ACE基因I/D和AT1R基因A1166C多态性与氢氯噻嗪降压疗效的相关性研究

目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因I/D与血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)基因A1166C多态性与氢氯噻嗪(HCTZ)降压疗效的关系。方法原发性高血压患者服用HCTZ6周后,按不同ACE基因型和AT1R基因型分组,比较不同基因型组合患者的血压下降值。结果ACE基因DD、ID、Ⅱ基因型患者收缩压均下降,DD基因型患者收缩压下降值显著大于ID、II型患者(P<0.05);AT1R基因AC(CC)和AA基因型患者收缩压下降值组间比较无显著差异(P>0.05);DD+AC(CC)基因型组合患者收缩压亦下降,与其他基因型组合患者比较无显著差异(P>0.05)。多因素分析结果表明,治疗前醛固酮浓度和DD基因型是影响患者收缩压下降的主要因素。结论ACE基因的DD基因型与HCTZ的降压疗效相关;AT1R基因AC(CC)、DD+AC(CC)型组合患者对HCTZ的降压反应可能优于其他基因型组合患者。

AT1R基因多态性与高血压患者左室舒张功能不全的相关性

目的研究血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)多态性与高血压患者左室舒张功能不全的相关性。方法选取2018年1～5月我院收治的100例原发性高血压(EH)患者作为研究对象,检测所有入选患者AT1R基因分型,测量其血压[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、心率(HR)、左室舒张功能指标[舒张早期峰值血流速度(EPFV)、舒张晚期峰值血流速度(APFV)、EPFV/APFV、E峰减速度时间(DT)、等容舒张时间(IVRT)、二尖瓣口舒张早期E波的峰值流速/二尖瓣环运动的峰值速度比值(E/Em)]、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)指标[血浆醛固酮(ALD)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)]、血浆B型钠尿肽(BNP),并分析各项指标与AT1R基因分型的相关性。结果三种基因类型的SBP、DBP、HR、左室舒张功能各项超声指标、血浆BNP及RAAS指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AT1R基因不同类型与SBP、DBP、HR、ALD、AngⅡ、BNP、APFV、IVRT、DT、E/Em均成正相关(r均≥0.3,P<0.05);AT1R基因不同类型(AA、AC、CC)与EPVF、EPFV/APFV均成负相关(|r|均≥0.3,P<0.05)。AngⅡ、ALD与SBP、DBP、HR、BNP、APFV、IVRT、DT、E/Em均成正相关(r均≥0.3,P<0.05);AngⅡ、ALD与EPVF、EPFV/APFV均成负相关(|r|均≥0.3,P<0.05)。结论 AT1R基因多态性与EH患者的血压、HR、血浆BNP水平、左室舒张功能指标、RAAS指标具有明确的相关性。

AT1R基因多态性对高血压并舒张功能不全患者厄贝沙坦治疗效果的影响

目的观察AT1R基因多态性对原发性高血压患者厄贝沙坦降压疗效的影响。方法选取2017年1月~2018年1月我院收治的100例原发性高血压患者作为研究对象,根据血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)基因检测结果将入选患者分为AA组、AC组和CC组,均给予厄贝沙坦进行治疗。治疗1个疗程后,评估三组患者的临床疗效,观察三组患者的血压、心率、左室舒张功能指标、肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统指标与血浆脑尿钠肽(BNP)表达水平的变化情况。结果 AA组的临床疗效优于AC组与CC组,三组的临床疗效比较差异有统计学差异(P<0.05);治疗前、后AA组患者的血压、心率低于AC组、CC组,AC组低于CC组,三组比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前、后AA组的舒张早期峰值血流速度(EPFV)、EPFV/APFV高于AC组与CC组,AC组高于CC组,AA组舒张晚期峰值血流速度(APEV)、等容舒张时间(IVRT)、E峰减速度时间(DT)、E/Em低于AC组与CC组,AC组低于CC组,三组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗前、后AA组患者的醛固酮(ALD)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、BNP表达水平低于AC组、CC组,AC组低于CC组,三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AT1R基因不同类型可影响厄贝沙坦的降压效果,在AA型、AC型与CC型中AA型患者疗效最佳,CC型疗效最差,同时CC型患者的左心功能与ALD、AngⅡ及血浆BNP均差于AA型、AC型患者。

