食管癌细胞中沉默Survivin基因对ATG16L1表达的影响

目的探讨食管癌Eca109细胞中沉默生存素(Survivin,SVV)基因的表达对自噬相关蛋白ATG16L1表达的影响。方法使用雷帕霉素(rapamycin,RAPA)在Eca109细胞中诱导建立自噬模型;使用Survivin抑制剂YM155和Survivin-siRNA作用于自噬模型,采用免疫荧光法观察自噬体数量变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平,Western blot法检测LC3-Ⅱ、p62、Survivin、ATG16L1的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测Survivin与p62的作用关系。结果RAPA诱导Eca109细胞后,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高,p62蛋白的表达水平降低,同时细胞内自噬体数目增多。在RAPA组中ATG16L1mRNA和蛋白表达水平均升高。在细胞自噬模型中沉默Survivin表达后,Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平均降低。过表达Survivin能够显著抑制p62的启动子活性,下调p62的蛋白表达。结论沉默食管癌Eca109细胞中Survivin基因表达可以下调ATG16L1的表达,可能与Survivin靶向抑制p62有关。