ASXL1突变位点及共突变基因对髓系肿瘤患者预后的影响

目的:探讨ASXL1突变位点和共突变基因对髓系肿瘤预后的影响。方法:从cBioportal数据库中下载髓系肿瘤患者(AML、MDS、CMML)突变及临床数据进行筛选,纳入290例ASXL1突变初诊成人髓系肿瘤患者的资料;收集我院2016年1月至2023年6月收治的94例伴ASXL1突变初诊AML、MDS、CMML患者的数据资料,与数据库中筛选的290例资料合并。应用Excel、SPSS 25.0和R4.3.1软件进行分析统计。结果:ASXL1G646组中伴SRSF2,RUNX1,STAG2,CBL,IDH2共突变的比例均高于ASXL1other组,仅RUNX1共突变在两组之间的差异有统计学意义[35.7%(41/115)vs 20.4%(55/269),P=0.002]。TET2在AML患者中突变比例高于MDS和CMML(50.8%vs 30.8%vs 48.6%,P=0.001),STAG2、SF3B1在MDS中突变比例最高(STAG2:6.2%vs 19.4%vs 9.7%,P=0.010;SF3B1:1.5%vs 17.8%vs 4.2%,P=0.000),SRSF2在CMML中突变比例最高(29.2%vs 27.9%vs 45.8%,P=0.015),差异具有统计学意义。多因素分析示年龄≥68岁、RUNX1突变、STAG2突变均为影响患者预后的独立危险因素。生存分析示ASXL1G646组患者OS略短于ASXL1other组,但差异无统计学意义。结论:ASXL1突变位点对髓系肿瘤患者预后无明显影响,初诊时年龄≥68岁、伴RUNX1突变、STAG2突变是影响ASXL1突变髓系肿瘤患者OS的独立危险因素。

朗格汉斯细胞组织细胞增生症合并ASXL1突变1例

朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)发病原因不明、发病率极低,相关研究甚少,该病是一种多系统起病,临床表现多样化的罕见病。现报道1例起源于脊柱溶骨破坏的LCH供大家参考。1临床资料1.1 一般资料患者,男,56岁,“脂肪肝、酒精肝”10余年未系统治疗。2020年3月无诱因出现腰背部疼痛,无发热,就诊于当地医院。检查提示T10压缩性骨折、T5隐裂,经手术治疗好转。

异基因造血干细胞移植治疗ASXL1基因突变的骨髓增生异常综合征患者的效果

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗ASXL1基因突变(ASXL1^(+))的骨髓增生异常综合征(MDS)患者的疗效及影响因素。方法对247例初诊为MDS患者进行二代测序技术检测22种基因突变情况。根据治疗方式分为化疗组和移植组,比较两组总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)的差异,并对移植患者预后的影响因素进行分析。结果75例(30.36%)患者检测到ASXL1^(+),中位突变比例为42.93(18.10,58.39)%。其中10例接受支持治疗,43例接受化疗,22例接受allo-HSCT,移植组2年OS及PFS率较化疗组显著增加(P<0.05);移植组ASXL1低突变负荷组(VAF≤42.93%)2年OS率较ASXL1高突变负荷(VAF>42.93%)组显著增加(P<0.05)。在ASXL1^(+)患者接受allo-HSCT的背景下,RUNX1基因突变(RUNX1^(+))或U2AF1基因突变(U2AF1^(+))患者的2年OS率及PFS率显著减低(P<0.05)。进行多因素分析结果显示,ASXL1高突变负荷、U2AF1^(+)是影响移植患者OS的独立危险因素(P<0.05)。U2AF1^(+)是移植患者PFS的独立危险因素(P<0.05)。结论allo-HSCT显著改善了ASXL1^(+)MDS患者的预后,ASXL1高突变负荷、U2AF1^(+)是影响移植疗效的独立危险因素。

Co-existing squamous cell carcinoma and chronic myelomonocytic leukemia with ASXL1 and EZH2 gene mutations:A case report

