PLK1抑制剂(R)-BI-2536的合成

为进一步优化PLK1抑制剂(R)-BI-2536的合成,以3-羟基-4-硝基苯甲酸为起始原料,经过甲基化、水解、缩合和还原反应4步合成中间体酰胺化合物,以2-氨基丁酸为起始原料,经过酯化、还原胺化、取代、关环和N-甲基化反应5步合成了中间体二氢喋啶酮类化合物,最后通过亲核取代反应完成了PLK1的抑制剂(R)-BI-2536的合成,总收率为19.2%,其结构由1H NMR和MS表征。

TGFβR1抑制剂的设计、合成及抗癌活性

TCFβ蛋白家族包括转化生长因子、激活素、NODAL、骨形态发生蛋白等等,是组织形态发生的关键调节因子,在胚胎发育、器官发生以及成人组织稳态、炎症过程和创伤愈合中决定细胞早期命运。研究证明,抑制TCFβR1能够有效阻断TGFβ信号通路,显著破坏肿瘤细胞微环境,达到遏制肿瘤细胞发展的目的。为了获得具有抗癌活性的新型TGFβR1抑制剂,在保留传统的邻二芳基唑类结构的基础上,通过增环等策略,建立了新型骨架的目标化合物模型。合成的中间体及目标化合物结构经过了核磁共振氢谱、碳谱、质谱的确证。MTT实验和计算机模拟分子对接表明,目标化合物具有较好的类药性质,其中化合物CD-2具有进一步结构优化与筛选的可能。

LPAR1基因对脂多糖刺激下Ⅱ型肺泡上皮细胞中组织因子和纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响

目的 了解脂多糖(LPS)刺激下Ⅱ型肺泡上皮细胞(AEC Ⅱ)中差异表达基因溶血磷脂酸受体1(LPAR1)的动态表达特点,以及该基因对LPS刺激下组织因子(TF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的调节作用。方法 对LPS损伤后的RLE-6TN细胞进行RNA-seq测序,通过生物信息学分析,以NF-κB信号通路为核心,找到该信号通路富集到的的差异表达基因LPAR1。使用LPS刺激处于生长对数期的RLE-6TN细胞6、12、24、48及72 h,检测细胞中LPAR1基因的动态表达水平。在此基础上通过慢病毒转染敲低细胞中LPAR1基因的表达,观察该基因对细胞中TF和PAI-1表达的调节作用。结果 RLE-6TN细胞中LPAR1的表达在刺激6 h后开始升高,24 h时候达到顶峰,之后逐渐降低;利用慢病毒转染技术,成功低敲了细胞中LPAR1基因水平。LPS刺激24 h后,RLE-6TN细胞中TF和PAI-1的mRNA和蛋白的表达水平与正常对照组比较显著增加,差异有统计学意义(P <0.05);低敲LPAR1基因后,TF和PAI-1的表达水平显著降低(P <0.05),接近正常对照水平(P> 0.05)。结论 LPAR1基因对LPS刺激下RLE-6TN细胞TF和PAI-1的表达具有调节作用。该基因有望成为纠正ARDS肺泡内纤维蛋白沉积的新靶标。

针刺腧穴“降压方”对自发性高血压大鼠ACE-AngⅡ-AT1R轴及Profilin-1的影响

目的研究针刺腧穴“降压方”对自发性高血压大鼠(SHR)的降压效应及对ACE-AngⅡ-AT1R轴、Profilin-1的影响,探讨针刺降压的作用机制。方法按随机数字表法将30只SHR均分为模型组、针刺组,另以15只Wistar Kyoto Rats(WKR)作为正常对照组。针刺组取双侧人迎穴、曲池穴、足三里穴进行针刺,模型组随意在大鼠躯干部位进行针刺,对照组不针刺,其他操作相同。每周连续干预6 d休息1 d,连续4周,共24次。采用大鼠无创血压测量系统测量血压,并记录一般行为变化,采用ELISA法检测大鼠血清中血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,采用免疫组化法(IHC)检测主动脉中血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、前纤维蛋白-1(Profilin-1)蛋白表达的水平。结果针刺组第2周开始收缩压、舒张压持续降低,模型组收缩压、舒张压逐渐升高,对照组血压未见明显变化;针刺组较模型组一般行为得到改善。实验4周后针刺组血清中ACE、AngⅡ较模型组显著降低,AT1R、Profilin-1表达水平降低。结论针刺腧穴“降压方”对SHR降压效应明确,其机制可能是通过降低SHR血清中ACE、AngⅡ含量,影响SHR主动脉组织中的AT1R和Profilin-1表达,进而抑制局部肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的活性起到降低血压的作用。

