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基于单细胞ATAC测序数据的乳腺癌上皮细胞转录因子研究
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作者 张雅娜 牟苑菁 +2 位作者 李苇祥 赵俊焱 郭志云 《生命科学研究》 CAS 2024年第2期171-178,共8页
研究表明,乳腺肿瘤细胞染色质开放区域上的转录因子显著影响乳腺癌患者的临床表型和预后。然而,在单细胞层面,这些调控元件如何调控乳腺癌发生发展尚不明确。为此,本研究从GEO数据库中下载了45216个正常和肿瘤乳腺组织的单细胞染色质可... 研究表明,乳腺肿瘤细胞染色质开放区域上的转录因子显著影响乳腺癌患者的临床表型和预后。然而,在单细胞层面,这些调控元件如何调控乳腺癌发生发展尚不明确。为此,本研究从GEO数据库中下载了45216个正常和肿瘤乳腺组织的单细胞染色质可及性测序(single-cell ATAC sequencing,scATAC-seq)数据,并对其进行了分析。根据标记基因在细胞群的基因活性得分进行细胞类型注释后得到7种乳腺细胞类型。皮尔逊相关性分析表明,肿瘤和正常乳腺样本的上皮细胞存在明显的染色质可及性差异,且乳腺上皮细胞存在高度样本间异质性(PCC=-0.07),暗示其是乳腺肿瘤的主要恶性细胞类型。为了探究正常和恶性乳腺上皮细胞的差异可及性区域中转录因子结合基序的富集情况,在提取上皮细胞群后对4个上皮细胞亚型的特征开放区域进行了转录因子结合基序富集分析。结果表明,恶性乳腺上皮细胞有194个转录因子显著富集(P<0.001),它们可能涉及乳腺肿瘤发展和转移等调控过程。对上皮细胞亚型中富集程度较高的转录因子进行活性分数计算及转录组数据验证,结果进一步显示这些差异调控元件可能与乳腺细胞恶性发展相关。此外,对转录因子结合基序在不同乳腺癌亚型中的可及性差异进行了分析,发现SNAI2在三阴性乳腺癌样本中具有显著高的可及性,提示SNAI2在三阴性乳腺癌中具有潜在的特异性调控作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 单细胞 单细胞染色质可及性测序(scatac-seq) 转录因子
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Combined ATAC-seq,RNA-seq,and GWAS analysis reveals glycogen metabolism regulatory network in Jinjiang oyster(Crassostrea ariakensis)
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作者 Biao Wu Xi Chen +12 位作者 Jie Hu Zhen-Yuan Wang Yan Wang Da-You Xu Hao-Bing Guo Chang-Wei Shao Li-Qing Zhou Xiu-Jun Sun Tao Yu Xiao-Mei Wang Yan-Xin Zheng Guang-Yi Fan Zhi-Hong Liu 《Zoological Research》 SCIE CSCD 2024年第1期201-214,共14页
Glycogen serves as the principal energy reserve for metabolic processes in aquatic shellfish and substantially contributes to the flavor and quality of oysters.The Jinjiang oyster(Crassostrea ariakensis)is an economic... Glycogen serves as the principal energy reserve for metabolic processes in aquatic shellfish and substantially contributes to the flavor and quality of oysters.The Jinjiang oyster(Crassostrea ariakensis)is an economically and ecologically important species in China.In the present study,RNA sequencing(RNA-seq)and assay for transposase-accessible chromatin using sequencing(ATAC-seq)were performed to investigate gene expression and chromatin accessibility variations in oysters with different glycogen contents.Analysis identified 9483 differentially expressed genes(DEGs)and 7215 genes with significantly differential chromatin accessibility(DCAGs)were obtained,with an overlap of 2600 genes between them.Notably,a significant proportion of these genes were enriched in pathways related to glycogen metabolism,including“Glycogen metabolic process”and“Starch