三黄连合剂通过NLRP3/ASC/Caspase-1通路对哮喘患儿气道炎症的机制研究

目的探讨三黄连合剂通过NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein domain associated protein 3,NLRP3)/凋亡相关颗粒样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteine aspartic acid specific protease-1,Caspase-1)通路对哮喘患儿气道炎症的作用及机制。方法选取2021年1月—2023年10月就诊的90例哮喘患儿,采用数字表法随机分为观察组与对照组,各45例。观察2组哮喘患儿不良反应、1 s用力呼气容积(forced expiratory volume in the first second,FEV_(1)%)、最大呼气流量(peak expiratory flow,PEF)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及TNF-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平差异。结果观察组不良反应发生率为6.66%,对照组为11.11%,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组总有效率为95.56%,高于对照组的80.00%(P<0.05)。治疗后FEV_(1)%、PEF、FVC、哮喘控制测试表(asthma control test,ACT)评分高于对照组(P<0.05)。治疗后观察组血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、IL-18水平低于对照组(P<0.05)。治疗后观察组患儿血清NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。结论三黄连合剂治疗能减轻哮喘患儿气道炎症反应,降低炎症因子水平,改善肺功能,减轻病情,提高疗效,其可能通过NLRP3/ASC/Caspase-1通路发挥作用。

涂层涂覆顺序对ASC催化剂的性能影响

氨气(NH_(3))作为一种有害工业废气,严重危害大气环境和人类健康。氨泄露催化剂(ASC)可将选择性催化还原(SCR)催化剂中泄露的NH_(3)氧化为N_(2),有效降低NH_(3)的泄漏量,是柴油车后处理系统实现超低排放的必备催化技术。开发兼具低的NH_(3)泄露和良好的N_(2)选择性的ASC催化剂是目前亟待解决的难题。通过改变SCR涂层涂覆顺序,设计了两种涂层结构的ASC催化剂,并围绕涂层涂覆顺序对NH_(3)转化效率、N_(2)选择性和排放等性能的影响进行系统研究。结果表明:对于两种ASC催化剂,新涂覆方案具有更高的NH_(3)转化效率和氧化选择性。SCR涂层涂覆顺序变更可在不改动配方及工艺的基础上,通过影响ASC上层SCR涂层上载量,提高ASC的N_(2)选择性,显著降低NH_(3)泄露。

组合性抗体在分流ASC-US病变中的应用价值

目的探讨组合性抗体在分流非典型磷状细胞(ASC-US)病变中的临床应用价值。方法选择本院接受宫颈脱落细胞学检查的240例ASC-US患者,经HR-HPV与TCT检测将患者分为低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组与高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组,采用免疫组化法检测联合抗体P16/SOX-2、P16/Ki67,分别进行HPV E6/E7 mRNA检测,所有病例行阴道镜宫颈活检,比较组合性抗体检测敏感度及特异度。结果LSIL组和HSIL组患者组织中SOX-2/P16联合表达阳性率均显著高于组内SOX-2表达、P16表达阳性率(P<0.05)。LSIL组和HSIL组患者组织中P16/Ki-67联合阳性率均显著高于组内P16、Ki-67阳性率(P<0.05)。LSIL组HPV E6/E7阳性率均低于组内P16/Ki-67阳性率(P<0.05),HSIL组患者组织中HPV E6/E7阳性率均低于组内SOX-2/P16和P16/Ki-67阳性率(P<0.05)。SOX-2/P16诊断ASC-US敏感度为92.2%,特异度为55.9%;SOX-2/P16诊断ASC-US敏感度为96.1%,特异度为29.4%。结论组合性抗体检测在ASC-US诊断就鉴别诊断中具有重要价值,可作为ASC-US患者分流的有效指标。