BACKGROUND Chronic myelomonocytic leukemia(CMML),a rare clonal hematopoietic stem cell disorder characterized by myelodysplastic syndrome and myeloproliferative neoplasms,has a generally poor prognosis,and easily progresses to acute myeloid leukemia.The simultaneous incidence of hematologic malignancies and solid tumors is extremely low,and CMML coinciding with lung malignancies is even rarer.Here,we report a case of CMML,with ASXL1 and EZH2 gene mutations,combined with non-small cell lung cancer(lung squamous cell carcinoma).CASE SUMMARY A 63-year-old male,suffering from toothache accompanied by coughing,sputum,and bloody sputum for three months,was given a blood test after experiencing continuous bleeding resulting from a tooth extraction at a local hospital.Based on morphological results,the patient was diagnosed with CMML and bronchoscopy was performed in situ to confirm the diagnosis of squamous cell carcinoma in the lower lobe of the lung.After receiving azacitidine,programmed cell death protein 1,and platinum-based chemotherapy drugs,the patient developed severe myelosuppression and eventually fatal leukocyte stasis and dyspnea.CONCLUSION During the treatment and observation of CMML and be vigilant of the growth of multiple primary malignant tumors.

ASXL1突变的髓系肿瘤患者共突变基因谱及其临床意义

目的探讨具有ASXL1突变的髓系肿瘤患者的共突变基因谱及其临床意义。方法采用包含112个血液肿瘤相关基因的靶向测序技术对1 335例髓系肿瘤患者进行基因突变检测,筛选出ASXL1突变患者,对这部分患者的共突变基因谱进行分析,并分析其发病特征及预后情况。结果 1 335例髓系肿瘤患者中筛选出138例ASXL1突变阳性患者,包括骨髓增生异常综合征(MDS)52例(37.68%),骨髓增殖性肿瘤(MPN)29例(21.01%)、MDS/MPN10例(7.25%),急性髓系白血病(AML)47例(34.06%)。与ASXL1共突变基因谱分析结果显示,96.4%(133例)的患者伴有至少1个共突变基因;共突变基因谱中,表观遗传学基因占55.8%(77/138),信号传导通路相关基因占65.9%(91/138),转录因子基因占36.9%(51/138),细胞周期与凋亡相关基因占18.8%(26/138)。其中最常见的共突变基因组为RAS(25.4%)、SETBP1(21.7%)、FAT1(18.8%)、CREBBP(15.9%)及TET2(15.2%)。五大共突变基因组中,与ASXL1+RAS-患者相比,ASXL1+RAS+患者预后较差,表现为血红蛋白及血小板减少,染色体核型异常比例升高,生存时间缩短;而ASXL1合并SETBP1、FAT1、CREBBP及TET2突变患者的临床特征和预后差异无统计学意义。结论 ASXL1突变的髓系肿瘤患者常伴随多种基因共突变,其中伴随RAS通路基因共突变患者预后较差。

骨髓增生异常综合征伴继发性骨髓纤维化JAK2、ASXL1基因突变1例

患者,男,67岁,因“咳嗽2个月,加重伴发热咯血3d”入院。入院查体:T 36.3℃,BP 120/70 mmHg,贫血貌,全身浅表淋巴结未扪及,双肺呼吸增粗,右肺下可闻及湿哕音,心律齐,未闻及杂音,腹软,无压痛及反跳痛,肝脾肋下均未及,双下肢无水肿。入院后查血常规:白细胞计数(WBC)2.7×10^9/L.