and sucrose metabolism”.In addition,genome-wide association study(GWAS)identified 526 single nucleotide polymorphism(SNP)loci associated with glycogen content.These loci corresponded to 241 genes,63 of which were categorized as both DEGs and DCAGs.This study enriches basic research data and provides insights into the molecular mechanisms underlying the regulation of glycogen metabolism in C.ariakensis. 展开更多
关键词 Crassostrea ariakensis GLYCOGEN TRANSCRIPTOME atac GWAS
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ATAC-seq在复杂疾病研究中的应用进展
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作者 陈敏 张峥 +1 位作者 孟紫媛 张学军 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期347-353,共7页
染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)是利用Tn5转座酶研究染色质可及性的高通量测序技术。ATAC-seq可以在全基因组范围内绘制染色质可及性图谱,揭示转录因... 染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)是利用Tn5转座酶研究染色质可及性的高通量测序技术。ATAC-seq可以在全基因组范围内绘制染色质可及性图谱,揭示转录因子结合位点以及核小体的位置。在医学领域,ATAC-seq技术是研究重大疾病发病机制、药物作用机制、新药研发和生物标志物功能等的新一代有力工具。本文对ATAC-seq技术的优势及其在复杂疾病研究中的应用和前景进行了综述,以期为人类复杂疾病基因表达调控机制等相关研究的开展提供借鉴与参考。 展开更多
关键词 atac-seq 染色质可及性 Tn5转座酶 转录调控水平
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基于单细胞ATAC测序技术对18-三体综合征染色质开放性区域转录因子的分析
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作者 邱晓芬 汤冬娥 +9 位作者 虞海燕 廖秋燕 胡芷洋 周俊 赵鑫 何慧燕 梁灼健 许承明 杨明 戴勇 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期74-83,I0002-I0006,共15页
18-三体综合征是常见的常染色体非整倍体疾病之一,长期以来人们对18-三体综合征疾病的临床表型(如智力障碍、心脏、肾脏异常等)发生及发展相关的基因调控知之甚少。为探索影响该疾病表型的调控因子,本研究利用单细胞ATAC测序技术,对18-... 18-三体综合征是常见的常染色体非整倍体疾病之一,长期以来人们对18-三体综合征疾病的临床表型(如智力障碍、心脏、肾脏异常等)发生及发展相关的基因调控知之甚少。为探索影响该疾病表型的调控因子,本研究利用单细胞ATAC测序技术,对18-三体综合征和对照组的脐带血单个核细胞的开放性染色质区域的转录因子进行分析。捕获11,611个细胞构建的单细胞文库鉴定得到7种主要免疫细胞群,细胞数量统计的结果提示18-三体综合征的免疫系统异常。通过分析开放性染色质区域,筛选得到14个转录因子(P<0.05,|FC|>1.2)。采用实时荧光定量PCR验证其中4个转录因子(TEAD1、TEAD2、TEAD4、Twist2)的相对表达量的结果符合预期。上述研究结果表明这4个转录因子可能与18-三体综合征患者心脏和骨骼发育的异常相关,为18-三体综合征表型的发生及发展的机制研究提供候选分子。 展开更多
关键词 18-三体综合征 单个核细胞 单细胞atac测序 转录调控 转录因子
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抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2单克隆抗体的制备
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作者 马延森 李晓 +4 位作者 陈志 兰向丽 武小椿 靳亚平 刘伟 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第3期33-38,共6页
