P-STAT6/Tim-3在THP-1细胞极化为M2型巨噬细胞中的作用及机制研究

目的研究P-STAT6/Tim-3在THP-1细胞极化为M2型巨噬细胞中的作用及机制。方法将THP-1细胞采用相应细胞因子分别诱导为M0、M1、M2巨噬细胞,记录细胞形态改变;采用Western blotting鉴定M0、M1及M2表型,检测不同浓度STAT6抑制剂AS1517499对M1、M2极化的影响,检测STAT6、P-STAT6、Tim-3在巨噬细胞M1、M2极化中的表达; CCK-8实验检测不同浓度AS1517499对THP-1细胞的毒性作用。采用SPSS 17. 0软件分析实验数据。结果 THP-1细胞发生M1、M2极化后细胞形态由小圆形变为长梭形及多边形。采用Western blotting结果表明CD80、i NOS在M1组高表达,CD163、Arg-1、P-STAT6及Tim-3在M2组高表达。不同浓度AS1517499使CD163、Arg-1、P-STAT6及Tim-3表达相应降低;药物浓度为10nmol/l、100nmol/l时,对THP-1细胞活力无明显影响;浓度为300nmol/l时,细胞活力出现明显下降; AS1517499的合适药物浓度是100nmol/l。结论外源性细胞因子可通过激活巨噬细胞P-STAT6/Tim-3诱导巨噬细胞发生M2极化; AS1517499可以通过阻断巨噬细胞P-STAT6/Tim-3,抑制THP-1细胞极化为M2型巨噬细胞。