Ph阴性骨髓增殖性肿瘤中ASXL1与CALR突变共存的检测及临床意义

目的:研究原发性血小板增多(ET)和原发性骨髓纤维化(PMF)患者ASXL1与CALR基因突变共存情况,比较其与单基因突变及突变阴性患者部分临床参数间的差异性。方法:采用基因组DNA-PCR扩增产物直接测序法检测263例ET患者及29例PMF患者ASXL1基因12号外显子、CALR基因9号外显子和MPL基因10号外显子突变;采用等位基因特异性PCR检测JAK2V617F突变情况。结果:292例患者总的突变检出率为72.6%(212/292),ASXL1、CALR、JAK2V617F及MPL基因突变发生率分别为5.8%、30.5%、39.0%及2.4%;5.1%(15/292)的患者同时携带双基因突变,包括ASXL1/CALR(n=11)、ASXL1/JAK2V617F(n=2)、MPL/CALR(n=1)及ASXL1/MPL(n=1),其中ASXL1/CALR突变共存发生率明显高于其它突变类型。与单基因CALR及JAK2V617F突变相比,CALR/ASXL1双突变组的ET患者有更高的血小板水平及较低的血红蛋白水平(P<0.05),但在中位年龄及外周白细胞计数方面无明显差异(P>0.05);与突变阴性组相比,CALR/ASXL1双突变ET组具有较低的白细胞数及血红蛋白水平,但具有较高的血小板水平,差异均有统计学意义(P<0.05);在中位年龄方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ASXL1与CALR突变共存在ET患者中有较高的检出率,与单基因突变及突变阴性组相比,具有较高的血小板水平及较低的血红蛋白水平。

ASXL1突变在髓系肿瘤中的研究进展

近年来很多关于髓系肿瘤的研究报道中,均发现了ASXL1突变的发生,包括骨髓增殖性肿瘤(5%~35%)、骨髓增生异常综合征(15%~50%)、急性髓系白血病(5%~15%)等.ASXL1突变类型包括移码突变、无义突变和错义突变3种,其中前两种对髓系肿瘤患者的总体生存率和无病生存率有较大的影响.同时,伴有ASXL1突变的髓系肿瘤患者具有较明显的临床特点,而且在对治疗的反应性和疾病预后方面较野生型患者也表现出明显的差异.ASXL1突变的广泛性表明其对髓系肿瘤的发生、进展有着密切联系,本文根据目前的研究数据,对ASXL1的分子结构、突变特点及其与各种髓系肿瘤的关系进行综述.

ASXL1突变在髓系疾病中的研究进展

ASXL1是Trithorax和Polycomb家族的增强子,在维持基因表达稳态中发挥着重要作用。近年来,在多种髓系肿瘤患者的造血细胞中都发现了ASXL1突变,包括慢性粒单核细胞白血病(43%)、骨髓增生异常综合征(14%)、骨髓增殖性肿瘤(10%)和急性髓系白血病(20%)等。ASXL1突变主要以移码突变和无义突变为主。ASXL1突变的广泛性表明它可能在髓系肿瘤的发病机制和恶性转化中发挥着重要作用,但是ASXL1突变在髓系疾病发生及体内正常造血中的作用及机制尚不完全清楚。本文对ASXL1的结构与功能特点,ASXL1突变与患者临床特征和疾病进展的关系,ASXL1突变与其它基因突变的关系,及敲除或沉默ASXL1的体内外模型进行了综述。

伴ASXL1基因突变的急性髓系白血病患者的临床特征及预后分析

目的:探讨伴有ASXL1基因突变的急性髓系白血病(AML)患者的临床特征及预后。方法:回顾性分析2016年4月至2019年10月就诊于空军军医大学唐都医院血液科的初诊AML患者229例的临床资料,采用二代测序技术进行基因突变检测,分析ASXL1基因突变患者的临床特征并进行预后分析。结果:共45例(19.6%)患者检测到ASXL1基因突变,移码突变22例(48.9%),错义突变15例(33.3%),无义突变8例(17.8%),均位于12号外显子。中位突变比例为32.47%(2.74%-53.50%)。伴有ASXL1基因突变的患者中位年龄为54(14-74)岁,以男性患者多见、且前期多有MDS或MPN病史、初诊时外周血白细胞数不高。伴有ASXL1突变组的患者诱导化疗完全缓解率低于无ASXL1突变的患者。伴或不伴ASXL1突变的患者在20个月内的生存具有统计学差异(P=0.042),而20个月以上的两组患者OS时间无差异(P=0.505)。伴ASXL1基因突变患者中,预后良好者6例全部存活,预后不良组中位OS时间16个月(P=0.034)。多因素分析显示,前期血液病史及诱导治疗是否获得CR是影响预后的独立不良因素。结论:伴ASXL1突变的AML患者中以移码突变常见。ASXL1突变多见于男性,起病白细胞不高,且易存在前期血液病史。伴ASXL1突变AML患者的CR率低于无ASXL1突变组,且短期疗效更差(≤20个月),但20个月以上的长期生存无显著差异。