【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21... 【目的】制备抗果蝇组蛋白乙酰转移酶Atac2的单克隆抗体,为进一步研究Atac2基因的功能提供重要的试验工具。【方法】PCR扩增果蝇Atac2蛋白N端前26个氨基酸的编码基因,构建GST-Atac2融合蛋白表达载体pGEX-Atac2。转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),进行诱导表达,通过GST亲和层析法纯化GST-Atac2融合蛋白。以GST-Atac2为抗原免疫8周龄的Balb/c小鼠,取脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法检测阳性孔,经有限稀释法亚克隆,筛选单克隆杂交瘤细胞株,检测抗体的特异性、效价和亚型,并检测其亲和常数。【结果】PCR扩增获得了目的片段。成功构建了GST-Atac2融合蛋白表达载体,于37℃下220r/min振摇5h,当IPTG终浓度为0.1mmol/L时,GST-Atac2在E.coli BL21(DE3)中高效表达,GST-Atac2融合蛋白大小约为30ku,与预期结果一致。获得1株稳定分泌抗Atac2抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C7。单抗1C7能够特异地识别GST-Atac2蛋白,效价为1∶2×105;亚型鉴定表明其重链为IgG1,所得单克隆抗体的亲和常数为2×105。【结论】获得了1株特异性好、能够稳定分泌抗果蝇Atac2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。 展开更多
关键词 果蝇 atac2 原核表达 单克隆抗体
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联合应用RNA-seq和ATAC-seq寻找FOXQ1转录因子的下游靶基因
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作者 伊梦杰 张锦锦 +1 位作者 郭强 唐慧 《生物信息学》 2019年第4期227-236,共10页
结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种全球高发的恶性肿瘤,发病原因复杂且预后较差。近年来发现叉头框Q1(Forkhead box Q1,FOXQ1)基因作为一类核转录因子在结直肠癌中高表达,可控制下游基因转录活性。本实验拟探究CRC细胞中FOXQ1的转... 结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一种全球高发的恶性肿瘤,发病原因复杂且预后较差。近年来发现叉头框Q1(Forkhead box Q1,FOXQ1)基因作为一类核转录因子在结直肠癌中高表达,可控制下游基因转录活性。本实验拟探究CRC细胞中FOXQ1的转录调控功能并寻找其下游基因。方法:(1)构建低表达FOXQ1基因的稳定转染CRC细胞株;(2)应用RNA seq检测FOXQ1敲低前后表达量显著差异的基因;(3)应用转座酶可接近性核染色质区域测序分析(Assay for Trans posase-Accessible Chromatin using sequencing,ATAC seq)检测FOXQ1敲低前后细胞染色质易接近性的变化;(4)进一步对FOXQ1敲低前后的RNA seq和ATAC seq数据进行一系列生物信息学分析,寻找CRC中FOXQ1转录调控的潜在下游基因。结果:应用RNA seq筛选出了敲低FOXQ1后表达显著差异的基因EI24、TLR2、SMAD3,通过联合分析两细胞系的测序结果,发现FOXQ1基因敲低后,在DLD1和SW480两个细胞系中染色质易接近性均增强且表达量均上调的基因有61个,染色质易接近性均减弱且表达量均下调的基因有70个,且EI24、TLR2、SMAD3基因均位于重叠分析结果中,其中TLR2、SMAD3基因的染色质区域有明显变化,而EI24基因的染色质区域变化不明显。通过代谢通路分析找到了EI24、TLR2、SMAD3基因所富集的代谢通路。其中SMAD3、TLR2基因在炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)通路中显著富集。EI24基因在p53信号通路(p53 signaling pathway)通路中显著富集。结论:基于染色质易接近性的变化和转录水平的研究发现:敲低FOXQ1基因对CRC细胞系中染色质的开放情况有较大的影响,且影响FOXQ1转录调控的下游基因的表达。找到了FOXQ1敲低后在SW480、DLD1中均发生变化的基因,为丰富FOXQ1转录因子的下游调控网络提供了研究基础。 展开更多
关键词 atac seq RNA seq 结直肠癌 靶基因
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IME ATAC公司开发的XS TITAN系列碳纤维脚踏
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《中国自行车》 2004年第8期38-39,共2页
关键词 IME atac公司 越野赛车 碳纤维脚踏 结构性能 市场价格
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利用ATAC-seq技术研究Ⅰ型干扰素通路活化后人单核细胞的染色质开放性改变 被引量:1
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作者 欧阳也 秦玉婷 +1 位作者 姚超 沈南 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期451-457,共7页
