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ASIC3-shRNA干扰慢病毒质粒的构建及其效率的鉴定
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作者 曲雪菲 华佳 +2 位作者 吴进 龚爱华 蒋鹏 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2019年第1期58-61,66,共5页
目的:构建酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)干扰慢病毒质粒并进行效率鉴定。方法:利用Gen Bank获取ASIC3基因序列并合成相应干扰序列,通过T4DNA连接酶将ASIC3基因片段连接至环状Plko. 1-Puro载体,将重组质粒转染293... 目的:构建酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)干扰慢病毒质粒并进行效率鉴定。方法:利用Gen Bank获取ASIC3基因序列并合成相应干扰序列,通过T4DNA连接酶将ASIC3基因片段连接至环状Plko. 1-Puro载体,将重组质粒转染293T细胞获取慢病毒,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测病毒滴度;将包装之后的慢病毒感染PC12、BV2、N2a细胞,分别分为ASIC3-shRNA组和EGFP-shRNA组(阴性对照),经慢病毒感染后用qRT-PCR和免疫印迹技术分别检测ASIC3 mRNA和蛋白表达。结果:合成的ASIC3干扰序列成功连接至Plko. 1-Puro载体; qRT-PCR及DNA测序鉴定结果证实,ASIC3-shRNA质粒构建成功; qRT-PCR与免疫印迹结果表明,在PC12、BV2、N2a细胞中,与EGFP-shRNA组相比,ASIC3-shRNA组ASIC3 mRNA和蛋白表达量均明显下调(P <0. 05)。病毒滴度约为1×109IU/mL。结论:ASIC3-shRNA干扰慢病毒质粒构建成功。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道3 干扰质粒 慢病毒 疼痛
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CGRP/ASIC3参与大鼠食道扩张内脏痛模型中背根神经节神经元高敏感机制的研究
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作者 许草 顾勇 +2 位作者 石亚婷 汪桂祥 牛小平 《沈阳医学院学报》 2023年第1期19-23,29,共6页
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和酸敏感离子通道3(ASIC3)参与大鼠食道扩张(ED)内脏痛模型中脊髓背根神经节(DRG)神经元高敏感发生的机制。方法:将50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组(n=30)和对照组(n=20)。腹腔麻醉50只SD大鼠,暴露大... 目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和酸敏感离子通道3(ASIC3)参与大鼠食道扩张(ED)内脏痛模型中脊髓背根神经节(DRG)神经元高敏感发生的机制。方法:将50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组(n=30)和对照组(n=20)。腹腔麻醉50只SD大鼠,暴露大鼠食管下段,利用PE-240管对实验组大鼠的胸段食管进行1 h重复ED刺激,对照组则不予处理。分离并培养50只大鼠胸段脊髓DRG神经元,根据实验组培养液中有无加入CGRP拮抗剂(CGRP8-37)将其进一步分为ED组(n=15)和ED+CGRP8-37组(n=15)。采用全细胞膜片钳技术记录DRG神经元动作电位及ASIC3电流变化;免疫荧光法检测DRG神经元中CGRP、ASIC3的表达定位;逆转录实时聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测CGRP与ASIC3 mRNA表达;Western blot法检测CGRP与ASIC3蛋白表达。结果:ED组DRG神经元动作电位数较对照组显著增加(P<0.01);免疫荧光结果示CGRP与ASIC3在DRG神经元中存在共表达;与对照组比较,ED组CGRP与ASIC3的mRNA、蛋白水平显著上调(P<0.01);且CGRP的mRNA、蛋白表达与ASIC3的mRNA、蛋白表达均呈正相关(r分别为0.833、0.981,P<0.01);ED组和ED+CGRP8-37组ASIC3电流较对照组显著增加(P<0.01),ED+CGRP8-37组ASIC3电流较ED组明显减少(P<0.01)。结论:CGRP和ASIC3共同参与了ED模型中DRG神经元的超敏反应,CGRP参与调节ASIC3电流变化可能是DRG神经元高敏感发生的重要机制之一。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道3 降钙素基因相关肽 脊髓背根神经节 食管扩张 内脏高敏感
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甘草附子汤对类风湿关节炎大鼠ASIC3和HIF-1α表达的影响 被引量:16
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作者 黄顺 林清华 +5 位作者 王祖庆 李德仙 金泽旭 周兵望 王茂林 王永萍 《中医药导报》 2018年第18期11-14,24,共5页
