ALL疾病进程。本研究完善了ARRB1调控T-ALL进程的机制并为新的靶向药物研发提供了理论依据。

β-制动蛋白2在炎性痛小鼠脊髓背角的表达及作用

目的:通过建立不同类型的炎性痛模型,观察β-制动蛋白2(Arrb2)在炎性痛小鼠疼痛发展过程中的作用。方法:在WT小鼠和Arrb2^(-/-)小鼠建立由卡拉胶(carrageenan)诱导急性炎性痛模型和弗氏完全佐剂(CFA)诱导慢性炎性痛模型,通过von Frey纤维丝法测定不同时间点的机械缩足反应阈值(PWT);利用Western Blot技术观察Arrb2在急性痛和慢性痛中的表达;在脊髓背角采用鞘内给药的方式,通过von Frey纤维丝法检测小鼠给予μ受体选择性激动剂(DAMGO)后短期和长期的PWT。结果:与WT小鼠相比,Arrb2^(-/-)小鼠在急性痛状态下痛敏恢复程度较慢,而在慢性痛早期表现出显著的抑痛作用。Western Blot结果显示:在急性痛模型下,脊髓背角Arrb2蛋白表达无明显变化,而在慢性痛模型下,Arrb2蛋白表达下降。最后,鞘内注射DAMGO实验表明,在急性痛模型下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO短期无显著作用,后期可诱发吗啡耐受样痛敏;在慢性痛状态下,敲除Arrb2后鞘内注射DAMGO则在短期和长期均表现出镇痛作用的显著增强。结论:Arrb2在不同类型的炎性痛中表达和作用均有所不同。

β-arrestin1在炎-癌转化中的研究进展

β-arrestin1(ARRB1)作为β-arrestin(ARRB)家族成员,是一类具有多种生物学功能的细胞内支架蛋白。其参与调控G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)和非GPCR介导的信号通路。ARRB1与炎症和癌症密切相关,不仅参与炎症形成,而且通过多种方式调节炎癌转化的进程。因此对ARRB1的生物学特性及其在炎癌转化中作用的研究,将有助于揭示其对人类肿瘤进程干预的潜在价值。

β-arrestin2基因多态性与湖南省汉族海洛因成瘾者美沙酮维持治疗反应的关联分析

目的研究β-arrestin2（ARRB2）基因的3个单核苷酸多态性（SNP）位点rs3786047、rs1045280、rs2036657在湖南省汉族海洛因成瘾者中的分布及其与美沙酮维持治疗反应的相关性。方法从湖南省美沙酮维持治疗门诊中随机抽取4个门诊，以汉族美沙酮维持治疗者作为研究对象，收集研究对象的一般社会经济学特征、相关吸毒史和美沙酮治疗史资料，测定ARRB2基因多态性位点的基因型以分析SNP位点与治疗反应的关系。结果ARRB2基因rs3786047、rs1045280、rs2036657SNP位点在不同治疗反应组基因型分布频率符合Hardy—Weinberg遗传平衡。在治疗反应好与差两组间，rs3786047（χ2=0．4862，P=0．784）、rs1045280（χ2=1．5919，P=0．451）、rs2036657（χ2=1．0615，P=0．588）的基因型频率分布和等位基因频率分布差异无统计学意义。结论湖南省汉族美沙酮维持治疗人群中尚未发现ARRB2基因单核苷酸多态位点rs3786047、rs1045280、rs2036657与治疗反应有关联关系。