目的检测人单核细胞经干扰素α(interferon α,IFNα)刺激后在全基因组水平上的染色质开放性变化。方法收集健康人外周血单核细胞,运用基于转座酶和高通量测序的染色质分析(assay for transposase-accessible chromatin using sequencin... 目的检测人单核细胞经干扰素α(interferon α,IFNα)刺激后在全基因组水平上的染色质开放性变化。方法收集健康人外周血单核细胞,运用基于转座酶和高通量测序的染色质分析(assay for transposase-accessible chromatin using sequencing,ATAC-seq)技术检测染色质开放性。使用生物信息学工具进行富集分析和可视化分析。结果经过 IFNα处理后,染色质开放性发生显著增加的区域有 430 个,显著降低的区域有 442 个;大部分开放结构位于基因的启动子和临近区域,其次是基因间区域以及基因的内含子区域。富集分析显示,染色质开放性明显增加的区域所关联的基因涉及的生物学过程大多是与干扰素相关的信号通路和抗病毒反应。可视化相应的染色质区域,效应性干扰素诱导表达基因(interferon-stimulated gene,ISG)的启动子及转录起始位点区域在 IFNα刺激之后 ATAC-seq 信号强度明显增强;而调节性 ISG 在 IFNα刺激前即已具备一定程度的开放性,刺激之后开放性有所增强。开放性增强区域含有干扰素刺激反应元件以及干扰素调控因子等重要转录因子的识别基序。结论Ⅰ型干扰素刺激后,人单核细胞的染色质开放性发生了特征性改变,为下游的相关基因表达做出准备。 展开更多
关键词 Ⅰ型干扰素信号通路 单核细胞 转座酶和高通量测序的染色质分析 染色质开放性 表观遗传学
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东日本铁路公司的Atacs系统
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作者 管明华(译) 孟娜(校) 《国外铁道机车与动车》 2023年第4期31-32,共2页
介绍了东日本铁路公司研发列车管理和通信系统(Atacs)的研发及应用情况。
关键词 东日本铁路公司 atacs系统 列车控制
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染色质开放状态对食管癌相关通路影响及关键基因分析
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作者 申展铭 李向东 +1 位作者 魏大为 张文平 《长治医学院学报》 2024年第2期81-86,共6页
目的:探讨染色质开放状态对食管癌相关通路的影响及对关键基因进行分析。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载食管癌染色质开放性高通量测序(ATAC-seq)数据,使用R4.2.1对2组数据分别进行基因注释,并进行KEGG通路富集分析与GO功能富... 目的:探讨染色质开放状态对食管癌相关通路的影响及对关键基因进行分析。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载食管癌染色质开放性高通量测序(ATAC-seq)数据,使用R4.2.1对2组数据分别进行基因注释,并进行KEGG通路富集分析与GO功能富集分析;对食管癌RNA-seq数据进行差异分析,筛选出与染色质开放状态相关性较高的2个基因ARL5B和RUNX1,并绘制KM生存曲线;对ARL5B、RUNX1进行单因素与多因素COX分析。结果:食管癌中ATAC-seq数据的峰值距离转录起始位点≤1 kb、1~2 kb、2~3 kb所占百分比分别为32.59%、6%、4.41%,位于远端基因间区的峰值占27.15%,这种现象和染色质开放区域的分布相一致。染色质开放区峰值绝大多数存在于转录起始位点附近,符合染色质开放性的特点。KEGG和GO功能分析结果显示,注释基因在Rap1信号通路、Hippo信号通路、ErbB信号通路、mTOR信号通路等明显富集。ARL5B高表达的食管癌患者预后较差(P<0.05),RUNX1高表达的食管癌患者预后较好(P<0.05)。结论:染色质开放状态在调节食管癌的发生和发展方面发挥重要作用,ARL5B、RUNX1基因可能成为食管癌的治疗靶点和预后指标。 展开更多
关键词 食管癌 TCGA数据库 atac-seq 染色体可及性
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Moco biosynthesis and the ATAC acetyltransferase engage translation initiation by inhibiting latent PKR activity
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作者 Tamaki Suganuma Selene KSwanson +2 位作者 Laurence Florens Michael PWashburn Jerry LWorkman 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期44-50,共7页
Molybdenum cofactor(Moco)biosynthesis is linked to c-Jun N-terminal kinase(JNK)signaling in Drosophila through MoaE,a molybdopterin(MPT)synthase subunit that is also acomponent of theAdaTwoAcontaining(ATAC)acetyltrans... Molybdenum cofactor(Moco)biosynthesis is linked to c-Jun N-terminal kinase(JNK)signaling in Drosophila through MoaE,a molybdopterin(MPT)synthase subunit that is also acomponent of theAdaTwoAcontaining(ATAC)acetyltransferasecomplex.Here,weshow thathumanMPTsynthase and ATAC