ANO1抑制剂在AngⅡ诱导的VSMC增殖中的作用研究

目的研究钙激活氯通道蛋白1(ANO1)抑制剂在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法研究时间为2019年7月至2022年6月。体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞A7r5细胞株,AngⅡ刺激A7r5细胞建立细胞增殖模型,分别采用10 nmol/L、100 nmol/L、500 nmol/L不同浓度ANO1抑制剂(A01)干预,同时设置对照组(以等量生理盐水干预),采用Hoechst 33342荧光染色法观察ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC形态学变化,蛋白免疫印迹法检测ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC细胞凋亡相关蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果Hoechst 33342荧光染色结果显示,随着ANO1抑制剂浓度增加,呈亮蓝色的细胞愈来愈多(染色质凝聚、出现凋亡小体),即细胞凋亡数量越多。低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为(17.60±1.36)%、(36.30±3.50)%、(61.25±6.33)%,均高于对照组凋亡率(4.32±0.51)%,组间差异均有统计学意义(均P<0.05),即AngⅡ诱导的VSMC增殖后凋亡与ANO1抑制剂浓度之间存在剂量依赖性。蛋白免疫印迹法检测ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC凋亡相关蛋白结果显示,不同组间EPK、AKT、CDK4、Cyclin D1蛋白相对表达量主效应差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组EPK、AKT、CDK4、Cyclin D1蛋白相对表达量均降低,且呈剂量依赖性,各组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ANO1抑制剂可显著抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖作用,其机制可能与抑制EPK/AKT信号通路及细胞周期进程有关。

达格列净抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大和凋亡

目的探讨达格列净对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大反应和凋亡的影响。方法分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞,将其随机分为4组:对照组,AngⅡ组、达格列净1组(0.5μmol/L),达格列净2组(2μmol/L)。采用α-actin染色检测细胞面积,采用qPCR检测胚胎基因的转录,采用Tunel染色检测细胞凋亡水平,采用caspase3试剂盒检测caspase3活性,采用免疫印迹检测经典信号分子。结果AngⅡ组细胞面积明显大于对照组(P<0.05);达格列净1组、达格列净2组细胞面积低于AngⅡ组(P<0.05)。qPCR结果显示AngⅡ组胚胎基因转录明显高于对照组(P<0.05);达格列净1组,达格列净2组胚胎基因转录低于AngⅡ组(P<0.05)。tunel染色结果显示:AngⅡ组细胞凋亡数量高于对照组(P<0.05);达格列净1组,达格列净2组细胞凋亡数量低于AngⅡ组(P<0.05)。AngⅡ组细胞caspase3活性高于对照组(P<0.05);达格列净1组,达格列净2组细胞caspase3活性低于AngⅡ组(P<0.05)。免疫印迹检测结果显示AngⅡ组细胞胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)和Akt激活程度低于对照组(P<0.05);达格列净1组,达格列净2组细胞IGF1R和Akt激活高于AngⅡ组(P<0.05)。结论达格列净可直接作用于心肌细胞,保护其免受AngⅡ诱导的损伤。

miR-21抑制剂对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞增殖及eNOS表达的影响

目的:探讨miR-21抑制剂对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:将miR-21抑制剂转染至经AngⅡ诱导的HUVECs,采用MTT法检测细胞的增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,分别采用RT-PCR和western blotting法检测转录因子AP1和eNOS的mRNA和蛋白表达水平。结果:AngⅡ能促进HUVECs增殖和迁移,并使细胞中AP1、eNOS mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);miR-21抑制剂转染细胞后,AngⅡ促进HUVECs增殖和迁移的作用发生显著逆转(P<0.05),且AP1、eNOS mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:miR-21抑制剂能够抑制AngⅡ刺激下HUVECs的增殖及eNOS的表达;AP1在AngⅡ诱导细胞eNOS表达中可能起到关键的调控作用。

探讨血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞产生超氧阴离子和1型纤溶酶原激活物抑制剂的作用机制

