碳酸缓冲液对光气损伤大鼠AT-Ⅱ细胞基因表达的影响

目的 观察碳酸缓冲液干预对光气染毒后大鼠AT-Ⅱ细胞基因表达的影响,以深入探讨其作用的分子机制。方法分别抽提正常组、损伤组及干预组AT-Ⅱ细胞总RNA,通过逆转录方法,进行荧光标记后,制备成cDNA探针,与表达谱芯片进行杂交及扫描测定,通过计算机进行数据处理、基因库对比并筛选出差异表达基因。结果 经碳酸缓冲液干预后,筛选出的差异表达基因数由单纯损伤组的161条降低到了115条,且大部分与肺损伤相关基因的异常表达均得到了抑制,并出现了新的差异基因。结论碳酸缓冲液在干预光气中毒中具有一定的保护作用,为探讨光气中毒和临床治疗机制提供了新的思路。

银杏叶提取物干预肺纤维化模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的变化

目的:观察AT-Ⅱ细胞在博莱霉素致大鼠肺纤维化过程中的动态变化及银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠AT-Ⅱ细胞凋亡的影响。方法:96只W istar大鼠,随机分成正常组(A组)、模型组(B组)、强的松干预组(C组)、银杏叶提取物干预组(D组)。每组各24只,除A组外,其余各组采用博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D组用银杏叶提取物灌胃,C组用强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃。每组分别于造模后第7、14、28天随机取8只大鼠,参照文献提取AT-Ⅱ细胞,用流式细胞仪检测AT-Ⅱ细胞凋亡率。结果:博莱霉素可使AT-Ⅱ细胞的凋亡率明显增加;D组与B组相比,凋亡率有显著下降(P<0.05)。结论:银杏叶提取物对AT-Ⅱ细胞可能有直接抗凋亡作用,可能通过抑制AT-Ⅱ细胞的过度凋亡而起到保护和修复肺泡结构及功能的作用。

^(139)PuO_2粒子所致肺泡Ⅱ型上皮细胞剂量的实验估算及其生物学意义

本工作采用图象分析仪对经锇酸灌注后能专门显示肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ细胞)的大鼠肺组织切片测定了肺中三种成份(肺泡腔、间质、AT-Ⅱ细胞)的体视学参数;并模拟了^(239)PuO_2粒子自沉积部位发射的α径迹在肺内的能量损失过程,用 Monte Carlo 法计算了500条径迹在肺组织中穿行时,在这三种成份中的能量沉积份额、LET 和比能分布,对 AT-Ⅱ细胞,还计算了单次击中的吸收剂量分布和距发射点不同距离处单一细胞被击中次数的概率分布。本文所得的结果为生物效应的研究提供了剂量学依据。

NIX基因在机械牵张诱导肺组织损伤中的作用

目的探讨急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)后肺泡细胞的NIX基因及蛋白表达水平与创伤严重程度的关系及意义。方法建立不同严重程度大鼠胸部撞击伤模型,利用免疫组化、RT-PCR分子生物学技术、TUNEL分析法分别检测不同程度创伤模型大鼠,伤后6,12,24,48,72,96h肺泡细胞NIX基因及其蛋白表达水平。结果⑴创伤组与对照组均存在NIX蛋白表达,NIX在伤后6h开始表达增高,并在48h达到峰值,随后逐渐下降,96h后接近致伤前水平。⑵肺组织中NIX蛋白表达变化与肺损伤程度呈显著性正相关(r=0.303,P<0.01)。⑶致伤组与对照组肺泡相比细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论NIX表达水平和肺损伤严重程度正相关,这可能是创伤后肺泡细胞损伤的分子生物学基础之一。

模拟大气混合污染物对大鼠肺表面蛋白A影响

目的筛选敏感的生物标志物,探讨大气混合污染物对肺泡II型上皮细胞(AT-II)的损伤及其机制,为控制大气污染的危害提供理论依据。方法使用便携式PM2.5采样器和47mm玻璃纤维滤膜采集大气粉尘样品,制成生理盐水混悬液,实验大鼠气管注入混悬液及动态吸入SO2、NO2、CO混合气,制备大气混合污染物吸入动物模型,测定染毒不同时间血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肺表面活性蛋白(SP-A)水平,肺组织中SP-A的mRNA及蛋白表达。结果染毒7 d组大鼠肺组织中SP-A mRNA表达为1.816±1.299,明显高于染毒1、30 d组(0.930±0.587;0.902±0.378)及对照组;染毒30 d组大鼠肺组织中SP-A表达吸光度值为0.385±0.068,明显低于染毒7 d组(0.438±0.069)及对照组;染毒30 d组大鼠BALF中SP-A水平为47.09±5.78,明显低于染毒1、7 d组(54.72±6.15;58.82±9.76)及对照组;染毒30 d组大鼠血清中SP-A水平明显高于染毒1、7 d组及对照组。结论 SP-A是反映AT-II功能受损严重程度的肺特异性指标。