目的:观察甘草附子汤对类风湿关节炎大鼠血清和滑膜组织中ASIC3和HIF-1α表达影响,探讨甘草附子汤治疗RA的相关机制。方法:40只SPF级Wistar大鼠随机分为4组,每组10只,除正常组外,其余组等量的不完全氟氏佐剂和牛Ⅱ型胶原乳化剂造模。甘... 目的:观察甘草附子汤对类风湿关节炎大鼠血清和滑膜组织中ASIC3和HIF-1α表达影响,探讨甘草附子汤治疗RA的相关机制。方法:40只SPF级Wistar大鼠随机分为4组,每组10只,除正常组外,其余组等量的不完全氟氏佐剂和牛Ⅱ型胶原乳化剂造模。甘草附子汤(9.75g/kg),醋酸地塞米松(7.5 mg/kg),连续灌胃20 d。分别拍摄大鼠足跖X射线,用ELISA检测大鼠血清中HIF-1α和ASIC3表达,免疫组化法检测关节滑膜组织中HIF-1α和ASIC3蛋白表达。结果:模型组大鼠血清和滑膜组织中ASIC-3和HIF-1α含量明显高于正常组(P<0.01),甘草附子汤组大鼠滑膜组织和血清中ASIC-3、HIF-1α含量明显低于模型组(P<0.01)。结论:甘草附子汤可以降低RA模型大鼠血清和滑膜组织中ASIC3、HIF-1α含量,可能是该方治疗RA的作用机制之一。 展开更多
关键词 甘草附子汤 类风湿关节炎 HIF- asic3 大鼠
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与感觉相关的ASIC3、TRPV1基因敲除小鼠繁殖性能的观察与痛阈的比较 被引量:3
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作者 石宏 吉长福 +6 位作者 尚红燕 辛娟娟 杨兆坤 宿杨帅 王晓宇 何伟 景向红 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第5期1-4,共4页
目的观察酸敏感离子通道亚基3(ASIC3,又名ACCN3)基因敲除ASIC3-/-小鼠、香草酸瞬时受体亚型I(TRPV1)基因敲除TRPV1-/-小鼠的繁殖性能,并对其基础痛阈值进行测定和比较。方法选用成熟的未交配过的ASIC3-/-和TRPV1-/-纯合子小鼠分别进行... 目的观察酸敏感离子通道亚基3(ASIC3,又名ACCN3)基因敲除ASIC3-/-小鼠、香草酸瞬时受体亚型I(TRPV1)基因敲除TRPV1-/-小鼠的繁殖性能,并对其基础痛阈值进行测定和比较。方法选用成熟的未交配过的ASIC3-/-和TRPV1-/-纯合子小鼠分别进行繁殖交配,统计两种小鼠的妊娠率、窝产仔数、离乳率、头胎产仔数等,并对两种小鼠的基础痛阈值进行测定比较,对照组为同源野生C57BL/6小鼠。结果 ASIC3-/-小鼠的妊娠率、窝产仔数、离乳率较TRPV1-/-小鼠偏低,而TRPV1-/-小鼠妊娠率、窝产仔数、离乳率相对稳定;ASIC3-/-组的基础机械痛阈值与C57BL/6对照组相比显著升高(P<0.001),而热痛阈值没有明显改变;TRPV1-/-组的基础热痛阈值与C57BL/6对照组显著升高(P<0.001)。结论ASIC3-/-小鼠的繁殖能力较TRPV1-/-小鼠弱;ASIC3-/-小鼠的机械痛敏感性下降,TRPV1-/-小鼠的热痛敏感性下降。 展开更多
关键词 asic3- - TRPV1- - 小鼠 繁殖性能 基因敲除 痛阈
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2-溴棕榈酸调节背根神经节中ASIC3蛋白的膜定位缓解大鼠骨癌痛(英文) 被引量:1
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作者 唐琼 李鸣粤 +1 位作者 余良主 朱海丽 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期884-890,共7页
骨癌痛(BCP)是恶性肿瘤患者最常见的疼痛之一,严重影响患者的生活质量。BCP的分子作用机制和新药研发都迫在眉睫。2-溴棕榈酸(2-BP)作为一种蛋白质棕榈化抑制剂在病理性疼痛中有镇痛效果,而在骨癌痛中作用仍不清楚。酸敏感离子通道3型(A... 骨癌痛(BCP)是恶性肿瘤患者最常见的疼痛之一,严重影响患者的生活质量。BCP的分子作用机制和新药研发都迫在眉睫。2-溴棕榈酸(2-BP)作为一种蛋白质棕榈化抑制剂在病理性疼痛中有镇痛效果,而在骨癌痛中作用仍不清楚。酸敏感离子通道3型(ASIC3),作为一个重要的疼痛因子能否受到2-BP的调控也未知。为了检测2-BP在骨癌痛中的作用,并研究其对背根神经节(DRG)中ASIC3的调控,本文开展了相关工作。1)首先建立BCP大鼠模型,将大鼠乳腺癌细胞(MRMT-1)注射入雌大鼠胫骨骨髓腔内,21 d后通过X射线和机械痛检测,发现与假性手术组相比,BCP模型大鼠的胫骨被破坏;同时,BCP组大鼠的机械疼痛值明显上升(假性手术组PWT vs.BCP PWT:16.1±1.5 vs.5.3±1.5;P<0.01);表明大鼠乳腺癌骨转移疼痛模型成功构建。2)蛋白质免疫印迹检测结果显示,与正常和假性手术组相比,BCP大鼠L4-L6 DRG中酸敏感离子通道3蛋白表达上调(0.63±0.03,0.64±0.1和1.07±0.05)。3)在术后第21 d,给BCP大鼠腹腔注射2-BP,发现给药组BCP大鼠的机械疼痛值下调(6 h后,PWT对照vs.PWT 2-BP:6.9±2.0 vs.10.8±1.6,P<0.01),表明2-BP在骨癌痛模型大鼠中具有镇痛作用。4)蛋白质免疫印迹结果显示,与给药前相比,2-BP处理后降低了BCP大鼠L4-L6 DRG中膜上ASIC3蛋白的表达(1.05±0.13,0.66±0.12)。同时,在ASIC3介导的酸痛模型中,2-BP给药降低大鼠震颤的次数(对照组为27±1.8次,2-BP组为10±1.5次),表明2-BP给药阻断ASIC3介导的酸痛。5)在ASIC3转染的SH-SY5Y细胞中,与对照相比,2-BP给药后明显降低膜上ASIC3蛋白表达量(1.0±0.2,0.58±0.10)。这些结果表明,2-BP在骨癌痛中具有镇痛作用,其镇痛机制涉及到调控背根神经节中膜上酸敏感离子通道3的表达。 展开更多
关键词 骨癌痛 2-溴棕榈酸 背根神经节 酸敏感离子通道3