基于NLRP3/ASC/Caspase-1通路探讨真武汤改善脾肾阳虚型糖尿病肾病炎症损伤的机制

目的研究真武汤对脾肾阳虚型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾组织炎症损伤的改善作用及可能机制。方法除空白对照组(db/m小鼠),其余各组均使用灌服生大黄溶液和氢化可的松制备db/db小鼠脾肾阳虚证模型,造模成功后随机分为模型对照组、厄贝沙坦组(25 mg/kg)、真武汤高、中、低剂量(33.8、16.9、8.45 g/kg)组,每组15只。除空白对照组和模型对照组给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应药物灌胃,连续灌胃8周。测定各组小鼠中医证候评分;检测各组小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、尿肌酐(urine creatinine,Ucr)以及24 h尿蛋白(24 hour urinary protein,24 h UTP);酶免疫吸附测定法(ELISA)检测肾组织中睾酮(testosterone,T)、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)、四碘甲状腺原氨酸(tetraiodothyronine,T4)、雌二醇(estradiol,E2)、白介素-1β(interleukin-1,IL-1β)、白介素-18(interleukin-18,IL-18)含量;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察各组肾组织病理学改变;以实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组小鼠肾组织中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型对照组小鼠出现少食、倦卧、便溏下降等脾肾阳虚症状,FBG、24 h UTP、IL-1β、IL-18、E2含量均显著升高(P<0.05),T、T3、T4、Ucr含量显著降低(P<0.05),肾组织病理显示肾小球肥大,肾小球系膜和基底增厚明显,且肾组织NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与模型对照组相比,真武汤高、中、低剂量组小鼠精神状态改善、活动增加、便质成型,T、T3、T4、Ucr含量明显增加(P<0.05),24 h UTP、IL-1β、IL-18、E2含量均显著降低(P<0.05);各给药组小鼠肾组织病理损伤明显改善,肾组织中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论真武汤能够显著改善脾肾阳虚型db/db小鼠一般状态、肾功能,降低炎症反应、减轻肾病理损伤,其作用机制可能与真武汤抑制肾组织中NLRP3/ASC/Caspase-1通路表达有关。

降香通脉汤对心肌缺血再灌注大鼠炎症因子及NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路的影响

目的:观察降香通脉汤对心肌缺血再灌注大鼠炎症因子及NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及降香通脉高、中、低剂量组,每组10只,给药14天后,采用大鼠冠状动脉前降支结扎30 min再复流1 h的方法建立I/R模型。ELISA法检测大鼠血清指标,HE染色观察心肌形态学改变,Western blot法检测心肌组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积、血清LDH、AST、CK-MB、IL-1β及IL-6水平及NLRP3、Caspase-1、ASC表达均增高(P<0.05);与模型组比较,降香通脉组上述各指标明显降低(P<0.05),且高剂量组下降最明显。结论:降香通脉汤可以降低再灌注大鼠心肌梗死面积,能降低大鼠血清AST、CK-MB、LDH指标和炎症因子IL-1β和IL-6的水平。其机制可能是通过抑制NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路对再灌注心肌起到保护作用。

宫颈脱落细胞mybl2 mRNA表达在绝经后HR-HPV并LSIL/ASC-US患者中的分流价值

目的探讨宫颈脱落细胞mybl2 mRNA表达水平在绝经后细胞学检查为低级别鳞状上皮内病变(LSIL)或无明确诊断意义的不典型鳞状细胞(ASC-US)且合并高危型HPV(HR-HPV)感染患者中的诊断分流价值。方法收集宫颈细胞学筛查为LSIL或ASC-US且合并HR-HPV感染绝经后患者的宫颈脱落细胞共120例,用qPCR检测宫颈脱落细胞的mybl2 mRNA表达水平。所有患者均经阴道镜下宫颈活检术行病理检查,根据病理结果分为宫颈癌(SCC)组(n=4),高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(n=18),LSIL组(n=38),宫颈炎症(NC)组(n=60),比较组间的mybl2 mRNA表达水平;根据HPV感染类型分为16/18型感染组(A组,n=35),16/18型合并其他HR-HPV感染组(B组,n=38),其余HR-HPV感染组(C组,n=47),比较组间的mybl2 mRNA水平。结果SCC组、HSIL组、LSIL组mybl2 mRNA表达水平均明显高于NC组(P<0.05);SCC组、HSIL组mybl2 mRNA表达水平均明显高于LSIL组(P<0.05);SCC组mybl2 mRNA表达水平明显高于HSIL组(P<0.05)。不同HPV感染组间宫颈脱落细胞mybl2 mRNA表达水平比较,A组、B组mybl2 mRNA表达水平明显高于C组(P<0.05),而A组和B组mybl2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论宫颈脱落细胞的mybl2 mRNA表达水平随宫颈病变程度的加重而升高,且16/18型HPV患者的mybl2 mRNA表达水平明显更高,提示mybl2 mRNA可能作为细胞学为LSIL或ASC-US且合并HR-HPV感染绝经后患者的诊断分流指标,以提高宫颈癌筛查准确率并减少医疗资源浪费。