Asxl1在炎性微环境中对成骨细胞增殖分化的作用

背景:研究表明Asxl1的缺失可导致骨质发育不全、骨质缺损类疾病的发生,但目前在根尖周炎环境下该因子与骨破坏之间的关系暂无相关报道。目的:探讨炎性微环境下Asxl1对成骨细胞增殖分化的影响。方法:实验选用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立体外炎性微环境,通过CCK-8实验筛取脂多糖最佳质量浓度和最佳作用时间,然后用20 mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1细胞24 h,免疫荧光检测Asxl1的蛋白表达水平,Real Time-PCR检测Asxl1 mRNA的表达水平。为进一步验证Asxl1基因在炎性微环境中影响成骨细胞的增殖与分化,脂多糖刺激形成炎性微环境后转染Asxl1-SiRNA 24 h,采用CCK-8检测细胞增殖活性,RealTime-PCR检测Asxl1及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平。结果与结论:①脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,Asxl1蛋白和mRNA表达水平呈降低趋势;②脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,转染Asxl1-SiRNA 24 h,细胞增殖活性下降趋势明显,Asxl1基因及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平明显降低;③结果提示,Asxl1可能通过参与炎性反应过程,影响成骨细胞的增殖与分化,进而参与骨破坏进程。

伴ASXL1基因突变AML-MRC患者的临床特征及预后分析

目的探讨伴ASXL1基因突变急性髓系白血病伴骨髓增生异常相关改变(acute myeloid leukemia with myelodysplasia-related changes,AML-MRC)患者的临床特征及预后。方法回顾性收集115例AML-MRC患者的临床资料,根据ASXL1检测结果,分为ASXL1突变组及ASXL1野生组,对比两组的临床特征;了解ASXL1基因共突变情况;分析ASXL1基因突变与染色体核型、疗效、生存之间的关系及其对患者预后的影响。结果35例(30.4%)患者ASXL1基因突变阳性,29例(82.9%)为老年患者,25例(71.4%)存在骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤(MDS/MPN)病史。31例(88.6%)ASXL1突变患者有共存基因,常见为U2AF1、DNMT3A、TET2、RUNX1、BCOR、FLT3、TP53、IDH1/2;ASXL1突变多见于异常核型、不良核型的AML-MRC患者。ASXL1突变组与ASXL1野生组相比,患者疗效差(P=0.004),中位总生存时间以及无事件生存期较短(P<0.05)。多因素分析显示,染色体核型、治疗方案、ASXL1突变、FLT3突变是影响患者总生存期的独立因素(P<0.05);而染色体核型、TET2突变是影响患者无事件生存期的独立因素(P<0.05)。结论ASXL1突变为AML-MRC患者常见突变基因,多见于老年、既往MDS/MPN病史患者,合并ASXL1突变提示患者预后不良。

ASXL1缺失对人白血病HEL细胞生物学特性的影响

目的本研究以携带JAK2 V617F纯合突变的人红白血病细胞HEL为基础,建立ASXL1和JAK2 V617F双突变模型,为研究JAK2 V617F与ASXL1协同参与MPN疾病进展的机制以及寻找新的药物治疗靶点奠定基础。方法利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术建立ASXL1基因敲除的HEL细胞系,并进行一系列细胞功能实验来验证ASXL1敲除对HEL细胞增殖、克隆形成以及对化疗药物的敏感性的影响。结果成功构建ASXL1基因完全敲除的HEL细胞系(HEL-AKO),模拟JAK2 V617F突变与ASXL1基因功能缺失性突变并存。细胞功能实验发现,HEL-AKO细胞较HEL细胞迁移能力变强,增殖能力变慢,细胞周期G 2/M期的进程延长,且HEL-AKO细胞的克隆形成能力减弱,药物敏感实验表明,与HEL细胞相比,HEL-AKO细胞对JAK抑制剂芦可替尼产生一定耐受。结论运用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够实现对JAK2 V617F突变的人红白血病细胞系HEL细胞系的特定编辑,且ASXL1基因敲除之后会对HEL细胞的生物学功能产生明显影响。

