特异AT序列结合蛋白2、基质金属蛋白酶-10在结直肠癌组织中的表达及其与病理分期、生存期的相关性

目的:分析特异AT序列结合蛋白2(SATB2)、基质金属蛋白酶-10(MMP-10)在结直肠癌组织中的表达及其与病理分期、生存期的相关性。方法:选取53例胃癌患者为研究对象,手术获取肿瘤组织和癌旁组织标本,采用免疫组化法检测SATB2、MMP-10在标本中的表达水平,并其表达与病理特征、生存期的相关性。结果:结直肠癌组织中SATB2阳性表达率为60.38%低于癌旁组织的79.25%、MMP-10的阳性表达率为54.72%高于癌旁组织的18.87%(P<0.05);SATB2、MMP-10在不同肿瘤大小、不同肿瘤分化程度、淋巴结转移有无、不同TNM分期中的阳性表达率存在统计学差异(均P<0.05);经多因素Logistic回归分析显示,肿瘤大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期均为SATB2、MMP-10表达的影响因素(均P<0.05);SATB2阳性表达患者累积生存率高于SATB2阴性表达患者,MMP-10阳性表达患者累积生存率低于MMP-10阴性表达患者(均P<0.05)。结论:结直肠癌组织中的SATB2阳性表达率低、MMP-10阳性表达率较高,且上述因子表达与患者病理特征存在明显关联,同时SATB2阴性表达、MMP-10阳性表达代表患者预后较差。

老年乳腺癌组织雌激素受体、孕激素受体与富集AT序列的特异性结合蛋白1及人表皮生长因子受体-2表达的相关性

目的探讨老年乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与富集AT序列的特异性结合蛋白(SATB)1及人表皮生长因子受体(Cerb B)2表达的相关性。方法回顾性分析原发性乳腺癌患者172例的临床资料。以距肿瘤组织超过5 cm外的癌旁组织为对照,用免疫组化方法检测乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达及其与临床病理特征、ER、PR的关系。结果 SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。组织学分级Ⅲ级的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率最高,其次为Ⅱ级、Ⅰ级,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期为Ⅲ期的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);有淋巴结转移的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中的表达与ER、PR表达呈显著负相关(r_(ER)=-0.387,-0.372,r_(PR)=-0.296,-0.329,均P<0.05)。结论 SATB1、CerbB2在老年乳腺癌组织中呈高表达,且与ER及PR表达呈显著负相关。

特异AT序列结合蛋白1和P504s在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨P504s及特异AT序列结合蛋白1(SATB1)基因在前列腺癌的表达,及其在前列腺癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学染色检测P504s及SATB1蛋白在60例前列腺癌和30例前列腺增生症组织中的表达。结果 SATB1在前列腺癌组织中的表达阳性率(78.3%)较前列腺增生组织(0.0%)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),SATB1的表达随着Gleason评分增加而升高(P<0.05)。P504s在前列腺癌组织中的阳性表达率(95.0%)远高于前列腺增生症组(0.0%)(P<0.05),但其在前列腺癌中的表达不会随着Gleason评分增加而升高(P>0.05)。结论 P504s和SATB1在前列腺癌中的高表达,结合形态学综合分析,可能有助于提高前列腺癌的诊断及鉴别诊断,而SATB1蛋白在前列腺癌组织中的异常表达,提示可能与前列腺癌的发生、发展有关。

缺氧诱导因子-1α与特异AT序列结合蛋白1在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与特异AT序列结合蛋白1(SATB1)蛋白在胃癌及癌旁组织中的表达情况及相关性,为胃癌的诊断和预后提供参考依据。方法采用免疫组化SP法检测42例胃癌组织、42例配对癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm)中HIF-1α和SATB1蛋白的表达,分析胃癌组织中HIF-1α和SATB1蛋白表达与胃癌临床病理因素的相关性,并分析HIF-1α和SATB-1蛋白表达之间的相关性。结果 HIF-1α和SATB1在胃癌组织中的表达均明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α与SATB1蛋白的表达与浸润深度、临床分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、分化程度及肿瘤大小无关(P>0.05)。胃癌组织中HIF-1α与SATB-1蛋白表达呈正相关(r=21.63,P=0.00)。结论胃癌组织中HIF-1α和SATB1蛋白的高表达预示胃癌恶性程度高,临床分期较晚,可能存在淋巴结转移。HIF-1α和SATB1蛋白具有协同作用,对临床诊治有重要指导意义。