限制性核酸内切酶Asc I蛋白质的表达纯化、酶活测定及小角散射结构解析

限制-修饰系统(RMS)是细菌为了防御外来DNA入侵而进化产生的一种保护机制。RMS系统可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型。Asc I是一种Ⅱ型限制性核酸内切酶,能识别8-bp DNA基序。尽管Asc I已经被广泛应用于分子克隆研究中,然而目前尚无关于Asc I蛋白质的表达、纯化以及结构机制等方面的研究报道。本研究基于大肠杆菌重组表达体系建立了Asc I重组蛋白质的高效表达和纯化方法,从每升细菌培养物中可获得约2.5 mg纯度大于95%的Asc I蛋白质。进一步的酶学性质研究表明,Asc I酶切反应的最适温度是37℃,最适pH为7.5~8.5,反应依赖于Mg^(2+)和Mn^(2+)等二价金属离子。基于小角X射线散射(SAXS)分析技术,我们还建立了Asc I蛋白质及其与底物DNA复合物在溶液状态下的三维空间模型,并结合点突变对该模型进行了验证。总之,本研究对Asc I蛋白质的重组表达、纯化、酶活性质以及结构机制进行了比较系统地研究,为了解RMS系统的工作机制提供了结构基础,同时也为Asc I作为分子克隆工具酶的进一步开发和改造提供了理论依据。

撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛通过NLRP3/ASC/Caspase-1途径诱导IPEC-J2细胞焦亡

旨在研究撒坝猪源E.coli高致病性毒力岛(highly pathogenic virulence island,HPI)诱导IPEC-J2细胞焦亡的机制,本研究以LPS+ATP为阳性对照,将实验室前期筛选的E.coli HPI及通过CRISPR/Cas9基因敲除技术构建完成的E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,观察细胞损伤情况;RT-qPCR测定各组作用0.5、3、6、9、12 h后细胞内焦亡通路中关键因子NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、消皮素D(gasderminD,GSDMD)及炎性因子白介素-18(IL-18)、白介素-1β(IL-1β)的mRNA转录水平;激光共聚焦观察NLRP3/Caspase-1炎性复合体组装及表达情况;Western blot测定GSDMD及其活化形式GSDMD-N蛋白表达水平,PI染色检测胞膜完整性。结果表明:LPS+ATP处理显著促进细胞焦亡的发生,阴性对照组细胞正常生长、轮廓清晰,E.coli感染组及LPS+ATP组细胞出现变形、脱落、边界模糊等明显细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),且HE染色显示,E.coliHPI感染相较于E.coliΔHPI感染对细胞的损伤更严重;E.coli HPI组中的焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平在3~9 h均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;NLRP3/Caspase-1炎性复合体在细胞质中发生组装,且E.coli HPI组NLRP3/Caspase-1蛋白荧光强度、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达水平及PI染色阳性率均极显著(P<0.01)高于E.coliΔHPI组;E.coli HPI组的CPE、HE染色、焦亡通路关键因子及炎性因子mRNA水平、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达量、NLRP3/Caspase-1共定位情况均与LPS+ATP组相似。结果提示,撒坝猪源E.coliHPI通过上调NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路中关键因子mRNA水平,诱导NLRP3/Caspase-1炎性复合体的组装,促进焦亡标志蛋白GSDMD及GSDMD-N的表达,并对IPEC-J2细胞膜进行打孔,从而诱导细胞发生焦亡。

子宫颈ASC-US患者阴道镜检查临床及经济意义初步探讨

目的:探讨子宫颈ASC-US患者阴道镜检查的临床及经济意义.方法:对121例ASC-US患者进行影视阴道镜检查及定位活检,并比较国内外各种检测ASC-US方案的费用价格.结果:121例患者中,慢性宫颈炎占62.0%;CIN I占12.4%;CINI合并HPV感染占5.8%;CINⅡ～Ⅲ占4.1%.国外阴道镜检查及活检费用是国内的数十倍.结论:ASC-US患者中仍存在少量宫颈高级别病变,阴道镜检查及指导下定位活检准确性高,等待时间短,费用低.