稳定表达AT1R基因且分泌Aβ的HEK293细胞株构建

目的:用人血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因转染表达人Aβ前体蛋白(APP)及早老素蛋白1(PS1)的人胚肾293(APP-PS1-HEK293)细胞,建立稳定转染细胞系。方法:利用真核表达载体pcDNA3.1-AT1R以阳离子脂质体法转染APP-PS1-HEK293细胞,pcDNA3.1-EGFP为阴性对照,通过G418(600μg/ml)选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR、细胞免疫荧光及Western blot检测转染的AT1R的表达。结果:pcDNA3.1-AT1R稳定转入APP-PS1-HEK293细胞,稳定成功表达目的基因。结论:稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究AT1R对Aβ分泌的影响及其在阿尔茨海默病发病机制探讨中提供了良好实验基础。

AT1R基因A1166C多态性与急性心肌梗死的相关性研究

目的研究AT1R基因A1166C多态性与急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法采用PCR-RFLP方法,对105例初发AMI患者和111例健康对照个体进行AT1R基因A1166C多态性分析。结果 AT1R基因A1166C多态性中AA和AC+CC基因型在AMI患者组的频率分别为88.6%和11.4%,等位基因A和C的频率分别为93.3%和6.7%;AA和AC+CC基因型在对照组中的频率分别为92.8%和7.2%,等位基因A和C的频率分别为95.9%和4.1%。AMI组与对照组比较,AA和AC+CC基因型频率及A和C两等位基因频率均无统计学显著性差异(P>0.05)。Logistic回归分析显示高血压、冠状动脉疾病家族史、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇是AMI发生的独立危险因素(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇是保护性因素(OR<1,95%CI 0.155～0.931),其余三项为危险因素(OR>1)。结论 AT1R基因A1166C多态性与AMI的发生可能无关联。

藁苯内酯对自发性高血压大鼠AT1R基因表达的影响

目的：通过观察藁苯内酯对自发性高血压大鼠心肌组织AT1R基因表达的影响,探讨其影响高血压发生的作用机制。方法：将自发性高血压大鼠随机分为模型组、当归挥发油组（低、中、高）、藁苯内酯组、缬沙坦组,同周龄Wistar大鼠作为正常对照组,每组10只,模型组及正常对照组给予等量生理盐水灌胃。采用无创血压检测系统检测给药后1~4周各组大鼠血压;QT-PCR法检测AT1R m RNA表达量,Western Blot检测AT1R蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,各给药组血压下降差异显著（P〈0.05）,藁本内酯组AT1R的m RNA及蛋白表达水平均下调,差异显著或极显著（P〈0.05或P〈0.01）。结论：当归可能通过其有效成分藁苯内酯对血压有干预作用,可能通过AT1R靶点发挥作用。

AT1R、ACE及PAI-1基因多态性的表达与AECOPD并发肺心病的相关性研究

目的研究I/D多态性和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、血管紧张素转化酶(ACE)及纤溶酶原活化剂抑制物-1(PAI-1)基因多态表达与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)并发肺心病的相关性。方法选取2016年7月-2018年9月在我院就诊的AECOPD并发肺心病患者38例为观察组,并选取同期AECOPD患者38例为对照组,均行AT1R、ACE及PAI-1基因多态性表达检测,对比两组ACE基因型和等位基因分布、AT1R基因型和等位基因分布、PAI-1基因多态性表达情况,并分析其相关性。结果观察组ACE基因型频率(DD、ID)和等位基因频率(D)高于对照组,基因型频率Ⅱ和等位基因频率Ⅰ低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组AT1R基因型频率(AA、AC)及等位基因频率A高于对照组,AT1R基因型频率CC和等位基因频率C低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组PAI-1基因多态性表达(4G/4G、4G/5G、5G/5G)高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson分析,AT1R、ACE及PAI-1基因多态性表达与AECOPD并发肺心病呈正相关性(P>0.05)。结论AT1R、ACE及PAI-1基因多态性表达与AECOPD并发肺心病呈正相关性,可以作为临床靶向基因检测因子。