特异AT序列结合蛋白-1促进胰岛素样生长因子结合蛋白-2在K562细胞中的表达

探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcDNA3.1-SATB1转染至K562细胞,通过6周G418的筛选获得阳性克隆,RT-PCR、实时PCR及Western印迹验证过表达情况,对阳性克隆细胞中IGFBP2的表达用RT-PCR、实时PCR及Western印迹方法进行检测;然后用RNAi的方法干扰阳性细胞中SATB1的表达后,同样用上述3种方法再次检测IGFBP2的表达状况;用生物信息学方法对IGFBP2基因进行MAR序列与SATB1结合位点搜索分析,寻找SATB1影响IGFBP2基因表达的机制.结果显示,在稳定转染的情况下,实验组K562-SATB1细胞与转染空载体pcDNA3.1的K562-3.1细胞和未转染细胞K562相比,IGFBP2 mRNA水平上调了近7倍,而蛋白水平变化不明显.RNA干扰后,IGFBP2的表达在mRNA水平也相应下调,蛋白水平的变化同样不明显.通过生物信息学分析发现,IGFBP2第1个内含子中可能存在2.5 kb MAR样序列,且MAR样序列上存在多个SATB1的潜在结合位点.综上所述,过表达SATB1可以使K562细胞中IGFBP2 mRNA表达水平提高,而且其调控机制可能与SATB1直接和IGFBP2基因中的MAR样序列结合有关.

特异AT序列结合蛋白1、E-钙黏蛋白表达水平与乳腺癌患者组织学分级的相关性分析

目的分析特异AT序列结合蛋白1(SATB1)、E-钙黏蛋白(E-cad)表达水平与乳腺癌患者组织学分级的相关性分析。方法选取2016年3月至2018年4月在郑州美康盛德医学检验所进行检测的119例乳腺癌患者,均接受SATB1、E-cad表达水平检测,分析E-cad、SATB1表达水平与乳腺癌患者临床病理特征的相关性。结果 E-cad表达水平与乳腺癌患者是否绝经、年龄无关(均P>0.05),与乳腺癌患者组织学分级、TNM分期、有无淋巴结转移、肿瘤个数有关(均P<0.05);SATB1表达水平与乳腺癌患者年龄无关(P>0.05),与乳腺癌患者是否绝经、组织学分级、TNM分期、有无淋巴结转移、肿瘤个数有关(均P<0.05)。结论 E-cad表达水平与乳腺癌患者组织学分级、TNM分期、有无淋巴结转移、肿瘤个数有关,SATB1表达水平与乳腺癌患者是否绝经、组织学分级、TNM分期、有无淋巴结转移、肿瘤个数有关,两者联合检测能为乳腺癌患者靶向治疗提供可靠依据。

斜纹夜蛾普通气味结合蛋白基因SlitGOBP1的克隆及序列分析

通过PCR扩增结合RACE技术克隆获得斜纹夜蛾Spodoptera litura普通气味结合蛋白1（GOBP1）基因（Slit—GOBP1）全序列．序列测定和结构分析表明，SlitGOBP1阅读框全长为495bp，编码164个氨基酸残基，预测相对分子质量和等电点分别为19270和5．29，与已报道的10种鳞翅目昆虫GOBP1相似性为90％-41％．cDNA序列GenBank登录号为EF159978．SlitGOBP1序列中有6个保守的半胱氨酸位点，具有GOBP1的典型特征．SlitGOBP1编码的蛋白呈酸性，整个分子呈亲水性，在第40-60位和100位以后的氨基酸表现亲脂性，蛋白质二级结构主要由α螺旋构成．氨基酸序列系统进化树分析表明，昆虫间GOBP1分子具有明显的保守性，SlitGOBP1与夜蛾科的烟青虫Helicoverpa assulta、烟芽夜蛾Heliothis virescerts和棉铃虫Helicoverpa armigera GOBP1属于一个分支，相似性分别为78.1％、87.6％和79.9％、这些结果为进一步了解斜纹夜蛾感受环境信息分子机制，研制昆虫行为调节剂提供了基础．