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)产生超氧阴离子(O-2)和1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的作用机制及O-2与PAI-1产生之间的关系。方法:第一部分实验:观察血管紧张素Ⅱ不同浓度及不同作用时间对HUVECs产生O2-和PAI-1的作用。分为对照组,AngⅡ10-8～10-5 mol/L不同浓度组,AngⅡ10-6mol/L作用不同时间(0、6、12、24和48 h)。第二部分实验:观察不同浓度的缬沙坦对AngⅡ诱导HUVECs产生O2-和PAI-1的作用。分为对照组,缬沙坦(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+不同浓度缬沙坦(10-8～10-5mol/L)组。第三部分实验:观察缬沙坦、二甲苯基碘、超氧化物歧化酶对AngⅡ使HUVECs产生O2-和PAI-1的作用。分为对照组,AngⅡ(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+缬沙坦(10-6mol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+二甲苯基碘(10μmol/L)组,AngⅡ(10-6mol/L)+超氧化物歧化酶(2μl)组。用酶消化法收集并培养HUVECs,采用氯化硝基四氮唑蓝还原法测定上清液O-2浓度,用酶联免疫吸附法测定上清液PAI-1浓度。结果:①AngⅡ在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地使HUVECs产生O2-和PAI-1增加。②缬沙坦在10-8～10-5mol/L范围内呈浓度依赖性地降低AngⅡ促HUVECs产生O2-和PAI-1的作用。③二甲苯基碘和超氧化物歧化酶可显著抑制AngⅡ刺激HUVECs产生O2-及PAI-1。结论:①AngⅡ通过作用于AngⅡ受体1(AT1)激活还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶途径呈浓度和时间依赖性地使HUVECs产生O2-和PAI-1增加。②AngⅡ通过增加O2-产生而致PAI-1产生增加,提示抗氧化治疗有助于预防血栓性疾病的发生。

血管紧张素Ⅱ1型受体抑制剂对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensin Ⅱ type 1receptor,AT1R)抑制剂对人子宫内膜癌移植瘤的影响。方法选择6～8周龄的雌性裸鼠,注射人子宫内膜癌HEC-1B细胞悬液,建立人子宫内膜癌移植瘤模型后,随机平均分为肿瘤组和肿瘤抑制组。观察成瘤情况,并对瘤组织进行病理组织学检查,肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)和VEGF阳性率测定。结果细胞株被成功接种于裸鼠体内,裸鼠皮下移植瘤和AT1R抑制剂模型成功建立。两组模型中移植瘤的大小比较有明显差异(P<0.05),肿瘤组最大直径为11.34mm,最大体积为448.11mm3,平均体积210.56mm3;肿瘤抑制组最大直径9.01mm,最大体积216.46mm3,平均体积119.13mm3。两组移植瘤中MVD比较,肿瘤抑制组肿瘤间质血管明显减少(P<0.05)。两组移植瘤中VEGF表达情况比较,肿瘤抑制组阳性率显著低于肿瘤组(P<0.05)。结论 AT1R抑制剂能够明显抑制肿瘤组织间质内血管的生成,从而抑制肿瘤的生长和导致肿瘤组织的坏死,因此AT1R抑制剂在恶性肿瘤的治疗方面起着抑制肿瘤生长的作用。

丹参酮ⅡA对川崎病并发冠状动脉损害患儿基质金属蛋白酶9及其抑制剂TIMP-1的影响

目的检测不同的治疗方案下川崎病（Kawasakidisease，KD）患儿治疗前后基质金属蛋白酶9（ma．trixmetalloproteinase-9，MMP-9）及组织型基质金属蛋白酶抑制剂1（tissueinhibitorofmetalloproteinase．1，TIMP．1）表达的动态变化，分析丹参酮ⅡA（TanlIA）对上述指标的影响以及对川崎病并发冠状动脉损害（coronaryartery1esion，CAL）的保护作用。方法将2010年4月至2012年9月在南华大学附属第二医院住院治疗的川崎病患儿48例，包括无冠状动脉损害28例，有冠状动脉损害20例。随机分为TanIIA加常规治疗组和常规治疗组，各组24例（无冠状动脉损害14例，有冠状动脉损害10例），并以健康体检儿童作为对照组。分别采用酶联免疫吸附法（ELlSA）检测治疗前后患儿血清MMP-9、TIMP-1变化表达变化。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测治疗前后患儿外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMc）MMP-9、TIMP-1mRNA表达水平。结果川崎病患儿治疗前MMP-9、TIMP-1mRNA和蛋白表达均较正常对照组显著升高，且有冠状动脉损害的川崎病患儿血清MMP．9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1比值明显高于无冠状动脉损害（nocoronarya~ery1esion，NCAL）川崎病患儿（P〈0．05）；治疗5～7天后MMP-9、TIMP．1mRNA和蛋白表达显著降低（P〈0．05），其中TanIIA加常规治疗组较常规治疗组MMP-9、TIMP．1mRNA和蛋白表达下降更明显（P〈0．05），同时，在有冠状动脉损害的川崎病患儿中，TanⅡA加常规治疗后，与常规治疗相比，其血清MMP-9、TIMP．1也明显降低（P〈0．05）。结论TanIIA可以-定程度抑制川崎病患者MMP-9、TIMP-1mRNA和蛋白表达，从而减轻血管炎性损伤，减少川崎病并发冠状动脉损害。