inhibited PKR,a double-stranded RNA-dependent protein kinase,to facilitate translation initiation of iron-responsive mRNA.MPT synthase and ATAC directly interacted with PKR and suppressed latent autophosphorylation of PKR and its downstream phosphorylation of JNK and eukaryotic initiation factor 2a(eIF2a).The suppression of eIF2a phosphorylation via MPT synthase and ATAC prevented sequestration of the guanine nucleotide exchange factor eIF2B,which recycles eIF2-GDP to eIF2-GTP,resulting in the promotion of translation initiation.Indeed,translation of the iron storage protein,ferritin,was reduced in the absence of MPT synthase or ATAC subunits.Thus,MPT synthase and ATAC regulate latent PKR signaling and link transcription and translation initiation. 展开更多
关键词 atac Moco biosynthesis MPT synthase PKR
原文传递
适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序的提核建库方法
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作者 祁泽文 黄铭涵 +3 位作者 张佳卉 刘艺 韩烈保 何航 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1799-1807,共9页
为建立适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序(assay for transposase accessible chromatin with high-throughput sequencing, ATAC-seq)的细胞核提取和建库体系,本试验以水稻、小麦和结缕草的叶片及根系为研究材料,通过控制变... 为建立适用于多种禾本科植物染色质转座酶可及性测序(assay for transposase accessible chromatin with high-throughput sequencing, ATAC-seq)的细胞核提取和建库体系,本试验以水稻、小麦和结缕草的叶片及根系为研究材料,通过控制变量试验确定最佳的细胞核提取方法:采用液氮研磨样品,初步提核离心速度选取1200×g,2次ORB溶液去除细胞器等杂质,蔗糖梯度缓冲液纯化细胞核。通过构建文库、库检及测序分析发现,所提取的细胞核适用于染色质转座酶可及性测序的建库,可获得高质量测序数据。本试验建立的适用于多种禾本科植物的提核体系为获取禾本科植物染色质开放区域信息以及深入研究基因表达的调控方式奠定了基础。 展开更多
关键词 禾本科 染色质可及性 atac-seq 细胞核
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小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型的诊断(附1例报告)
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作者 王运 程云 +1 位作者 张帆 杨武 《山东医药》 CAS 2023年第4期89-91,共3页
目的探讨1例RNU4ATAC基因突变导致小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型综合征的临床特征、基因突变特点。方法回顾性分析1例RNU4ATAC基因新生突变导致小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型综合征的临床资料,总结其临床表型,对基因突变特点进行分析,... 目的探讨1例RNU4ATAC基因突变导致小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型综合征的临床特征、基因突变特点。方法回顾性分析1例RNU4ATAC基因新生突变导致小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型综合征的临床资料,总结其临床表型,对基因突变特点进行分析,并复习相关文献。结果先证者为男童,1月27天,系“发热、咳嗽2天,呻吟半天”就诊,头围31 cm,小头畸形,小颌畸形,耳位低平,皮肤干燥,毛发稀疏,双眼突出,对受检者家系临床全外显子组及毗邻剪接区域进行基因变异分析,发现受检者携带编码小核RNA(snRNA)基因RNU4ATAC上的2个杂合变异,即M1:n.51G>A和M2:n.55G>A。测序结果显示这两个变异分别遗传自母亲和父亲,构成复合杂合变异,结合患儿临床表现及二代测序结果,最后确诊为小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型。未予特殊治疗,但随访未再出现病情加重现象。结论RNU4ATAC基因突变可导致小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型,预后不良,目前暂无有效治疗方案,基因检查可以早期诊断并评估风险。 展开更多