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电针“内关”穴对心肌缺血大鼠ASIC2、ASIC3蛋白及基因表达影响的实验研究 被引量:3
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作者 王树东 董宝强 张立德 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第6期1360-1363,共4页
目的:实验通过电针"内关"穴,观察其对心肌缺血大鼠ASIC2、ASIC3蛋白及基因表达的影响。方法:选用健康SPF级雄性SD大鼠50只,体质量(230±50)g,由辽宁长生生物技术有限公司提供,采用随机对照方法分为正常组(A)、模型组(B)... 目的:实验通过电针"内关"穴,观察其对心肌缺血大鼠ASIC2、ASIC3蛋白及基因表达的影响。方法:选用健康SPF级雄性SD大鼠50只,体质量(230±50)g,由辽宁长生生物技术有限公司提供,采用随机对照方法分为正常组(A)、模型组(B)、内关组(C)、列缺组(D)、非经非穴组(E),每组10只。四肢皮下多点注射异丙肾上腺素。剂量:85 mg/kg,日1次,连续两次成模。造模成功后,分别进行电针治疗。1周后,各组SD大鼠腹腔注射水合氯醛(1 m L/100 g),活体分离大鼠左心室心肌,置于EP管中,放入-70℃冰箱,Western blot法检测各组ASIC2、ASIC3蛋白表达,Realtime RT-PCR法检测各组ASIC2、ASIC3的基因表达,并应用2^(-△Ctof)得出各组大鼠ASIC2、ASIC3的基因表达多少。腹主动脉抽血,离心后通过ELISA法检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果:电针"内关"穴可降低心肌缺血大鼠ASIC2、ASIC3蛋白及基因表达,降低肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。结论:电针"内关"穴可降低心肌缺血大鼠ASIC2、ASIC3蛋白及基因表达,从而抑制酸敏感离子通道开放,有效改善心肌缺血大鼠心肌细胞的损伤。 展开更多
关键词 内关 asic2 asic3 蛋白 基因
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TRPV1和ASIC3基因敲除小鼠的寿命观察 被引量:5
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作者 石宏 何伟 +8 位作者 王晓宇 胡玲 宿杨帅 辛娟娟 杨兆坤 韩旭 高洁 张毅 景向红 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第10期78-81,89,共5页
目的观察酸敏感离子通道亚基3(ASIC3,又名ACCN3)基因敲除ASIC3-/-小鼠、香草酸瞬时受体亚型I(TRPV1)基因敲除TRPV1-/-小鼠的生存曲线,为进一步繁殖使用该品系小鼠提供参考。方法选用105只基因敲除小鼠,其中ASIC3-/-鼠44只,TRPV1-/-鼠61... 目的观察酸敏感离子通道亚基3(ASIC3,又名ACCN3)基因敲除ASIC3-/-小鼠、香草酸瞬时受体亚型I(TRPV1)基因敲除TRPV1-/-小鼠的生存曲线,为进一步繁殖使用该品系小鼠提供参考。方法选用105只基因敲除小鼠,其中ASIC3-/-鼠44只,TRPV1-/-鼠61只。观察正常喂养两种小鼠500 d以内的生存情况,并绘制生存曲线,进行生存分析。结果 ASIC3-/-小鼠与TRPV1-/-小鼠随着时间的延长,生存概率降低,经比较TRPV1-/-小鼠的生存概率优于ASIC3-/-小鼠的生存概率,两种小鼠的生存时间存在统计学差异,(P=0.004,P<0.01),两种小鼠中不同性别之间的生存曲线无显著学差异。结论 TRPV1-/-小鼠的生存概率优于ASIC3-/-小鼠的生存概率。而两种鼠不同性别之间的生存概率则基本相当。 展开更多
关键词 asic3 -/- TRPV1 -/- 生存分析 小鼠 基因敲除
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ASIC3在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达 被引量:3
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作者 王莎 吴白雪 +3 位作者 刘超阳 秦光成 周冀英 陈力学 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第12期900-906,共7页
目的:本文通过检测酸敏感离子通道3(acid sensing ion channel 3,ASIC3)在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在慢性偏头痛发病中的作用及可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为7组,假... 目的:本文通过检测酸敏感离子通道3(acid sensing ion channel 3,ASIC3)在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在慢性偏头痛发病中的作用及可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=18),模型组(n=18),模型+溶剂组(n=5),模型+ASIC3抑制剂5μM组(n=5),模型+ASIC3抑制剂10μM组(n=5),模型+ASIC3激动剂100μM组(n=5),模型+ASIC3激动剂200μM组(n=5)。