纤维蛋白原激活剂抑制剂1基因、血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与肺源性心脏病的关系

目的研究纤维蛋白原激活剂抑制剂-1(PAI-1)基因和血管紧张素Ⅱ1型受体(AGTR1)A1166C多态性与肺源性心脏病(简称肺心病)的关系。方法选取肺心病患者60例,正常对照组40名。采用聚合酶链反应(PCR)和PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)酶切技术,检测2组人群PAI-1基因的4G/5G型多态性和AGTR1基因的多态基因型。结果(1)肺心病组和正常对照组均检测到PAI-1基因的4G/4G、5G/5G及4G/5G3种基因型,肺心病组3种基因型的频率分别为0.15、0.28和0.57,正常对照组为0.13、0.15和0.72,两组比较差异无显著性(2χ=2.91,P>0.05);4G、5G等位基因频率差异无显著性(P>0.05),4G型与非4G型构成差异也无显著性(P>0.05);(2)肺心病患者中,女性和男性组PAI-1基因型构成差异无显著性(P>0.05),4G/5G等位基因频率差异有显著性(P<0.05),4G/4G型与非4G/4G型基因型构成差异无显著性(P>0.05);(3)肺心病组和正常对照组AGTR1 A1166C基因型构成和等位基因频率差异无显著性(P>0.05)。结论PAI-1基因4G/5G多态性和AGTR1基因A1166C多态性与肺心病发生无明显相关性。

丹参酮ⅡA对腹膜透析患者基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

目的基质金属蛋白酶-2（matrix metalloprote inase-2,MMP-2）及金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inh ib itor of m et-alloprote inase-1,TIMP-1）失衡可导致细胞外基质沉积,是组织纤维化包括腹膜组织纤维化发生发展的重要机制之一。通过体外细胞培养,观察丹参酮ⅡA对人腹膜间皮细胞增殖活性及MMP-2、TIMP-1表达的影响,并通过在腹膜透析液（peritoneal dial-ysis solution,PDS）中添加丹参酮ⅡA了解其对腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）患者腹腔MMP-2和TIMP-1的影响。方法取6例择期手术患者的网膜体外培养腹膜间皮细胞,第3代细胞用于实验,细胞同步后分成对照组、PDS组、丹参酮ⅡA 1mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为1mg/L）、丹参酮ⅡA 5mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为5mg/L）、丹参酮ⅡA 10 mg/L组（丹参酮ⅡA终浓度为10 mg/L）5组（每组6例）进行干预。ELISA法检测各组上清液中MMP-2、TIMP-1的含量,RT-PCR检测各组细胞MMP-2、TIMP-1mRNA的表达。前瞻性观察38例持续非卧床PD患者,随机分为实验组和对照组,每组19例,进行为期6周的研究。实验组在前3周使用添加丹参酮ⅡA注射液（10mg/2L）的PDS治疗,4~6周使用常规PDS治疗,对照组均不加药治疗6周,分别在开始时、第3周末和第6周末检测2组患者透出液MMP-2、TIMP-1的浓度,并进行比较。结果与对照组比较,PDS组人腹膜间皮细胞产生MMP-2明显增加（P〈0.05）,MMP-2/TIMP-1比值明显升高（P〈0.05）,表达MMP-2 mRNA明显升高（P〈0.05）;添加丹参酮ⅡA干预后,丹参酮ⅡA 1 mg/L组、5 mg/L组、10 mg/L组MMP-2产生与PDS组比较有显著下降（P〈0.05）,MMP-2/TIMP-1比值明显下降（P〈0.05）,MMP-2mRNA表达水平显著下调（P〈0.01）,TIMP-1mRNA表达水平显著上调（P〈0.05）。用药后实验组患者透出液MMP-2较用药前有明显降低（P〈0.05）,透出液TIMP-1无明显变化,停药3周后,透出液MMP-2较用药3周后明显升高（P〈0.05）。结论丹参酮ⅡA可影响人腹膜间皮细胞MMP-2、TIMP-1mRNA的表达,调节MMP-2/TIMP-1平衡,改善人腹膜间皮细胞的增殖活性,显著降低PD患者腹腔内高MMP-2状态。