基于综合数据库分析ASXL1基因突变对子宫内膜癌预后的影响及作用机制

目的通过多个肿瘤综合数据库分析ASXL1基因突变对子宫内膜癌(EC)预后的影响及其作用机制。方法全面检索GEPIA、Kaplan-Meier plotter、the Human Protein Atlas、FireBrowse、STRING、UALCAN等数据库,分析其生存曲线、功能富集情况、基因相关性及信号通路,并进行生物信息学预测。结果 ASXL1基因突变是EC不良预后因素,对总生存期及无复发生存期均产生影响(P<0.001)。相关性分析显示,ASXL1基因突变可能通过表观遗传学,JAK2/STAT3和PI3K/AKT/mTOR信号通路发挥作用;结合功能富集分析,ASXL1突变主要影响PI3K/AKT/mTOR信号通路。结论 ASXL1基因突变是EC患者的不良预后因素,可能通过PI3K/AKT/mTOR信号通路发挥作用,应进一步开展相关生物学研究,并探索PI3K/mTOR等信号通路抑制剂的临床价值。

ASXL1基因突变在急性髓系白血病中的研究进展

附加性梳样结构(additional sex combs like,ASXL)1是ASXL家族(包括ASXL1、ASXL2、ASXL3)成员,参与表观遗传调控,在维持基因表达稳态中发挥重要作用。ASXL1基因突变广泛存在于多种髓系肿瘤中,其突变与预后不良相关,在正常造血系统中的确切作用以及突变的ASXL1对造血系统恶性肿瘤发展的作用尚未完全阐明。

circ-ITGA7上调ASXL1抑制结直肠癌细胞的增殖

目的探讨circ-ITGA7是否通过上调ASXL1抑制结直肠癌细胞增殖。方法采用RT-qPCR检测结直肠癌及癌旁组织中circ-ITGA7和ASXL1 mRNA表达水平,并用皮尔森相关性分析检测其相关性。RT-qPCR检测结直肠癌细胞株与正常肠道粘膜细胞株circ-ITGA7表达差异。采用质粒转染法在HCT116细胞中过表达circ-ITGA7,以RT-qPCR和western blot检测ASXL1的mRNA与蛋白表达水平。Cck-8对比circ-ITGA7过表达与否的HCT116细胞7天内的增殖活性。通过转染siRNA与质粒,以HCT116细胞集落形成实验对比过表达circ-ITGA7和沉默ASXL1对HCT116细胞集落形成数量的的影响。结果 RT-qPCR结果显示,circ-ITGA7在结直肠癌组织与细胞株中表达显著低于癌旁组织和正常肠道粘膜组织细胞株,且其在结直肠癌组织中与ASXL1的表达呈正相关性。过表达circ-ITGA7组的ASXL1蛋白及mRNA的表达水平显著高于对照组。Cck-8检测示,过表达circ-ITGA7组的吸光度于第5、6、7天显著低于对照组。细胞集落形成实验示,过表达circ-ITGA7组HCT116细胞的集落形成数量显著低于对照组,circ-ITGA7过表达且si-ASXL1沉默组与对照组差异无统计学意义。结论 Circ-ITGA7通过上调ASXL-1抑制结直肠癌细胞增殖。