阴道镜检查诊断在ASC-US的实用性探讨

目的:探讨阴道镜检查诊断在宫颈不明确意义非典型鳞状细胞(ASC-US)的实用性。方法:对159例ASC-US患者进行影视阴道镜检查及定位活检。结果:159例患者中,慢性宫颈炎占73.58%;CIN Ⅰ占13.21%;CINⅡ9.43%;CINⅢ占3.77%。结论:ASC-US患者中仍存在少量宫颈高级别病变,阴道镜检查及指导下定位活检准确性高,等待时间短,费用低。

ASCS与AMT的历史、现状及其在中国的发展趋势

自动变速操纵系统ASCS(Automatic Shift Control System)是一种可以使车辆传动系统实现自动或半自动操纵的系统,ASCS与传统手动固定轴式机械变速系统MT(Manual Transmission)相结合构成了自动机械传动系统AMT(Automated Mechanical Transmission)。本文概述了车辆自动传动装置的类型,介绍了ASCS与AMT的特点和在国内外的发展状况,分析了该技术的发展方向和在中国的市场前景。

双价痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的观测

为了观测两株菌苗ＦＳＭ－２１１７（Ｉｐａ－）、ＦＳ－５４１６（Ｉｐａ＋）免疫后所引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的免疫反应，以小鼠灌胃免疫为模型，应用ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法检测了ＧＡＬＴ中诱导部位派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）和抗原特异性抗体分泌细胞（ＡＳＣ），发现两菌苗株免疫小鼠后，ＰＰ结、ＭＬＮ中福氏、宋内氏抗原ＳＩｇＡ、ＩｇＧ抗体分泌细胞明显增加，尤以ＳＩｇＡ－ＡＳＣ为甚。株间差别无统计学意义。两株菌苗与对照组相比。

基于属性散射中心卷积核调制的SAR目标识别深层网络

卷积神经网络(CNN)的特征提取能力与其参数量有关,一般来说,参数量越多,CNN的特征提取能力越强。但要学好这些参数需要大量的训练数据,而在实际应用中,可用于模型训练的合成孔径雷达(SAR)图像往往是有限的。减少CNN的参数量可以降低对训练样本的需求,但同时也会降低CNN的特征表达能力,影响其目标识别性能。针对此问题,该文提出一种基于属性散射中心(ASC)卷积核调制的SAR目标识别深层网络。由于SAR图像具有电磁散射特性,为了提取更符合SAR目标特性的散射结构和边缘特征,所提网络使用预先设定的具有不同指向和长度的ASC核对少量CNN卷积核进行调制以生成更多卷积核,从而在降低网络参数量的同时保证其特征提取能力。此外,该网络在浅层使用ASC调制卷积核来提取更符合SAR图像特性的散射结构和边缘特征,而在高层使用CNN卷积核来提取SAR图像的语义特征。由于同时使用ASC调制卷积核和CNN卷积核,该网络能够兼顾SAR目标的电磁散射特性和CNN的特征提取优势。使用实测SAR图像进行的实验证明了所提网络可以在降低对训练样本需求的同时保证优秀的SAR目标识别性能。

新型铜铅分离有机抑制剂ASC的研究

研究了 pH和矿浆电位对新型小分子有机抑制剂ASC对黄铜矿和方铅矿的抑制作用的影响 ,结果表明ASC对方铅矿具有很好的抑制作用 ,对黄铜矿没有抑制作用。人工混合矿和实际矿石试验表明采用ASC能够代替重铬酸盐实现铜铅分离。

肼曲嗪和丙戊酸对胆管癌ASC/TMS1基因甲基化的影响

目的研究甲基化酶抑制剂肼曲嗪和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂丙戊酸联合干预对胆管癌细胞QBC939,ASC/TMS1基因甲基化调控的影响,并探讨caspase-1介导的细胞凋亡与ASC/TMS1甲基化的关系。方法利用肼曲嗪和丙戊酸单独或联合干预胆管癌细胞QBC939,用Annexin-FITC和Pro-pidium双染检测干预后细胞凋亡率;用RT-PCR和MSP技术检测干预后ASC/TMS1基因甲基化状态的改变和mRNA的转录水平,用RT-PCR检测干预后caspase-1的mRNA转录水平。结果单用肼曲嗪或丙戊酸盐干预对ASC/TMS1表达无明显恢复,而联用以上两药后ASC/TMS1表达明显增加(P<0.05)。两药合用48h组基因表达量高于合用24h组表达量(P<0.05);且caspase-1表达也明显增加(P<0.05),胆管癌细胞生长明显受抑制,凋亡率明显增加(49.88±0.044)%。结论肼曲嗪和丙戊酸联合干预对ASC/TMS1去甲基化有明显的协同作用。两药联用后胆管癌细胞凋亡率的增加可能系因去甲基化后ASC/TMS1基因表达增加,通过caspase-1途径诱导细胞凋亡。