血管紧张素Ⅱ1型受体A1166C多态性在云南彝族人群中的分布

目的了解云南省晋宁县彝族人群AT1R基因A1166C多态性分布的情况,为研究AT1R基因相关性疾病的发病机制奠定基础.方法采用PCR-RFLP技术对居住在云南省晋宁县180例彝族健康个体的AT1R基因A1166C多态性进行分析,获得其基因型频率和等位基因频率分布情况,并与其他人群该位点多态性进行比较.结果云南省晋宁县彝族AT1R基因的AA、AC、CC基因型频率分别为95.6%、4.4%和0%,A、C等位基因频率分别为97.8%和2.2%.此位点多态性分布与不同人群比较,除凉山彝族外,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AT1R基因A1166C多态性分布存在民族、种族差异.

老年高血压相关基因多态性与厄贝沙坦降压疗效的相关性研究

目的探讨老年高血压相关基因多态性对厄贝沙坦降压作用的影响。方法选取150例轻、中度老年高血压患者，均给予厄贝沙坦治疗8w，在临床观察疗效的同时，采用PCR-RFLP技术对患者ACE基因I/D多态性、AGT基因M235T多态性和AT1R基因A1166C多态性进行检测。结果与携带ACE基因II基因型的老年高血压患者比较，携带ID和DD基因型的患者服药后血压下降幅度明显增大，差异具有统计学意义（P＜0.05）；AGT基因和AT1R基因多态性各基因型之间血压下降幅度差异均无统计学意义。结论ACE基因I/D多态性与老年高血压患者服用厄贝沙坦后的血压下降幅度有相关性。

脑出血患者血管紧张素Ⅱ受体-1基因A1166C的多态性分析

目的:探讨脑出血(ICH)患者血管紧张素Ⅱ受体-1(AT1R)A1166C基因多态性。方法:应用聚合酶链式反应———限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测80名ICH患者和90名健康对照者的AT1R基因型和等位基因。结果:170例样本中ICH组和正常对照组比较,AT1R AC基因型频率为32.5%,C等位基因频率为16.2%,明显高于正常对照组(P<0.05);经Logistic回归分析,发病的相对危险度(OR)为3.852,与AT1R AA基因型OR值0.260相比差异有统计学意义(P<0.05),AT1R AC基因型增加脑出血发生的概率。结论:AT1R A1166C基因多态性可能是ICH发病的独立遗传因素。

ACE2通过下调AT_1R和ERK1/2的磷酸化

目的探讨血管紧张素转换酶2(ACE2)对血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和细胞外基质激酶(ERK)1/2磷酸化水平及细胞增殖的影响。方法荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达;将载有ACE2基因慢病毒表达载体(Lentiviral-ACE2)以感染复数为10(MOI=10)感染平滑肌细胞不同时间(24、48、72、96 h);采用CCK-8法检测平滑肌细胞增殖;Western blot检测ACE2、AT1R及ERK1/2磷酸化水平。结果目的蛋白GFP表达量明显增加,慢病毒ACE2的表达量成时间依赖性增加,并且在96 h时蛋白表达量较对照组和空载体组明显升高,(1.22±0.06 vs 0.53±0.03和0.53±0.09,P<0.05,n=4);AngⅡ(10-7 mol·L-1)可以促进平滑肌细胞的增殖,ACE2能够抑制AngⅡ诱导的平滑肌细胞增殖(0.53±0.10 vs 0.68±0.03,P<0.05,n=5);AngⅡ(10-7mol·L-1)作用平滑肌细胞12 h后AT1R明显上调,同时ACE2明显抑制AngⅡ诱导的AT1R的上调(0.34±0.01 vs 0.73±0.07,P<0.05,n=4);ACE2能够明显抑制AngⅡ诱导的ERK1/2的磷酸化水平(0.43±0.06 vs 0.71±0.08,P<0.05,n=4)。结论 ACE2可以通过下调AT1R和/及ERK1/2的磷酸化水平而抑制平滑肌增殖,提示ACE2的过表达具有血管保护作用。