甘蓝自交不亲和信号传导中SRK结合蛋白基因THL1的克隆与序列分析

采用PCR和RT PCR技术 ,从甘蓝基因组和柱头总RNA中扩增获得了 719bp的硫氧还蛋白(THL1)的全长基因序列和 4 30bp的cDNA序列。序列分析首次表明 ,克隆的THL1基因全序列有两个内含子 ,cDNA序列编码

胃癌组织叉头框蛋白J1和特异AT序列结合蛋白1表达水平及临床意义

目的分析胃癌组织叉头框蛋白J1(FOXJ1)、特异AT序列结合蛋白1(SATB1)表达水平及临床意义。方法选取平顶山市第一人民医院2016年1月至2017年12月胃癌患者49例,利用免疫组化SP法检测胃癌组织、癌旁组织(距离癌组织边缘>5 cm)中FOXJ1、SATB1表达,分析两者在胃癌组织中的表达与胃癌病理参数相关性。结果 FOXJ1、SATB1均表达于胃癌组织,前者在胃癌组织中主要定位于细胞质,在癌旁组织中主要定位于细胞核,胃癌组织FOXJ1阳性表达率(46.94%)低于癌旁组织(93.88%),差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织SATB1阳性表达率(65.31%)高于癌旁组织(0.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。FOXJ1、SATB1表达与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关(均P<0.05)。结论胃癌组织中FOXJ1表达减弱,SATB1呈高表达,且其表达水平与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关,对临床诊治有重要指导意义。

丙型肝炎病毒F蛋白结合蛋白1基因的克隆化与序列分析

目的对命名为F蛋白结合蛋白1(FBP1)的未知基因,克隆其全长基因并进行生物信息学分析。方法应用酵母双杂交技术得到FBP1,应用分子生物学技术克隆FBP1的基因编码序列。结果经酶切和测序鉴定,结果完全正确,成功克隆了FBP1的基因编码序。结论FBP1通过与F蛋白结合,在病毒蛋白与宿主细胞蛋白相互作用过程中发挥重要作用。

端粒重复序列结合因子1和2及端粒保护蛋白1基因在食管癌中的表达

目的检测端粒重复序列结合因子1和2及端粒保护蛋白1基因在食管癌组织中的表达。方法收集我院33例明确诊断为食管癌患者的中心组织及其相应癌旁组织,然后提取总RNA并逆转录成cDNA,适时荧光定量PCR方法检测TRF1、TRF2和POT1基因在这些组织中的表达水平。结果 TRF1mRNA在食管癌中心和癌旁表达所得CT值分别为(1.42±2.31)和(1.02±1.04),差异有统计学意义(P<0.05,n=33);TRF2为(8.53±2.57)和(8.38±1.50),两者差异无统计学意义(P>0.05,n=33);POT1为(4.72±1.47)和(3.80±1.06),两者差异有统计学意义(P=0.001,n=33)。结论虽然TRF2基因在食管癌中表达没有统计学差异,但TRF1和POT1基因在食管癌组织中表达显著降低,提示TRF1和POT1有可能与食管癌的发生、发展有着密切的关系。

miR599靶向特异AT序列结合蛋白2对非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨miR599靶向特异AT序列结合蛋白2对非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭能力的影响。方法取冻存A549细胞复苏、培养,取对数生长期细胞用于实验。随机将对数生长期A549细胞分为对照组、miR-599 mimics组、miR-599 inhibitor组、miR-599 mimics联合pGV141-SATB2组,分别转染空白试剂、miR-599 mimics、miR-599 inhibitor和miR-599 mimics联合pGV141-SATB2。采用qPCR法检测转染前后A549细胞中miR-599 mRNA表达水平,采用Transwell小室检测法测定A549细胞迁移和侵袭能力,采用Western blot法测定细胞SATB2、E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。结果对照组、miR-599 mimics组、miR-599 inhibitor组和miR-599 mimics联合pGV141-SATB2组A549细胞miR-599 mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组、miR-599 mimics组、miR-599 inhibitor组和miR-599 mimics联合pGV141-SATB2组迁移和侵袭细胞数量比较差异有统计学意义(P<0.05)。上述4组SATB2、E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-599可通过负调控SATB2,促进上皮间质转化,增强A549细胞迁移和侵袭能力。