经腹壁超声、MSCT检查对胆总管结石所致老年ASC的临床应用价值对比

目的探讨经腹壁超声、MSCT检查对胆总管结石所致老年ASC的临床应用价值。方法选取本院2017年6月至2019年7月收治46例总胆管结石所致ASC患者的临床资料。所有患者均进行经腹壁超声、MSCT检查,比较患者所得图像进行分析,以手术检查结果为基准,对经腹壁超声、MSCT对胆总管结石、ASC、结石+ASC检出率。结果经腹壁检查对胆总管结石检出率为76.08%,ASC检出率为73.91%,结石+ASC检出率为78.26%,明显低于MSCT检查(97.82%、95.65%、95.65%,P<0.05)。经腹壁超声检查,发现肝、内胆管及胆总管管壁回声有增强、厚度增厚,肝内胆管明显扩张(1cm到2.6cm)。急性期患者见肝脏肿大,回声增强,其中有3例患者可见肝脓肿表现。MSCT图像表现为胆道增宽,管壁存在广泛性毛糙增厚,胆汁密度低于腔内脓液密度,在患者梗阻段可见“新月征”、“环征”、“靶征”以及致密结节石影。结论MSCT检查对胆总管结石所致老年ASC检出率优于经腹壁超声检查,可为临床治疗方案选择提供参考,值得临床广泛应用。

LPS对支气管哮喘气道炎症中ASC表达的影响

目的探讨凋亡相关点样蛋白（apoptoticspeck-likeproteincontainingacaspaserecruitmentdomain，ASC）在支气管哮喘小鼠肺组织中的表达情况，以及脂多糖（1ipopolysaccharide，LPS）对其的调节作用。方法SPF级雌性C57BLt6小鼠24只，6～8周．18-20g／只，随机分为3组，分别为PBS对照组（A）、哮喘组（B）、LPS干预组（C）。B、C组小鼠以卵蛋白（OVA）致敏并激发，其中C组在激发前给予10μg/只的LPS腹腔注射，连续3d；A组用PBS溶液替代OVA致敏和激发。末次激发24h后，记录各组小鼠的气道反应性监测指标增强呼气间歇（Penh）值。取右上肺组织常规HE染色，光学显微镜下观察组织形态，气管和血管周围炎症细胞浸润情况；行ASC免疫组化，观察其在各组肺组织中的分布情况。采用方差分析进行多组间比较。结果对比A、B组小鼠行为学变化、气道反应性及肺组织病理，显示哮喘小鼠造模成功；C组气道反应性[（1．75±0．46）至（6．53±0．81）1较B组[（4．05±0．22）至（12．07±0．91）]下降，差异有统计学意义（P〈O．05）；免疫组化提示ASC在哮喘模型中较对照组高表达，而10μg的LPS可明显增加哮喘小鼠中气道上皮的ASC表达。结论ASC参与哮喘中炎症反应的发生：一定剂量的LPS可加重哮喘小鼠气道上皮炎症，增强ASC在炎症中的参与，但降低哮喘小鼠气道高反应性。

TMS1/ASC基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系

目的探讨TMS1/ASC(targetofmethylation-inducedsilencing)基因在卵巢癌细胞株及组织中的甲基化状态及该基因表达在卵巢癌发病机制中的作用。方法选取人卵巢癌细胞株A2780,SKOV3,Angle,CAOV3,OVCAR3,SW626,COC1,以及18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测卵巢癌细胞株以及卵巢癌组织中TMS1/ASC基因启动子区域甲基化的状态,用RT-PCR和WesternBlotting法分别检测其mRNA和蛋白的表达。用去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果4株卵巢癌细胞(A2780,SKOV3,Angle,SW626)和7例卵巢癌组织中检测出TMS1/ASC基因的异常甲基化。发生甲基化的细胞株TMS1/ASC基因的mRNA和蛋白表达较未发生甲基化的细胞株明显下降。10例正常卵巢组织中均未发现TMS1/ASC甲基化,差异有统计学意义(P<0·05)。用去甲基化药物5-Aza-CdR处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株SKOV3后,该细胞株中TMS1/ASC基因恢复表达。结论卵巢癌中存在TMS1/ASC基因甲基化,这可能是导致该基因沉默的重要原因,并在卵巢癌的发病机制中起作用。