慢性中性粒细胞白血病CSF3R、ASXL1、SETBP1、JAK2 V617F和CALR基因突变研究

目的 探讨中性粒细胞白血病（CNL）患者CSF3R、ASXL1、SETBP1、JAK2 V617F和CALR基因突变情况.方法 依据2008年WHO造血组织和淋巴组织肿瘤分类标准对12例临床疑诊“CNL”患者进行回顾性诊断.采用直接测序法检测CSF3R、ASXL1、SETBP1和CALR基因突变,采用等位基因特异性聚合酶链反应（AS-PCR）检测JAK2 V617F突变.结果 6例确诊为CNL,2例诊断为意义未明的单克隆免疫球蛋白病（MGUS）伴CNL表现,4例诊断为感染、炎症或肿瘤继发的反应性中性粒细胞增多.6例CNL患者均伴有CSF3R T618I突变,其中1例为CSF3R单独突变,4例合并ASXL1及SETBP1突变,1例合并CALR突变（c.1154-1155insTTGTC）.2例MGUS伴CNL表现及4例反应性中性粒细胞增多患者均不伴有CSF3R、ASXL1、SETBP1或CALR基因突变.所有患者均无JAK2 V617F突变.结论 CSF3R、ASXL1和SETBP1基因突变是CNL患者常见的基因突变,以CSF3R T618I最为常见.将CSF3R、ASXL1和SETBP1基因突变的检测纳入CNL诊断标准可以提高诊断的准确性.

ASXL1突变在骨髓增殖性肿瘤中的研究现状

ASXL1突变是骨髓增殖性肿瘤(MPN)的常见非驱动体细胞突变基因,其可与JAK2V617F等其他基因共突变,协同干扰造血干细胞(HSC)的增殖/分化、促使骨髓纤维化(MF)和白血病转化。ASXL1突变可影响MPN患者的临床亚型、血细胞计数、并发症、治疗反应及预后等多方面。ASXL1G646Wfs*12是最常见的ASXL1突变类型。笔者拟就ASXL1突变在MPN中的发生情况、作用机制及对MPN影响的研究现状进行阐述,旨在为MPN患者的诊断、预后评估和靶向治疗的选择等提供理论依据。

儿童混合表型急性白血病伴BCR-ABL1融合基因阳性病例分析

混合表型急性白血病(mixed-phenotype acute leukemia,MPAL)是急性白血病中淋系和髓系同时受累的一种罕见疾病,该文报道了1例儿童MPAL,此病例BCR-ABL1融合基因阳性并伴ASXL1基因突变,这种类型的遗传学改变为首次报道。该患儿接受急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)方案诱导治疗后骨髓细胞形态学及微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)均未见明显异常。巩固治疗后进行异基因造血干细胞移植,移植后未出现急性排斥反应。移植后30 d骨髓细胞形态学、MRD、BCR-ABL1融合基因均转阴。截至目前移植术后9个月,患者仍处于无疾病进展生存期(progression-free survival,PFS)中。

骨髓增生异常综合征ASXL1基因突变的研究

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患者中表观遗传调节因子ASXL1基因的突变情况。方法在DNA水平采用聚合酶链反应（PCR）扩增产物片段直接测序分析法检测53例初发MDS患者及20名健康人ASXL1基因第12外显子突变情况，比较ASXL1突变患者与野生型患者临床及实验室特征；反转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增产物直接测序分析法检测ASXL1突变在mRNA水平的表达。结果在53例MDS患者中，9例（16.9 %）ASXL1基因突变。共检测出6种突变类型，包括4种移码突变（2例p.Glu635ArgfsX15、3例p.Gly646TrpfsX12、1例p.Ala640GlyfsX14、1例p.Gly790TrpfsX10）和2种无义突变（1例p.Gln1063X和1例p.Gln695X）。所有突变类型均为杂合突变，其中p.Gly790TrpfsX10和p.Gln695X为新发现突变类型。此外还检测到一种单核苷酸多态性（SNP）位点（4例p.Gly652Ser）。20名健康人中检测出pGly652Ser SNP 5名和p.Leu1173Leu SNP 1名。RT-PCR扩增产物片段直接测序可在mRNA水平检测出移码突变（p.Gly646TrpfsX12）。ASXL1突变患者初发时外周血白细胞计数、红细胞计数、血小板计数、血红蛋白、网织红细胞、中性粒细胞绝对值、外周血淋巴细胞比例、T细胞亚群、骨髓原始细胞比例、MDS分型和染色体核型分布与ASXL1野生型患者相比，差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论ASXL1基因在MDS患者中的突变频率较高，且可在mRNA水平检测到ASXL1基因突变。