阴虚体质原发性高血压的基因多态性研究

[目的]探究阴虚质与平和质原发性高血压(essential hypertension,EH)患者血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)、血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensinⅡ-type 1 receptor,AT1R)、血管紧张素Ⅱ-2型受体(angiotensinⅡ-type 2 receptor,AT2R)、Mas受体(Mas receptor,MasR)4个基因下的13个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的位点差异。[方法]纳入符合标准的70例阴虚质及30例平和质EH患者,采集静脉血,对ACE、AT1R、AT2R、MasR 4个基因下13个SNP位点进行测序分型。[结果] 13个SNP位点均符合哈迪-温伯格平衡定律(P>0.05),样本代表性良好。AT1R基因rs5182基因型CC、CT和TT在平和质EH患者中的频率分布分别为16.7%、36.7%和46.7%,在阴虚质EH患者中频率分布分别为2.9%、58.6%和38.6%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05);基因型CC与CT+TT在平和质EH患者中频率分布分别为16.7%和83.3%,在阴虚质EH患者中频率分布分别为2.9%和97.1%,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论] EH患者AT1R基因rs5182位点的多态性可能与阴虚质存在关联,T等位基因可能是EH患者阴虚质的易感基因。

异钩藤碱通过AT1受体调控血管平滑肌细胞时钟基因昼夜节律的研究

【目的】探讨异钩藤碱通过血管紧张素1型受体(AT1R)对血管平滑肌细胞(A7r5细胞)时钟基因昼夜节律改变的调控作用。【方法】采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导A7r5细胞构建时钟基因节律改变模型。实验分为正常对照组、模型组(AngⅡ剂量为0.1μmol/L)、异钩藤碱组(异钩藤碱剂量为31μmol/L)和异钩藤碱联用缬沙坦(AT1R阻滞剂)组(异钩藤碱31μmol/L、缬沙坦10μmol/L)。采用实时定量聚合酶链反应(q PCR)法检测各个时间点不同组A7r5细胞中AT1R、Per2、Bmal1、Clock基因的表达水平,建立数学模型计算不同参数间的差别。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各个时间点不同组A7r5细胞中Src和p-Src蛋白表达情况。【结果】A7r5细胞经AngⅡ(0.1μmol/L)作用后,AT1R、Per2、Bmal1、Clock基因出现昼夜节律改变,呈现反杓型波动;Src蛋白磷酸化表达增加。异钩藤碱(31μmol/L)作用后,上述时钟基因表达恢复正常的杓型波动。异钩藤碱(31μmol/L)与缬沙坦(10μmol/L)联用后,上述时钟基因的昼夜节律受到一定程度的抑制,各组细胞的中值、振幅和峰相位发生不同程度的改变,Src蛋白磷酸化水平下调。【结论】异钩藤碱通过AT1R-Src信号途径可调控AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞时钟基因表达的昼夜节律改变。

云南彝族女性AGT M235T、AT1R A1166C多态性与原发性高血压的相关性研究

目的:研究血管紧张素原(AGT)M235T、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)A1166C多态性与云南彝族女性原发性高血压(EH)的相关性。方法:通过现场问卷调查和体格检查获取云南省晋宁县147例彝族女性EH患者和111例彝族女性健康个体的基本资料,采用PCR-RFLP技术检测AGT M235T、AT1R A1166C多态性,并对结果进行相关性分析。结果:①EH患者AGT 235T等位基因频率(78.6%),AT1RAC/CC基因型频率(8.2%)和1166C等位基因频率(4.4%)均高于对照(P<0.05)。②单因素分析显示,同时携带235T和1166C的个体患EH风险显著增高(OR=8.250,P<0.05)。结论:AT1RA1166C多态性是云南彝族女性EH的遗传易感因素,与AGT 235T等位基因间有协同致EH作用。

基于AT1R基因位点与环境因素交互作用的原发性高血压痰湿壅盛型证候实质研究

目的从基因位点和环境因素的交互作用方面探讨原发性高血压痰湿壅盛型的证候特征。方法选择原发性高血压痰湿壅盛型患者100例(痰湿壅盛组),同期选取体检合格者100例做对照(对照组)。采用多重高温连接酶检测反应基因分型技术检测各组患者AT1R基因的A1166C及T573C位点多态性,利用多因素降维分析法分析环境因素与血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)基因多态性交互作用对原发性高血压痰湿壅盛证形成的影响。结果痰湿壅盛组与对照组比较,环境危险因素中的家族史、饮食、体重指数(BMI)差异有统计学意义(P<0.05)。两组受试者AT1R基因T573C、A1166C位点不同基因型比较,差异无统计学意义(P>0.05)。BMI、饮食及家族史与AT1R基因T573C位点交互作用与痰湿壅盛证形成有关,交互危险度为29.99(P<0.01)。结论 BMI、饮食及家族史与AT1R基因T573C位点组成的交互对原发性高血压痰湿壅盛形成具有重要作用。