机械拉伸对人Ⅱ型肺泡上皮细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

机械通气（MV）是重危患者治疗、手术全麻必不可少的治疗手段.机械通气也能激活肺组织炎症级联反应,促进炎性细胞因子释放,诱发肺损伤（VILI）[1].VILI相关的生物伤一直为国内外研究者关注的重点[2,3],其致病机制复杂,有待于进一步阐明.纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）是纤溶的调节剂（uPA）,在肺部炎症中也发挥重要的作用[4,5].本研究拟通过对机械拉伸A549细胞PAI-1表达的影响,探讨机械通气致肺损伤的机制.

DDR1抑制剂与IGF-1R抑制剂联合应用及机制

【目的】研究盘状结构域受体(DDR1)的抑制剂3-(2-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙炔基)苯甲酰胺7RH对鼻咽癌细胞的体外抗肿瘤作用及相关机制,为该药用于鼻咽癌的临床治疗提供实验依据。【方法】采用MTT法绘制细胞生长曲线,计算7RH对鼻咽癌细胞的半数抑制浓度(IC50值);Western Blot检测7RH引起鼻咽癌细胞中信号通路的改变,并检测Si RNA瞬时转染方法干扰DDR1后phospho-IGF-1R的改变。【结果】7RH在体外明显抑制鼻咽癌细胞的增殖并且呈浓度依赖性;7RH作用鼻咽癌细胞株CNE2和HK1的IC50值分别为2.60μmol/L与6.33μmol/L;应用7RH处理或者使用SiRNA瞬时转染方法干扰DDR1后,CNE2的IGF-1R的磷酸化水平明显增强;联用DDR1抑制剂和IGF-IR抑制剂能更有效地抑制肿瘤细胞的增殖,两者联用能更显著地抑制AKT活性。【结论】DDR1的抑制剂3-(2-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-基)乙炔基)苯甲酰胺7RH能在体外有效地抑制鼻咽癌细胞的增殖。联用7RH和IGF-IR抑制剂能通过抑制PI3K/AKT通路更有效抑制鼻咽癌细胞的增殖。

小分子IGF-1R抑制剂在非小细胞肺癌靶向治疗中的研究进展

小分子抑制剂可作为肿瘤抑制因子参与癌症的进展,在非小细胞肺癌(NSCLC)中,小分子抑制剂的功能发挥着至关重要的作用.作为一种新型的靶向药物,因其长效稳定、毒性低、可进行早期诊断并提供预后判断等优势而被逐渐重视.近年来,以1型胰岛素样生长因子受体(IGF-1R)作为癌症治疗干预靶点的小分子抑制剂已部分应用于NSCLC的靶向治疗,其发展前景不容小觑.本综述根据已报道的研究结果,深入讨论了几种以IGF-1R为靶向的小分子抑制剂在NSCLC靶向治疗中的研究进展及存在的问题.

新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂的设计、合成与抗肿瘤活性研究

目的发现结构新颖的表皮生长因子受体/胰岛素样生长因子-1受体(epidermal growth factor receptor/insulin-like growth factor 1 receptor,EGFR/IGF-1R)双靶点抑制剂。方法以IGF-1R抑制剂BMS-754807的结构为基础,参照前期合成的EGFR酪氨酸激酶抑制剂ET-1的结构和激酶结合模式,设计、合成一类4位连有2-氨基苯并咪唑片段的喹唑啉类化合物,通过氨基咪唑片段与EGFR和IGF-1R铰链区的关键氨基酸残基形成氢键结合,从而获得新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂。结果合成了10个4-(苯并咪唑-2-氨基)喹唑啉类化合物,通过^(1)H-NMR和ESI-HRMS表征了目标化合物的结构;激酶活性实验表明目标化合物对EGFR和IGF-1R均具有一定的抑制活性;分子模拟对接结果表明目标化合物结构中的氨基咪唑片段是其产生EGFR/IGF-1R双靶点抑制活性的关键药效团。结论合成的目标化合物为EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂,后续通过结构优化有望发现新型抗肿瘤药物。