关键词 小头骨发育不良原始侏儒症Ⅰ型 RNU4atac基因 突变 小头畸形
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下一代列控系统技术方案探讨 被引量:21
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作者 程剑锋 田青 +1 位作者 赵显琼 孙帝 《中国铁路》 2014年第12期32-35,共4页
随着通信和控制技术的进一步发展,使下一代列控系统配置优化、性能提高成为可能。通过研究国际先进列控系统方案及其新功能的运用,提炼特点并分析其优势,结合CTCS-3级列控系统5年来的商业运营经验及我国铁路建设特点,探讨下一代列控系... 随着通信和控制技术的进一步发展,使下一代列控系统配置优化、性能提高成为可能。通过研究国际先进列控系统方案及其新功能的运用,提炼特点并分析其优势,结合CTCS-3级列控系统5年来的商业运营经验及我国铁路建设特点,探讨下一代列控系统功能特点、地面配置方案和技术实现方式,为集约型铁路建设服务。 展开更多
关键词 下一代列控系统 ETCS-3 PTC atacS
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间充质干细胞成骨分化早期染色质开放区域的动态变化
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作者 刘建云 张杰 +2 位作者 马百成 吴萍 熊建军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2037-2042,共6页
目的:在全基因组水平观察骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化早期染色质开放区域的动态变化。方法:原代培养人骨髓MSCs至第6代,成骨诱导剂分别刺激0、3、5和7 d。收集各组细胞,运用ATAC-seq技术(基于高通量测序的转座酶可接近染色质分析)... 目的:在全基因组水平观察骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化早期染色质开放区域的动态变化。方法:原代培养人骨髓MSCs至第6代,成骨诱导剂分别刺激0、3、5和7 d。收集各组细胞,运用ATAC-seq技术(基于高通量测序的转座酶可接近染色质分析)检测染色质开放区域,并对各组间染色质开放区域数量、开放区域的DNA基序以及邻近基因功能进行生物信息学分析。结果:在MSCs成骨定向分化早期的不同时点,细胞染色质开放区域数量发生显著动态变化;各组功能性区域peak分布主要富集在转录起始点附近;motif分析显示各组细胞间参与转录调控的活化DNA发生细微改变;新增染色质开放区域的生物学过程主要集中在各种GTP酶活性的调节、细胞外基质组成、Wnt信号通路等;而新增的基因显著性富集信号通路主要集中在Rap1信号通路、黏着斑、黏着连接等。结论:在骨髓MSCs成骨定向分化早期,各时段的染色质开放区域发生了显著的特征性改变。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨分化 atac-seq 生物信息学
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染色质转座酶可及性测序研究与数据分析 被引量:1
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作者 廖彬 杨佳怡 +3 位作者 陈桂芳 高运华 王晶 任歌 《中国测试》 CAS 北大核心 2020年第10期4-10,共7页
在真核生物中,染色质作为遗传物质DNA的载体,直接参与基因的表达调控。染色质的可及性是指染色质中的DNA能与转录因子等蛋白复合物结合的区域,对染色质可及性的测定可为获取开放区域的信息、核小体定位信息以及转录因子结合信息提供基... 在真核生物中,染色质作为遗传物质DNA的载体,直接参与基因的表达调控。染色质的可及性是指染色质中的DNA能与转录因子等蛋白复合物结合的区域,对染色质可及性的测定可为获取开放区域的信息、核小体定位信息以及转录因子结合信息提供基础依据。随着高通量测序技术的进步以及测序成本的降低,研究者已开发多种研究染色质可及性的测序方法,该文介绍4种常见的染色质可及性测序方法,对其中的染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)的原理和数据分析方法进行重点描述,讨论ATAC-seq的应用与发展趋势,为染色质可及性以及基因表达调控的研究提供参考。 展开更多
关键词 染色质可及性 测序 atac-seq 数据分析
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衰老细胞染色质开放变化的初步分析 被引量:1
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作者 宋乔 王亚琦 +4 位作者 侯玉丽 刘静 张晓敏 曹敏 王培昌 《生命科学研究》 CAS CSCD 2020年第2期109-117,共9页
