ASB3基因功能缺失突变和表达下调促进结直肠癌细胞的生长和转移

背景与目的锚蛋白重复序列和SOCS盒蛋白3(ankyrin repeat and SOCS box protein 3, ASB3)是ASB家族成员,包含锚蛋白重复序列和SOCS盒结构域。以往研究表明,它介导肿瘤坏死因子受体2的泛素化和降解,并可能参与炎症反应。然而它对肿瘤发生的作用尚不清楚。本研究旨在探讨ASB3对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)的生长与转移的影响。方法使用新一代测序或Sanger测序法检测结直肠癌标本或细胞系中的ASB3突变,并用实时定量PCR、蛋白免疫印迹、免疫组化或免疫荧光法来测定基因的表达。通过MTT和集落形成实验检测细胞的增殖,用流式细胞仪检测细胞周期分布,并用Transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭。应用裸鼠实验来检测肿瘤细胞的成瘤性和肝转移。结果在结直肠癌病例中ASB3基因经常发生突变(5.3%)和下调(70.4%)。沉默内源性ABS3的表达在体外可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,在体内可促进成瘤和肝转移。相反,过表达野生型ASB3可抑制肿瘤的生长和转移,而过表达ASB3突变体不具有这种抑制效应。进一步分析表明,ASB3通过上调β?catenin、E?cadherin和下调转录因子8、N?cadherin和vimentin阻止上皮?间充质转换来抑制结直肠癌转移。结论在结直肠癌中常存在ASB3基因突变或表达下调,在结直肠癌的发生和进展中起到重要作用。

hASB-8相互作用蛋白的初步研究

hASB 8基因是对肿瘤细胞生长具有明显抑制作用的人类新基因 .其编码蛋白属于人ASB蛋白家族中的一个成员 ,与小鼠中的ASB 8蛋白同源性达 96 % .保守结构域分析显示hASB 8在N端包含 4个Ankyrinre peats ,在C端包含了一个SOCSbox .利用酵母双杂交技术 ,筛选了人的胎盘 (Placenta)cDNA文库 ,获得了与hASB 8相互作用的 2个蛋白 ,ElonginC和CDK4bindingprotein ;并在二倍体酵母体内进行了验证 .这些试验提示hASB 8蛋白可能介导肿瘤细胞中靶蛋白和泛素复合体之间的相互作用 。