学习记忆通路抑制剂T-5224和KN-62对翘嘴鳜c-fos及味觉受体t1r1表达的影响

为探究翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)中原癌基因c-Fos (proto-oncogene c-Fos)对摄食相关的味觉受体t1r1(taste receptor type 1 member 1, t1r1)的调控作用,研究采用学习记忆通路相关抑制剂T-5224、KN-62处理鳜脑细胞,通过不同浓度抑制剂处理发现T-5224对c-fos的起负调控作用而KN-62对c-fos起正调控作用,同时筛选出适合的处理时间及浓度。30μmol/L T-5224处理24h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达显著降低(P<0.05),而200 nmol/L KN-62处理2h,鳜脑中c-fos及t1r1的mRNA表达却极显著升高(P<0.05)。此外,研究还分析了抑制剂处理翘嘴鳜脑细胞后, t1r1基因DNA甲基化变化。然而在两种抑制剂处理后,鳜脑中t1r1的甲基化水平无显著变化(P>0.05)。以上结果说明,翘嘴鳜脑细胞味觉受体t1r1转录水平变化,可能是通过学习记忆因子cfos基因调控,而c-fos可能通过其他途径调控t1r1的转录,但不是DNA甲基化。同时为翘嘴鳜驯化后摄食偏好变化提供理论依据。

抗白细胞介素-1α抑制剂bermekimab治疗化脓性汗腺炎取得突破性成果

XBiotech公司宣布抗白细胞介素(IL)-1α抑制剂bermekimab治疗化脓性汗腺炎Ⅱ期临床试验取得突破性成果,包括不用抗生素且明显减轻疼痛。Ⅱ期临床试验为随机、双盲、安慰剂对照研究,在美国11个皮肤病研究中心进行,入选42名患者每周皮下注射该药400mg,共12周。患者分2组,一组是抗肿瘤坏死因子(TNF)治疗失效患者(n=24);另一组是未用TNF治疗的患者(n=18)。

基于ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路研究唐古特红景天活性部位抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压的作用机制

目的本研究基于ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路研究唐古特红景天活性部位(ACRT)抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压的作用机制。方法将大鼠分为对照组、模型组、给药组,模型组和给药组大鼠在低压氧舱(模拟海拔4500米)内通过诱导构建高原缺氧性肺动脉高压模型。给药组分别灌胃给予250、125、62.5 mg/Kg的ACRT。给药4周后,测定大鼠肺动脉压,观察肺组织切片,测定与肺组织中ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路相关的蛋白表达情况。结果不同剂量给药组ACRT能显著抑制大鼠的肺动脉压升高,抑制大鼠的肺血管重塑、炎性病变,抑制大鼠的肺小动脉内皮Ⅰ、Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀,并调控大鼠肺组织中与ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路相关的蛋白活化,其中高剂量给药组效果最佳。结论ACRT具有显著的抗大鼠高原缺氧性肺动脉高压作用,其具体作用机制可能与调控ACE-AngⅡ-AT1R、ACE2-Ang(1-7)-MAS信号通路有关。

ANO1抑制剂对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖影响

目的探讨ANO1抑制剂T16A inh-A01(A01)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路蛋白的影响。方法用AngⅡ、A01处理VSMC 24 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,采用Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达。结果与对照组相比,AngⅡ使细胞存活率升高至(121.2±2.4)%,10~20μmol/L A01能够明显抑制该作用(F=63.64,P<0.01)。AngⅡ处理细胞后,PCNA蛋白表达水平升高,该效应可被20μmol/L A01部分抑制(F=15.82,P<0.01)。此外,AngⅡ还增加了p-ERK蛋白的表达,该作用也可被A01显著抑制(F=36.01,P<0.01)。结论A01对AngⅡ诱导的VSMC增殖具有抑制作用,该作用可能与激活ERK信号通路相关。