使用Von Frey纤维丝测定大鼠眶周及足底的机械痛阈值,实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测ASIC3 m RNA,蛋白质印迹法(Western blotting)检测ASIC3、CGRP蛋白表达,免疫荧光技术检测ASIC3和CGRP在TNC部位的表达和定位情况。结果:(1)硬脑膜反复给予"炎性汤"后,大鼠眶周及足底的机械痛阈值显著降低(P<0.01);(2)与Sham组相比,CM组大鼠ASIC3在TNC的表达明显升高(P<0.05);(3)给予ASIC3抑制剂后,大鼠眶周及足底机械痛阈值均显著增加(P<0.05),CGRP蛋白的表达也明显降低(P<0.05),而给予ASIC3激动剂后,大鼠眶周及足底机械痛阈值均显著降低(P<0.05),CGRP蛋白的表达明显增加(P<0.05);(4)免疫荧光检测显示在TNC部位,ASIC3主要表达于神经元,且与CGRP有少量共表达。结论:ASIC3在慢性偏头痛大鼠TNC部位表达上调,且通过调节机械痛阈值的变化及CGRP的表达参与了慢性偏头痛的发生发展过程。 展开更多
关键词 慢性偏头痛 asic3 三叉神经脊束尾核
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ASIC3在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎模型慢性骨盆疼痛中的表达
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作者 郑明星 刘孝东 +3 位作者 范世成 王耀众 郎磊 郭彩芬 《昆明医科大学学报》 CAS 2017年第5期10-15,共6页
目的探讨三型酸敏感离子通道(ASIC3)与Ⅲ型前列腺炎(CPPS/CP)慢性骨盆疼痛的关系.方法选取雄性SD大鼠45只,分为对照组、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组和干预组,每组15只.建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第5、10、20、30、40 d于对照组... 目的探讨三型酸敏感离子通道(ASIC3)与Ⅲ型前列腺炎(CPPS/CP)慢性骨盆疼痛的关系.方法选取雄性SD大鼠45只,分为对照组、Ⅲ型前列腺炎模型/EAP组和干预组,每组15只.建立EAP模型过程中,予Von-Frey测痛纤维于第5、10、20、30、40 d于对照组和EAP组进行骨盆区域痛觉测试.建模成功后,干预组予阿米洛利连续腹腔内注射10 d,每2 d对其及EAP组进行痛觉测试.选取3组大鼠的前列腺,进行HE染色染色病理学检查;并通过免疫组化和Western blot方法检测ASIC3的表达.结果 Von-Frey测痛结果显示:EAP模型组大鼠骨盆疼痛表现较对照组明显,干预组大鼠骨盆疼痛表现较EAP组减轻.HE染色提示:EAP组大鼠前列腺间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血,腺腔不规则改变.对照组未见明显炎症细胞浸润.与EAP组对比,干预组腺体充血及炎症细胞浸润情况无明显改变.免疫组化染色提示:EAP组大鼠的前列腺组织中,ASIC3表达较对照组表达增加(主要表达于细胞核与细胞浆中)(P<0.01),干预组较EAP组减少(P<0.05).Western blot提示:EAP组大鼠的前列腺组织中,ASIC3较对照组表达增加(P<0.01),干预组较EAP组减少(P<0.01).结论 EAP大鼠前列腺组织中ASIC3表达增加,ASIC3是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛介质之一,可作为干预及治疗Ⅲ型前列腺炎的其中一个靶向指标. 展开更多
关键词 Ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎 慢性骨盆疼痛 三型酸敏感离子通道 大鼠模型 阿米洛利
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髓核致炎大鼠背根神经节中NF-κB和ASICs上调机制的探讨 被引量:1
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作者 朱杭 林士明 +4 位作者 王栋 诸力 何永江 王坚 潘浩 《浙江医学》 CAS 2018年第2期116-120,125,共6页
目的通过观察核因子-κB(NF-κB)和酸敏感离子通道(ASIC)信号通路阻断剂PDTC和阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中NF-κB和ASIC3表达的影响,探索NF-κB和ASIC3在髓核组织诱导神经根性疼痛的可能机制。方法将80只大鼠采用随机数字... 目的通过观察核因子-κB(NF-κB)和酸敏感离子通道(ASIC)信号通路阻断剂PDTC和阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中NF-κB和ASIC3表达的影响,探索NF-κB和ASIC3在髓核组织诱导神经根性疼痛的可能机制。方法将80只大鼠采用随机数字表法分为5组,对照组、模型组、阿米洛利组、PDTC组和阿米洛利组+PDTC组,每组16只。对照组在暴露L5DRG后直接缝合。模型组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5DRG上,缝合切口。阿米洛利组和PDTC组在模型组的基础上,分别于术后2周内每天腹腔内注射20μg/kg阿米洛利和20μg/kg PDTC。阿米洛利+PDTC组在模型组基础上,术后2周内每天腹腔内注射20μg/kg阿米洛利和20μg/kg PDTC。对照组和模型组不进行药物干预。造模成功后分别于术后2、4、6、8、10、12d检测大鼠后足机械刺激缩足阈值(PWT)。采用RT-PCR法和Western blot法测定ASIC3、NF-κB p65、TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达水平。