AT1R基因A1166C多态性与贵州布依族、汉族原发性高血压的相关性研究

目的:研究血管紧张素1型受体(AT1R)基因A1166C多态性与贵州地区布依族、汉族原发性高血压(EH)的相关性。方法:在贵州省独山县人民医院病房及门诊收集的EH确诊病例为高血压组,布依族77例,汉族74例;门诊体检选取健康成年人群为正常对照组,布依族64例,汉族78例。采用PCR扩增技术及限制性酶切法(PCR-RFLP),检测布依族、汉族高血压组及正常对照组的外周血白细胞DNA中AT1R基因A1166C的多态性,统计分析布依族、汉族高血压组和正常对照组中A1166C基因型及等位基因频率的分布情况。结果:布依族高血压组的AA、AC和CC基因型频率分别为93.5%、6.5%和0,而在正常对照组中分别为95.3%、4.7%和0,两组进行对比差异无统计学意义(P=0.728);布依族高血压组中A与C等位基因频率分别为96.8%、3.2%,而在正常对照组中分别为97.7%、2.3%,两组比较差异也无统计学意义(P=0.732)。汉族高血压组的AA、AC和CC基因型频率分别为87.8%、12.2%和0,而在正常对照组中分别为97.4%、2.6%和0,两组进行对比差异有统计学意义(P=0.022);汉族高血压组中A与C等位基因频率分别为93.9%、6.1%,而在正常对照组中分别为98.7%、1.3%,两组比较差异有统计学意义(P=0.025),高血压组的AC基因型与C等位基因频率显著增高。结论:在贵州地区,AT1R基因A1166C多态性与布依族人群的EH无显著相关性,而与汉族人群的EH具有显著相关性,AC基因型和C等位基因可能是高血压发生的危险因素。

肾素-血管紧张素系统关键基因交互作用对原发性高血压病中医证候的影响

目的:探讨原发性高血压病(EH)患者不同中医证型与肾素-血管紧张素系统(RAS)关键基因血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素原(AGT)、血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1R)基因交互作用的相关性。方法:选择EH患者400例,中医辨证分型为肝火亢盛型、阴虚阳亢型、阴阳两虚型、痰湿壅盛型,另选取对照组100例,检测其临床生化指标,采用多重高温连接酶技术(im LDR)检测ACE基因I/D、AGT基因G217A、AT1R基因A1166C基因多态性。结果:AGT基因G217A位点基因型在不同中医证型间分布差异具有统计学意义(P<0.05)。ACE基因I/D、AT1R基因A1166C位点基因型、等位基因在不同中医证型间频率分布差异均无统计学意义。ACE基因I/D与AGT基因G217A位点组成的交互模型是EH肝火亢盛组、痰湿壅盛组和阴阳两虚组的最佳模型(P<0.05)。结论:RAS关键基因之间的交互作用对EH中医证型的发病有影响;ACE、AGT基因之间存在协同作用,与EH肝火亢盛证、痰湿壅盛证和阴阳两虚证发病有关。

血管紧张素Ⅱ1型受体A1166C多态性与云南彝族原发性高血压的相关性

目的:研究血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)A1166C多态性与云南彝族原发性高血压(EH)的相关性。方法:采用PCR-RFLP技术检测云南省晋宁县235例彝族EH患者(EH组)和180例彝族健康者(对照组)的AT1R基因A1166C多态性,并进行相关性分析。结果:EH组AA、AC+CC基因型频率为91.9%、8.1%,对照组为95.6%、4.4%;2组A1166等位基因的频率分别为95.7%和97.8%,均差异无统计学意义。在彝族女性中,EH患者AC+CC基因型和C等位基因频率明显高于对照组(均P<0.05)。结论:AT1R基因A1166C多态性可能是云南彝族女性EH的遗传易感因素。