双孢蘑菇As2796菌株气生与贴生菌丝遗传差异的转录组分析

【目的】挖掘双孢蘑菌落形态变化可能涉及的重要基因,为双孢蘑菇种质资源评价、新品种选育提供科学依据。【方法】以双孢蘑菇主栽品种As2796为试验菌株,收集同一平板上生长的贴生与气生菌丝,提取样品的RNA进行转录组测序分析。【结果】通过转录组分析,A601(As2796气生组)与A602(As2796贴生组)共鉴定出965个差异表达基因(DEGs)。GO富集分析结果表明,在真菌细胞壁组成方面有疏水蛋白相关的DEGs富集,其中AGABI2DRAFT_13655、AGABI2DRAFT_136569、AGABI2DRAFT_193057属于ABH3蛋白基因家族,在气生菌丝的表达水平显著高于贴生菌丝,可能与气生菌丝的产生有关。研究还发现了疏水表面结合蛋白A(HsbA)相关基因AGABI2DRAFT_194662在气生菌丝中FPKM表达水平为0,在贴生菌丝中为10.24。通过对DEGs进一步分析,富集到8个可能与脂酶同工酶相关的DEGs,气生菌丝中这些基因的表达水平显著高于贴生菌丝。SNP/InDel分析结果表明,As2796气生组SNP数为110601,贴生组SNP数为111188,单核苷酸变异中,C:G>T:A的变异次数较多,共筛选出2374个共同InDel。【结论】成功获得双孢蘑菇不同形态菌丝的转录组数据,并从中挖掘出潜在的相关基因和SNP位点,为双孢蘑菇相关分子标记开发及辅助育种提供参考。

培养基质对双孢蘑菇As2796菌落形态影响

配制天然、有机、合成等43种不同配方的培养基,接种双孢蘑菇品种As2796菌丝块,观察菌丝在培养皿中生长的菌落形态变化并测定菌丝的生长速度,以探讨培养基质对双孢蘑菇品种As2796菌落形态的影响。试验结果:双孢蘑菇As2796菌落形态及菌丝生长速度明显受培养基质影响,菌落形态表现为气生、半气生、贴生等类型;不同配方中葡萄糖的添加量对菌丝生长产生不同的影响。

蘑菇As2796菌株在西宁地区的栽培适应性试验

在西宁冷凉气候条件下,进行了蘑菇As2796菌株的栽培适应性研究。试验表明：①从3月初建堆到完成培养料的一次性发酵,发酵期最长为33 d,最短为26 d；②5月初出菇至11月上旬,共出菇13潮次,菇期140～145 d；④投料35．3 kg/m@@2,含去柄后的鲜菇48～57个/kg,平均单产10．2kg/m@@2,最高为19．3 kg/m@@2。

双孢菇As2796的特性及栽培要点

双孢菇As2796系山东省农作物品种审定委员会1998年认定品种之一。近几年来,该品种在山东莘县、肥城等地栽培,产量高而稳定,深受菇农欢迎。9～10月份是双孢菇在山东自然条件下种植的大好时机。现将此菌株的特征特性及栽培要点介绍如下。一、特征特性双孢菇As2796属半气生型菌株。

双孢蘑菇新菌株W192与As2796比较试验

双孢蘑菇贴生型W192、气生型W192菌株和AS2796菌株栽培对比试验,结果表明,不同菌株的菌丝生长、子实体发育、出菇与转潮时间及生物学效率差异较为明显。贴生型W192菌株转潮快,抗逆性强,产量最高、质量较好。

青海省双孢菇引种比较试验

通过对几个双孢菇菌株进行品种比较及试验。结果表明,双孢菇抗杂菌能力强,栽培技术简单,产量较高,易于成功。

双孢蘑菇基质降解能力退化差异表达基因的克隆

为研究双孢蘑菇基质降解能力退化的相关基因表达差异及分子机制,克隆了正常菌株As2796及其两个退化突变体菌株2796-3、2796-5,在mRNA差异显示(DDRT-PCR)分析中发现的5个差异基因及其上游约1200bp的调控序列,并进行了序列测定与比较。结果表明,这些基因与上游序列在三个菌株中并无实质性差异,推测该退化性状更可能是转录调控相关基因变异所引起的。

双孢蘑菇2796凝集素的提取及其部分理化性质研究

双孢蘑菇2796的子实体经PBS浸提、40%～60%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化得到双孢蘑菇2796凝集素。双孢蘑菇2796凝集素经SDS-PAGE检测为单一条带,测得亚基相对分子质量为15.7 kD,通过Sephadex G-100凝胶过滤法测得其相对分子质量为64.1 kD,通过等电聚焦电泳分析发现其有4种等电点不同的亚型,pI分别为6.62、5.92、5.69、5.57。双孢蘑菇2796凝集素具有较高的热稳定性,经80℃处理10 min,仍能保持较好的凝集活性,该凝集素在pH3.0～10.0范围内都保持着较高的凝集活性,其凝血活性不依赖于二价金属离子。

双孢蘑菇液体菌种固态化工艺的初步研究

本试验以双孢蘑菇As2796为研究对象,对双孢蘑菇液体菌种固态化工艺进行了研究。通过测定固态化菌种萌发时间、菌丝生长速度、菌丝长势、机械强度,确定优化后包埋剂组成为:海藻酸钠3.5%、硅胶4.0%、脱脂乳粉2.0%、谷氨酸钠4.0%、羧甲基淀粉钠2.0%,滴落于2.5%CaCl2溶液中凝固。在此条件下制备的固态化菌种,萌发时间34 h,菌丝生长速度为4.9 mm/d。出菇数据表明,固态化菌种23 d即可满瓶,产量达到14.72 kg/m^(2)。