清肠汤改变aGVHD小鼠肠道菌群及肠组织NLRP3-ASC-IL-18功能轴表达的研究

[目的]观察清肠汤对肠道急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,a GVHD)小鼠粪便中肠道菌群结构、回肠组织中人隐热蛋白(nucleotide-binding oligomerization domain-leucinerichrepeats containing pyrin domain 3,NLRP3)和凋亡相关点样蛋白(apoptosis associated specklike protein containing a CARD,ASC)及血清中白介素18(interleukin-18,IL-18)表达水平的影响,探索清肠汤的防治机制。[方法]40只C57BL/6小鼠随机分为4组,包括空白组(不造模,生理盐水灌胃),模型组(a GVHD模型,造模前生理盐水灌胃),清肠汤组(造模前清肠汤灌胃)及阳性对照组(造模前青霉素灌胃)。除空白组,其它小鼠通过尾静脉注射脾细胞和骨髓细胞建立a GVHD模型。造模14d后观察各组临床症状并评分,分别利用16S r RNA技术比较肠道菌群结构,半定量RT-PCR和Western-blot方法检测各组回肠组织中NLRP3、ASC m RNA和蛋白表达,ELISA法检测造模前后血清中IL-18表达情况。[结果]清肠汤组及阳性对照组小鼠临床症状均较模型组小鼠得到改善;a GVHD小鼠造模后肠道菌群发生改变,大肠埃希菌数量显著增加,而乳酸杆菌减少,清肠汤组可逆转此改变(P<0.01);清肠汤组和阳性对照组小鼠回肠中NLRP3、ASC m RNA及蛋白表达低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);造模后,空白组血清IL-18表达水平无明显改变,其余3组均高于造模前及空白组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),其中清肠汤组和阳性对照组表达低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]清肠汤可改善小鼠肠道a GVHD症状,并可逆转肠道菌群结构及下调肠道中NLRP3、ASC及血清IL-18的表达。

双价痢疾菌苗不同途径免疫小鼠对脾细胞及GALT中ASC影响的实验研究

目的：观察侵袭蛋白表达阴性（FSM-2117）和阳性（FS-5416）的两株双价痢疾菌苗经不同途径免疫小鼠后，脾细胞和粘膜相关淋巴组织（gut associated lymphoid tissues，GALT）中抗体分泌细胞（antibody secreting cell，ASC）的变化，以探讨免疫途径及侵袭蛋白表达与否对痢疾菌苗免疫效果的影响。方法： BALB／c小鼠随机分为 3组，每组 20只， FSM－2ll7或 FS-5416 4 x10^7CFU分别经滴鼻、灌胃及肠内注射3种途径免疫小鼠，间隔2w，第3次免疫后7d活杀分离脾、小肠pp及MIN淋巴细胞，采用BA－ELISASPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA和IgG分泌细胞。结果：滴鼻途径及小肠内免疫都能够诱生脾细胞特异性IgA-ASC、IgG-ASC显著升高（P＜0．01）；仅滴鼻免疫组Ipa+株较Ipa-株升高显著（P＜0．01）。滴鼻和小肠内免疫同时诱生肠GALT中派伊尔小结（Payer's patch,PP)和肠系膜淋巴结（mesenteric lymph node,MLN)淋巴细胞ASC显著升高（P＜0．05，P＜0．01），但株间比较无统计学差异。而同等剂量的灌胃免疫未能诱发脾细胞及GALT特异性ASC升高。结论：鼻粘膜和小肠内免疫可以有效地诱导脾脏和GALT淋巴细胞的免疫反应，且显著降低免疫原用量（本实验滴鼻剂量为常规灌胃的1/20），是一个安全有效的免疫途径。研?