术后1、3、7、14d采用ELISA法检测外周血及DRG上清液中的TNF-α和IL-6水平,并检测一氧化氮(NO)水平。结果与对照组比较,术后12d时模型组中大鼠后足的PWT显著下降(P<0.01),术后14d模型组DRG中NF-κB p65和ASIC3的m RNA和蛋白表达显著上调(均P<0.05),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均显著上调(均P<0.01)。与模型组比较,阿米洛利组、PDTC组和阿米洛利+PDTC组大鼠后足PWT在8d内下降,之后逐渐增加,术后10、12d大鼠后足PWT明显高于模型组(均P<0.01),术后14d DRG中NF-κB p65和ASIC3的m RNA和蛋白表达明显下降(均P<0.05),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均显著降低(均P<0.01)。结论 NF-κB和ASIC3可相互影响,通过抑制NO及多种细胞炎性因子(TNF-α和IL-6)的表达,减轻髓核组织对DRG的炎症损伤所致的痛觉过敏,减缓神经根性疼痛。 展开更多
关键词 椎间盘 髓核 核因子-ΚB asic3 炎症
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酸敏感离子通道3在关节炎疼痛中的作用 被引量:2
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作者 李霞 袁凤来 +5 位作者 陈飞虎 赵懿青 陆伟国 胡伟 张腾越 吴繁荣 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第9期1064-1069,共6页
疼痛相关的酸敏感离子通道3(Acid-sensingion channels 3,ASIC3)主要分布在周围神经系统,是对pH值改变最敏感的酸受体。最近,越来越多的研究证实,在脊髓背根神经节(DRG)丰富表达的ASIC3,与痛觉及伤害性感受密切相关,在慢性炎性疼痛的病... 疼痛相关的酸敏感离子通道3(Acid-sensingion channels 3,ASIC3)主要分布在周围神经系统,是对pH值改变最敏感的酸受体。最近,越来越多的研究证实,在脊髓背根神经节(DRG)丰富表达的ASIC3,与痛觉及伤害性感受密切相关,在慢性炎性疼痛的病理过程中发挥重要的作用。研究表明在炎性痛模型中可以上调脊髓背角ASIC3在转录和蛋白水平的表达;阻断或敲除ASIC3基因(ASIC3-/-)能明显抑制炎症性关节痛。上述各点提示,在生理或病理情况下,脊髓背角ASIC3对脊髓水平的感觉信息传递特别是痛觉的传导可能发挥着重要作用,这可能是关节炎疼痛的治疗靶点。本文将ASIC3的生物学特征以及它在关节炎疼痛和治疗中的作用作一综述。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道3 炎症 疼痛 痛觉增敏 背根神经节 靶点
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大鼠食道扩张内脏痛模型的建立及酸敏感离子通道3的功能变化及意义 被引量:1
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作者 牛小平 刘少锋 王运东 《医学理论与实践》 2017年第23期3449-3451,3459,共4页
目的:通过建立大鼠食道扩张(Esophageal distensions,ED)内脏痛动物模型并研究其脊髓背根神经元(DRG)中酸敏感性离子通道3(ASIC3)的表达及功能的改变,探讨ASIC3参与ED内脏痛模型中DRG神经元高敏感性发生的可能机制。方法:50只SD大鼠随... 目的:通过建立大鼠食道扩张(Esophageal distensions,ED)内脏痛动物模型并研究其脊髓背根神经元(DRG)中酸敏感性离子通道3(ASIC3)的表达及功能的改变,探讨ASIC3参与ED内脏痛模型中DRG神经元高敏感性发生的可能机制。方法:50只SD大鼠随机分成2组:ED动物模型组30只,对照组20只;免疫荧光检测DRG神经元ASIC3的表达,膜片钳分析技术记录ED刺激后DRG神经元兴奋性改变及ASIC3电流变化,并与对照组比较。结果:免疫荧光检测发现,ASIC3在DRG细胞中表达定位于细胞膜及细胞质;在给予大鼠1h的重复ED刺激之后,相应节段的DRG神经元受到去极化刺激时产生的动作电位数量明显增多,且ED大鼠ASIC3通道离子电流也明显增加。结论:食道球囊扩张可成功建立食道内脏痛动物模型,DRG神经元中ASIC3表达与功能的改变可能是导致GERD食管内脏高敏感发生的原因之一。 展开更多
关键词 酸敏感性离子通道3 脊髓背根神经元 球囊扩张 内脏高敏
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酸敏感离子通道3及其基因敲除小鼠特性的研究进展 被引量:2
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作者 徐坤 王巍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第7期1653-1655,共3页
酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。... 酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)是对p H值改变最敏感的酸受体。在对ASIC3及其基因敲除小鼠(ASIC3-/-小鼠)的研究中发现,ASIC3参与痛觉、酸味觉、感受伤害性刺激、心肌缺血等多种生理和病理过程,并发挥重要作用。这些成果为在分子水平研究针刺治疗疾病的机制提供条件和基础。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道3 基因敲除 小鼠