端粒重复序列结合因子1蛋白在胃癌组织中的表达及其意义

目的研究端粒重复序列结合因子1(TRF1)蛋白在胃癌中的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法用Westernblot方法检测TRF1蛋白在10例正常胃黏膜、15例胃癌前病变、20例胃癌、5例淋巴结转移胃癌组织中的表达。结果TRF1蛋白在癌前病变组、胃癌组、转移癌组比正常组表达高;胃癌组、转移癌组比癌前病变组表达高(P<0.01)。在胃癌组织中,TRF1蛋白的表达与胃癌分化程度有关,分化越差,表达越高(P<0.01)。结论TRF1蛋白可能在胃癌的发生发展中起重要作用。

中国人甘露糖结合蛋白基因第1外显子核苷酸序列的测定

目的为了阐明中国人甘露糖结合蛋白(MBP)的基因突变对健康的影响和与疾病的关联,须测定中国人MBP基因的第1外显子的基因序列。方法应用PCR产物直接经310型全自动遗传分析仪进行DNA序列分析。结果测定了中国人甘露糖结合蛋白基因第1外显子核苷酸序列,检测到密码子54的纯合和杂合的点突变,未检测到密码子52和57的点突变。结论我们检测出中国人MBP基因第1外显子的核苷酸序列,密码子54基因的突变。

特异AT序列结合蛋白2在结直肠癌诊断中的价值

特异AT序列结合蛋白2(SATB2)是一种特异性结合在DNA核基质附着区,继而进行调控转录和染色质重塑的转录因子。结直肠癌(CRC)的发病机制可能与微卫星不稳定性(MSI)状态、炎症、激活Wnt通路和免疫微环境等有关。多项研究表明SATB2与CRC的发病机制显著相关,下面就SATB2在CRC中的表达、与其发病机制的相关性以及诊断价值等方面进行综述。

孟氏隐唇瓢虫气味结合蛋白ComOBP1基因的克隆和时空表达

采用RT-PCR和RACE技术,从孟氏隐唇瓢虫Cryptolaemus montrouzieri Mulsant中成功克隆出气味结合蛋白(Com OBP1)基因的全序列(Genbank登陆号:KU170686)。Com OBP1基因全长922 bp,包括5'端长为40 bp的非编码区域(UTR),及3'端长为462 bp的UTR,开放阅读框ORF长为420 bp,编码139个氨基酸,预测的分子量为15.516 k Da,等电点p I为6.57,存在AATAAA加尾信号。N-末端疏水区包含由20个氨基酸构成的信号肽,无跨膜结构,有4个保守的半胱氨酸,属于Minus-C OBP,也是在孟氏隐唇瓢虫中发现的第一个Minus-C OBP。氨基酸序列中有且仅有一个N-糖基化位点为62 NLSA,并存在2个潜在的磷酸化位点。与其它昆虫的Minus-C OBPs进行同源性比较并构建系统发育树,发现与同为鞘翅目Coleoptera昆虫的同源性较高。利用Real-time PCR、RT-PCR技术对Cmon OBP1基因在孟氏隐唇瓢虫不同发育阶段,不同组织,不同营养条件及不同食性下的表达水平进行了测定,结果显示,Cmon OBP1基因在整个发育阶段均有表达,雄性成虫期具有最高表达量,且多在成虫的头部及翅部表达。当营养条件发生变化时,表达丰度不会发生变化,当猎物由天然猎物柑橘粉蚧Planococcus citri Risso变成碗豆修尾蚜Megoura japonica Matsumura时,表达量会明显下降。该结果表明,孟氏隐唇瓢虫的不同发育阶段、不同组织及猎物种类会影响Cmon OBP1基因的表达,从而进一步影响其嗅觉行为。同时,Cmon OBP1基因可能在雄虫相关的信息素感受过程中发挥着重要作用。

