常压室温等离子体(ARTP)诱变技术选育柱状田头菇(茶树菇)优良菌株研究初探

本研究利用添加荔枝枝屑的筛选培养基,通过常压室温等离子体(ARTP)诱变技术对柱状田头菇(茶树菇)菌丝体进行诱变处理,共获得67株再生菌株,初筛得到12株再生菌株与出发菌株有较明显的拮抗反应,复筛得到7株再生菌株的长速、长势优于出发菌株,并通过酯酶同工酶电泳技术对这7株再生菌株进行菌种的真实性鉴定。结果确定了一株适宜分解荔枝枝屑的优良再生菌株AL20,其与出发菌株的酯酶同工酶谱联合系数为0.60,是产生了遗传距离的新菌株,且其菌丝长速达3.13mm/d,生物学效率达到73.15%,分别较出发菌株提高0.21mm/d、9.03%,因此初步确定AL20是能够高效利用荔枝枝屑生产的新菌株。

盐霉素高产菌株的筛选研究

目的优化高通量筛选盐霉素高产菌株流程,高通量筛选出具有遗传稳定性的产盐霉素高产菌株。方法以核糖体工程理论为基础,常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)及高通量筛选技术(high-throughput screening,HTS)对产盐霉素的白色链霉菌(Streptomyces albus)S12诱变筛选,并以琼脂块扩散法为基础建立一种快速检测盐霉素的方法应用于高通量筛选过程初筛。结果获得具有氯霉素和四环素双重抗性的高产菌株Tet30Chl25。摇瓶发酵实验结果表明:突变株Tet30Chl25盐霉素效价由初始菌株的16306U/m L提高到34712U/m L,提高了112%,且遗传稳定性良好。同时建立一种快速检测盐霉素的方法——琼脂块扩散法并应用于高通量筛选过程初筛中,缩短筛选周期12d,优化了筛选流程。结论首次综合运用核糖体工程推理选育技术、常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)及高通量筛选技术(highthroughput screening,HTS)对产盐霉素的白色链霉菌(S.albus)诱变筛选,是很好的菌种选育策略,适合工业菌种的选育。