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循经取穴针刺对心肌缺血基因敲除(ASIC3^(-/-))小鼠心脏氯离子通道相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 苏妆 吴兆利 +4 位作者 白增华 丛培伟 李春日 耿晓 陈以国 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2041-2044,共4页
目的对比观察电针对心肌缺血基因敲除(ASIC3^(-/-))小鼠心肌细胞氯离子通道相关基因表达的影响,探讨循经取穴针刺治疗心肌缺血的作用机制。方法 ASIC3^(-/-)小鼠随机分为6组:空白组、模型组、电针内关穴组、电针列缺穴组、电针足三里穴... 目的对比观察电针对心肌缺血基因敲除(ASIC3^(-/-))小鼠心肌细胞氯离子通道相关基因表达的影响,探讨循经取穴针刺治疗心肌缺血的作用机制。方法 ASIC3^(-/-)小鼠随机分为6组:空白组、模型组、电针内关穴组、电针列缺穴组、电针足三里穴组、电针非经非穴组。采用皮下异丙肾上腺素注射复制心肌缺血模型。电针治疗组每日治疗1次,每次20min。针刺干预7d后,采用Real-time PCR法检测ASIC3^(-/-)小鼠心肌clc2、clc3、clca1、cftr的基因表达水平。结果与模型组比较,除非经非穴组的clc3、clca1基因外,其余各组ASIC3^(-/-)小鼠心肌组织clc2、clc3、clca1、cftr的基因表达量均显著降低(P<0.05);与内关组比较,列缺组、足三里组、非经非穴组上述基因表达水平的差异有统计学意义(P<0.05)。结论内关穴对于心肌缺血的保护作用具有循经特异性效应,这种效应可能是通过对心肌组织氯离子通道相关基因的靶向性调控作用实现的。 展开更多
关键词 循经特异性 电针 心肌缺血 氯离子通道 基因敲除(asic3-/-)小鼠
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3型酸敏感离子通道在髓核致炎大鼠背根神经节中的表达研究 被引量:1
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作者 林士明 陈亦鹏 +3 位作者 潘浩 王栋 贾高永 胡庆丰 《浙江医学》 CAS 2017年第24期2205-2209,共5页
目的通过观察3型酸敏感离子通道(ASIC3)信号通路阻断剂阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中ASIC3表达的影响,探索ASIC3在髓核组织诱导发生根性疼痛过程中的可能机制。方法 48只大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组和阿米洛利组... 目的通过观察3型酸敏感离子通道(ASIC3)信号通路阻断剂阿米洛利对髓核致炎大鼠背根神经节(DRG)中ASIC3表达的影响,探索ASIC3在髓核组织诱导发生根性疼痛过程中的可能机制。方法 48只大鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组和阿米洛利组3组,每组16只。对照组在暴露L5DRG后直接缝合。模型组取出大鼠尾部的髓核组织置于暴露的L5DRG上,缝合切口。阿米洛利组在模型组的基础上,于术后2周内每天腹腔内注射20μg/kg阿米洛利。对照组和模型组不进行药物干预。造模成功后分别于术后2、4、6、8、10、12d检测大鼠后足的机械刺激缩足阈值(PWT)。采用RT-PCR法和Western blot法测定ASIC3、TNF-α和IL-6 m RNA和蛋白表达水平。术后1、3、7和14d采用ELISA法检测外周血及DRG上清液中的TNF-α和IL-6水平,并检测一氧化氮(NO)水平。结果与对照组比较,术后12d时模型组大鼠后足的PWT显著下降(P<0.01),术后14d模型组大鼠DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平上调(均P<0.01),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均上调(均P<0.01)。与模型组比较,阿米洛利组大鼠后足的PWT在8d内下降,之后逐渐增加,术后10和12d大鼠后足的PWT明显高于模型组(均P<0.01),术后14d DRG中ASIC3的m RNA和蛋白水平下降(均P<0.05),外周血和DRG中NO、TNF-α、IL-6水平均显著降低(均P<0.01)。结论ASIC3可能在由髓核突出引起的神经根性疼痛中起重要作用。ASIC3可能通过上调NO及细胞炎性因子(TNF-α和IL-6)的表达并增强这些介质的疼痛加强作用,诱导痛觉过敏从而引起神经根性疼痛。 展开更多
关键词 椎间盘 髓核 3型酸敏感离子通道 炎症
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Distinct roles of ASIC3 and TRPV1 receptors in electroacupuncture-induced segmental and systemic analgesia 被引量:8
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作者 Juanjuan Xin Yangshuai Su +7 位作者 Zhaokun Yang Wei He Hong Shi Xiaoyu Wang Ling Hu Xiaochun Yu Xianghong Jing Bing Zhu 《Frontiers of Medicine》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期465-472,共8页