核基质结合区结合蛋白SATB1上调乳腺癌干细胞表型CD44^+/CD24^-的表达

目的探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequencebinding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的影响及机制。方法用SATB1相关小干扰RNA(SATB1related small interfering RNA,SATB1-siRNA)双链寡核糖核酸干扰MDA-MB-231细胞;pEGFP-N1-SATB1-GFP真核表达质粒瞬时转染MCF7细胞后,流式细胞术检测SATB1对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-表达的影响。结果 MCF7细胞转染SATB1后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显升高;MDA-MB-231细胞在SATB1-siRNA干扰后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显降低(P<0.05)。结论 SATB1可能在形成并维持乳腺癌肿瘤干细胞特性中起重要作用。

神经系统显著表达的丝氨酸/精氨酸富集蛋白1在小鼠大脑发育过程中的表达与分布

目的：研究神经系统显著表达的丝氨酸/精氨酸富集蛋白1（NSSR1）在中枢神经系统中的表达情况,比较在小鼠发育过程中NSSR1在中枢神经系统中的表达差异.方法：收集不同胎龄的胎鼠中枢神经系统样本以及不同生长时期的小鼠大脑样品,通过蛋白质印迹法检测NSSR1蛋白在各样品中的表达量,通过免疫组织化学法检测NSSR1在小鼠大脑不同部位发育过程中的表达分布.结果：小鼠中枢神经系统中NSSR1的蛋白表达量在胚胎期9~14 d期间显著增加,其相对表达量从0.186增加至0.445,在出生后则一直维持着比较高水平的表达.免疫组织化学法分析结果显示,在胚胎期12 d的胎鼠中,NSSR1蛋白表达集中在室管膜外侧的套层和边缘层中,在室管膜层中未见表达.在新生小鼠和成年小鼠大脑中NSSR1的表达存在差异：在大脑海马中,成年小鼠NSSR1的表达显著增强,而新生小鼠NSSR1的表达较低;在小脑中,成年大鼠的NSSR1广泛分布在小脑皮质包括浦肯野氏细胞、颗粒细胞等神经元细胞中,而新生鼠的NSSR1主要在浦肯野氏细胞中表达.结论：NSSR1在小鼠大脑中的表达受到发育调控.

SATB1——核基质结合区结合蛋白质1的研究进展

在真核生物的细胞核中．存在一种由非组蛋白的纤维蛋白和大分子量的RNA组成的三维网架体系．这就是核基质。结合在核基质上的特异DNA序列称为核基质结合区（matrix attachment regions S/MAR以下统称MAR）。核基质结合区结合蛋白质1 （special AT-rich sequence binding proteinl, SATB1 ） 是一种组织特异性表达的核基质附着区（matrix attachment region，MAR）结合蛋白。

树鼠句膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1cDNA和蛋白质结构分析及其组织表达

目的获得不易感动脉粥样硬化动物树鼠句的膜转运蛋白ATP结合盒转运体A1的cDNA和蛋白质序列,鉴定其组织分布,探讨其是否参与树鼠句独特的高密度脂蛋白代谢。方法以树鼠句肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列并推导出其氨基酸序列,应用实时聚合酶链反应技术分析树鼠句ATP结合盒转运体A1 mRNA在各组织中的分布情况。结果获得的树鼠句ATP结合盒转运体A1 cDNA序列全长为7 762 bp,其中开放阅读框架6 786 bp,编码2 261个氨基酸的蛋白。该蛋白与人ATP结合盒转运体A1的长度相同,二者在氨基酸水平上高度同源(95%)。多组织表达谱显示树鼠句ATP结合盒转运体A1在多种组织中广泛表达,其中表达量最高的依次为肺脏、肝脏、肾脏和脾脏,这与人和小鼠ATP结合盒转运体A1在肝中高表达而在肺和脾中低表达的分布有很大差异。结论树鼠句ATP结合盒转运体A1组织表达谱的特点有可能增加其在体内的浓度和数量,从而可能间接增加高密度脂蛋白的合成。