为研究复制性衰老中表观遗传学的变化,以年轻代龄(PD26)和年老代龄(PD55)的人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)为材料,进行ATAC-seq测序,并使用Bowtie2、FastQC、MACS、deepTools、phastCons、R语言、HOMER以及基因本体论(Gene Ontology,GO)... 为研究复制性衰老中表观遗传学的变化,以年轻代龄(PD26)和年老代龄(PD55)的人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)为材料,进行ATAC-seq测序,并使用Bowtie2、FastQC、MACS、deepTools、phastCons、R语言、HOMER以及基因本体论(Gene Ontology,GO)对测序结果进行深入分析和挖掘。结果显示,2BS细胞染色质开放区域的保守性较强,其主要集中于启动子(promoter)区至转录起始位点(transcription start site,TSS),且年轻细胞与年老细胞的启动子区至转录起始位点的开放程度不同,细胞随着衰老在启动子区至转录起始位点的开放程度逐渐下降。进一步对年轻和年老细胞之间存在显著差异的靶基因进行GO分析发现,这些差异基因主要与细胞进程、代谢、生物性调节、结合功能、催化功能相关。本次研究发现衰老过程中染色质开放区减少、转录调控水平下降,提示复制性衰老与转录调控关系密切。 展开更多
关键词 复制性衰老 atac-seq测序 转录调控 染色质开放程度
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肝癌细胞系PLC/PRF/5中染色质重塑蛋白ATRX表达的调控作用 被引量:2
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作者 刘宏超 梁俊波 +1 位作者 李光宇 王晓月 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第6期781-785,共5页
目的探讨肝癌细胞中地中海贫血伴精神发育迟滞综合征基因(ATRX)对基因表达的影响及其可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除PLC/PRF/5细胞中的ATRX。全转录组测序技术(RNA-seq)检测ATRX敲除前后的基因表达水平,并用DESeq2软件得出差异... 目的探讨肝癌细胞中地中海贫血伴精神发育迟滞综合征基因(ATRX)对基因表达的影响及其可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术敲除PLC/PRF/5细胞中的ATRX。全转录组测序技术(RNA-seq)检测ATRX敲除前后的基因表达水平,并用DESeq2软件得出差异表达基因。最后利用转座酶可及性核染色质区域分析技术(ATAC-seq)对差异基因的染色质可及性进行分析。结果分析得到2754个差异表达基因,其中MUC16和CXCL8均在ATRX缺失后表达显著上调(P<0.05),且两基因附近都存在升高的染色质可及性的区域。结论在肝癌细胞中,ATRX调控大量基因的表达,且可能直接参与了MUC16与CXCL8的抑制,为进一步研究ATRX在肝癌发生中的作用提供了新的线索。 展开更多
关键词 ATRX RNA-SEQ atac-seq
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利用染色质开放性测序技术探讨叶酸缺乏对胚胎干细胞基因组结构变化调控影响 被引量:2
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作者 谢秋 李才华 +3 位作者 王滔 孙正怡 郁琦 张霆 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第6期673-678,共6页
目的 利用染色质开放性测序技术(ATAC-seq)探讨叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞(mESC)全基因组染色质结构影响特征。方法 使用4mg/ml浓度的正常叶酸培养基培养mESC24h作为正常对照组,使用终浓度为0.12μM的叶酸代谢障碍药物甲氨蝶呤(MTX)处理m... 目的 利用染色质开放性测序技术(ATAC-seq)探讨叶酸缺乏对小鼠胚胎干细胞(mESC)全基因组染色质结构影响特征。方法 使用4mg/ml浓度的正常叶酸培养基培养mESC24h作为正常对照组,使用终浓度为0.12μM的叶酸代谢障碍药物甲氨蝶呤(MTX)处理mESC24h作为MTX实验组,分别行ATAC-seq,获得胚胎早期全基因组染色质开放图谱。进行正常对照组及MTX实验组染色质开放区域数量、开放区域涉及基因功能及通路分析比较。结果 确立转座酶Tn57.5U消化正常对照组mESC,Tn55U消化MTX实验组mESC,获得清晰核小体周期条带建立ATAC-seq测序体系,分别设置3个生物学重复进行二代测序。MTX处理后开放性染色质结构数量明显减少(P<0.05);MTX处理后差异染色质开放区域主要集中在胚胎器官形成、细胞周期调控、神经骨骼系统发育及生殖系统发育有关基因(P<0.01);MTX实验组和正常对照组差异基因显著性富集pathway集中在MAPK信号通路、细胞骨架调控、Rap1信号通路等(P<0.01)。结论 叶酸缺乏能够引起mESC基因组染色质开放性结构变化,涉及器官形成、细胞周期调控等重要发育基因及生理代谢通路相关基因,可能引起后续基因表达调控改变。 展开更多
关键词 染色质开放性测序技术 开放染色质 叶酸 胚胎干细胞
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感受罗马的公共交通
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作者 欧阳广范 《城市公交规划与管理》 2003年第1期43-44,共2页
关键词 罗马 公共交通 意大利 atac公交公司
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