Previous studies have demonstrated the effects of different afferent fibers on electroacupuncture (EA)- induced analgesia. However, contributions of functional receptors expressed on afferent fibers to the EA analge... Previous studies have demonstrated the effects of different afferent fibers on electroacupuncture (EA)- induced analgesia. However, contributions of functional receptors expressed on afferent fibers to the EA analgesia remain unclear. This study investigates the roles of acid-sensing ion channel 3 (ASIC3) and transient receptor potential vanifioid 1 (TRPV1) receptors in EA-induced segmental and systemic analgesia. Effects of EA at acupoint ST36 with different intensities on the C-fiber reflex and mechanical and thermal pain thresholds were measured among the ASIC3-/-, TRPV1-/-, and C57BL/6 mice. Compared with C57BL/6 mice, the ipsilateral inhibition of EA with 0.8 C-fiber threshold (0.8Tc) intensity on C-fiber reflex was markedly reduced in ASIC3-/- mice, whereas the bilateral inhibition of 1.0 and 2.0Tc EA was significantly decreased in TRPV1-/- mice. The segmental increase in pain thresholds induced by 0.3 mA EA was significantly reduced in ASIC3-/- mice, whereas the systemic enhancement of 1.0 mA EA was markedly decreased in TRPV1-/- mice. Thus, segmental analgesia of EA with lower intensity is partially mediated by ASIC3 receptor on Aβ-fiber, whereas systemic analgesia induced by EA with higher intensity is more likely induced by TRPV1 receptor on Aδ- and C-fibers. 展开更多
关键词 ELECTROACUPUNCTURE ANALGESIA asic3 TRPV1 C-fiber reflex
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NGF、ASIC3与实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎骨盆疼痛的相关性研究 被引量:5
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作者 郑明星 刘孝东 +3 位作者 范世成 余新龙 朱波 沈洁 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期39-43,共5页
目的探讨神经生长因子(NGF)、三型酸敏感离子通道(ASIC3)在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎的前列腺组织中表达的意义。方法选取性成熟雄性SD大鼠30只,分为对照组(0.9%NaCl于盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型组[实验性自... 目的探讨神经生长因子(NGF)、三型酸敏感离子通道(ASIC3)在实验性大鼠Ⅲ型前列腺炎的前列腺组织中表达的意义。方法选取性成熟雄性SD大鼠30只,分为对照组(0.9%NaCl于盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射)、Ⅲ型前列腺炎模型组[实验性自发免疫性前列腺炎(EAP)组,完全弗氏佐剂与前列腺组织混悬液于盆腔区域皮下、双侧肩胛皮下多点注射],每组15只。建立EAP模型过程中,于建模第0、5、10、20、30、40天予Von-Frey测痛纤维进行骨盆区域痛觉测试。建模成功后取大鼠的前列腺组织,进行HE染色观察病理学改变;通过免疫组化和Western blot方法检测NGF及ASIC3的蛋白表达。结果 Von-Frey测痛结果显示:EAP组大鼠骨盆疼痛表现较对照组明显。HE染色结果显示:EAP组大鼠前列腺间质内淋巴细胞和中性粒细胞浸润,腺体周围充血;对照组未见明显炎症细胞浸润。免疫组化染色和Western blot结果显示:EAP组大鼠的前列腺组织中,NGF及ASIC3蛋白表达(主要表达于细胞核与细胞浆中)较对照组增加(P<0.01)。结论EAP大鼠前列腺组织中NGF及ASIC3表达增加,NGF及ASIC3可能是导致Ⅲ型前列腺炎骨盆区域疼痛的重要介质,有望作为干预及治疗Ⅲ型前列腺炎的靶向指标。 展开更多
