N-乙酰半胱氨酸对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对氟诱导雄性大鼠海马细胞凋亡及ATF-6蛋白表达的影响。方法:选用4~5周龄雄性健康SD大鼠48只,随机分为对照组、Na F组、Na F+NAC组和NAC组,每组12只,灌胃染毒7周后处死动物,进行海马体质量和海马组织氟含量的测定,采用TUNEL法检测大鼠海马细胞凋亡情况,采用免疫组化法检测大鼠海马组织中ATF-6蛋白的表达情况。结果:Na F可减少海马体质量;NAC可增加海马体质量(P<0.001)。Na F可升高海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001);NAC可降低海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和ATF-6蛋白相对表达量(P<0.001)。Na F和NAC对海马体质量、海马组织氟含量、海马细胞凋亡指数和海马组织中ATF-6蛋白相对表达量的交互作用差异有统计学意义(P<0.001)。结论:NAC能够保护海马细胞避免Na F引起的凋亡,也能拮抗Na F诱导的ATF-6蛋白表达上调。

内质网应激中ATF-6调控细胞凋亡及相关疾病

许多异常反应都会引起内质网应激,进而激活未折叠蛋白反应。当未折叠反应仍不能缓解内质网蛋白负荷时,就会通过多条途径引起细胞凋亡,并引起相关疾病,如糖尿病,躁郁症,神经退行性疾病和创伤后应激反应PTSD等。该文主要论述活化转录因子6在ER应激中调控细胞凋亡的机制以及引起的相关疾病。

四君子汤含药血清对IEC-6细胞增殖多胺/HuR信号通路的影响

目的研究四君子汤(Sijunzi decoction-containing serum,)对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖多胺/HuR信号通路生长相关基因蛋白表达及细胞周期的影响,探讨其对肠黏膜损伤修复的机制。方法SD大鼠制备四君子汤含药血清(Sijunzi decoction-containing serum,SJZD),免疫荧光法及免疫印迹法分析HuR蛋白在胞浆及胞核表达情况,RT-PCR法检测激活转录因子2(activating transcription factor-2,ATF-2),JunD,周期蛋白依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达,免疫印迹法检测HuR、ATF-2、JunD及CDK4蛋白表达,流式细胞仪分析细胞周期分布。结果与空白组比较,SZJD组ATF-2及JunD mRNA及蛋白表达降低,CDK4 mRNA及蛋白表达升高,G_(0)/G_(1)期细胞占比减少,S期细胞占比增加;α-二氟甲基鸟氨酸(DFMO)组细胞核HuR蛋白水平减少,细胞浆HuR蛋白水平增加,ATF-2及JunD mRNA及蛋白表达上调,Cdk4 mRNA及蛋白表达下调,G_(0)/G_(1)期细胞占比增加,S期细胞占比减少;SJZD组可拮抗DFMO的上述作用。结论SJZD作用于肠上皮细胞多胺/HuR信号通路,影响生长相关基因蛋白ATF-2、JunD及CDK4表达,可能是其促进肠黏膜损伤修复的机制之一。

人参皂苷Rg1通过Sestrin2保护心肌细胞的作用

目的研究人参皂苷Rg1(G-Rg1)对抗心肌缺血再灌注损伤中Sestrin2的作用及相关机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,按实验要求随机分5组,分别为对照组,缺氧复氧组,G-Rg1组,缺氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1,HIF-1,HIF-1α)抑制剂组,Sestrin2 siRNA干扰组。流式细胞术检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量。蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α、Sestrin2、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)、活化转录因子6(the activating transcription factor6,ATF-6)和跨膜蛋白激酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE-1)蛋白表达。免疫荧光法检测Sestrin2、HIF-1α、IRE-1蛋白表达。结果与对照组相比,缺氧复氧组细胞内ROS水平、HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与缺氧复氧组相比,G-Rg1组细胞内ROS水平明显降低(P<0.05),HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与G-Rg1组比较,HIF-1α抑制剂组心肌细胞内ROS水平升高,Sestrin2蛋白表达明显下调(P<0.05);与G-Rg1组比较,siRNA干扰组心肌细胞内ROS水平升高,IRE-1表达明显升高(P<0.05)。结论G-Rg1通过上调Sestrin2表达,保护缺氧复氧心肌细胞,并维持内质网应激平衡稳态。

弥漫大B细胞淋巴瘤中ATF-2的表达及意义

目的:探索活化转录因子2(Activating Transcription Factor-2,ATF-2)在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达,并分析其与临床特征的关系。方法:收集79例弥漫大B细胞淋巴瘤病理标本,应用免疫组织化学染色方法检测ATF-2蛋白表达。分析ATF-2蛋白表达程度与弥漫大B细胞淋巴瘤患者临床特征之间的关系。结果:ATF-2蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤中表达的阳性率为81.0%(64/79)。结合临床病理特征,ATF-2的表达与性别、年龄、临床分期、免疫表型、EBV感染、LDH、Ki-67、CyclinD1和Bcl-2的表达无显著性差异(P>0.05);ATF-2与Bcl-6共表达率62.0%(49/79),ATF-2的表达Bcl-6正相关(P<0.05);ATF-2表达越高,患者的生存时间越短(P<0.05)。结论:ATF-2与bcl-6呈正相关关系,查询基因库碱基序列提示,Bcl-6具有与ATF-2的CRE元件结合的CRE序列,生物学信息提示在DLBCL中ATF-2可能与Bcl-6蛋白结合;ATF-2高表达的弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后不良,提示ATF-2可能是弥漫大B细胞淋巴瘤独立的预后因子。

醋酸钠对氧糖剥夺损伤后PC12的影响

目的:通过OGD/R处理PC12细胞,证明NaAc在人类缺血性脑卒中中的作用和意义。方法:OGD模型的建立:用无氧糖培养液处理PC12细胞作为脑缺血再灌注损伤的体外模型;使用CCK-8比色法检测OGD损伤后NaAc对PC12细胞的保护状况;使用免疫印迹法Western blot检测OGD损伤后的NaAc对PC12中ATF-6蛋白水平的影响。结果:OGD损伤后,补充浓度为6 mM的NaAc可增加PC12的存活率(n = 6, F = 70.10, P < 0.05);OGD损伤后,PC12中ATF-6的表达升高(t = 2.98, P < 0.05);向正常的PC12细胞补充NaAc后ATF-6表达降低(t = 3.11, P < 0.05);在损伤后的PC12细胞中添加浓度为6 mM的NaAc后,ATF-6的表达水平降低(n = 6, F = 2.09, P < 0.05)。结论:OGD损伤后,PC12中添加浓度为6 mM的NaAc是通过抑制ATF-6的表达来发挥神经保护作用。