关键词 Ⅲ型前列腺炎/慢性前列腺炎 慢性骨盆疼痛 神经生长因子 三型酸敏感离子通道 Von-Frey
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苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠关节滑膜ASIC3表达的影响 被引量:9
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作者 罗德梅 刘青 +1 位作者 董旭南 罗莉 《中华全科医学》 2017年第11期1839-1842,1866,共5页
目的类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病程中由于炎症导致关节局部组织酸化,酸敏感离子通道(acid-sensitive ion channels,ASICs)表达与大鼠关节软骨的破坏密切相关。本研究从多途径观察苦杏仁苷对胶原诱导性关节炎(typeⅡcolla... 目的类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病程中由于炎症导致关节局部组织酸化,酸敏感离子通道(acid-sensitive ion channels,ASICs)表达与大鼠关节软骨的破坏密切相关。本研究从多途径观察苦杏仁苷对胶原诱导性关节炎(typeⅡcollagen induced arthritis,CIA)大鼠关节滑膜的免疫应答调节,探讨苦杏仁苷抗RA的作用机制。方法选取45只Wistar雌性大鼠,随机抽取8只为空白对照组。35只造模成功的CIA大鼠又随机分为模型组5只,雷公藤多甙组(即阳性对照药组)、苦杏仁苷高剂量组、苦杏仁苷低剂量组各10只。空白对照组和CIA模型组予以0.9%生理盐水,雷公藤多甙组予以雷公藤多甙1 mg/(kg·d),苦杏仁苷高剂量组予以120 mg/(kg·d),苦杏仁苷低剂量组予以60 mg/(kg·d),1次/d连续灌胃给药28 d。经腹腔麻醉,股动脉采血,常规分离血清用于IL-1β、s ICAM-1检测;分离左膝关节滑膜组织用40 g/L多聚甲醛固定作为HE染色标本;分离右膝关节滑膜组织-80℃中保存用于Western blot ASIC3蛋白检测。同时提取脑组织于-80℃中保存作为阳性对照。结果 HE染色显示CIA模型组滑膜细胞排列疏散、紊乱、增生,大量的炎细胞浸润;苦杏仁苷高剂量组、低剂量组和雷公藤多甙组滑膜轻度增生,炎性细胞浸润明显减少,外周血中IL-1β、s ICAM-1水平均有明显下降,滑膜中ASIC3蛋白表达也明显下降,与CIA模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与空白组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论苦杏仁苷能有效通过抑制CIA大鼠外周血中炎性细胞因子IL-1β、s ICAM-1的表达水平,以及下调滑膜ASIC3蛋白的表达,干扰对关节滑膜的损伤,起到抗炎和免疫抑制作用,可能是苦杏仁苷的抗炎镇痛和保护软骨作用的机制之一。 展开更多
关键词 苦杏仁苷 Ⅱ型胶原诱导性关节炎 关节滑膜 酸敏感离子通道3
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针刀疗法对肩周炎模型兔肩关节囊局部组织中基因蛋白表达的影响 被引量:12
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作者 张照庆 王小飞 +2 位作者 尹晶 武欢 金玮 《陕西中医》 CAS 2021年第8期991-994,998,共5页
目的:研究针刀疗法对肩周炎兔肩关节囊中白细胞介素6(IL-6)、高迁移率族蛋白1(HLGB1)、酸敏感离子通道蛋白3(ASIC3)蛋白和基因表达的影响。方法:健康雄性新西兰大白兔30只,按照随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组各10只。采... 目的:研究针刀疗法对肩周炎兔肩关节囊中白细胞介素6(IL-6)、高迁移率族蛋白1(HLGB1)、酸敏感离子通道蛋白3(ASIC3)蛋白和基因表达的影响。方法:健康雄性新西兰大白兔30只,按照随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组各10只。采用机械加冰敷制造肩周炎模型。密切关注造模前后各组肢体功能活动变化;采用HE染色观察局部组织形态学变化;采用Western blot法检测局部IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白水平;采用RT-PCR技术检测各组关节囊滑膜中IL-6、HLGB1、ASIC3的mRNA表达水平。结果:针刀松解法能改善局部病理状态,减少滑膜和肌间质纤维素渗出、粘连和机化,促进组织的修复;与空白组比较,模型组兔肩关节滑膜IL-6、HLGB1、ASIC3基因和蛋白表达水平显著增加(均P<0.05);与模型组相比,针刀组兔肩关节滑膜IL-6、HLGB1、ASIC3基因和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。模型组IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白含量显著增多,基因表达水平明显上调,与空白组相比有统计学差异(均P<0.05);针刀组上述指标蛋白含量显著降低,且对上述基因表达水平具有明显抑制作用,与模型组、空白组相比有统计学差异(均P<0.05)。结论:针刀疗法可降低肩关节囊滑膜中IL-6、HLGB1、ASIC3蛋白表达水平,并能抑制其基因过度表达,这可能是针刀治疗肩周炎有效作用机制之一。 展开更多
关键词 肩周炎 针刀 白细胞介素6 高迁移率族蛋白1 酸敏感离子通道蛋白3
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