繁殖期与非繁殖期麝鼠香腺中Atg2a和Atg9b基因转录水平分析

麝鼠是一种有很高经济价值的皮、香两用经济动物,其香腺发育机制至今未能阐明。本研究通过RT-qPCR检测繁殖期与非繁殖期麝鼠香腺中Atg2a和Atg9b基因的转录水平,结果显示非繁殖期两者转录水平分别约为繁殖期的43.7倍和16.6倍,提示麝鼠非繁殖期时香腺组织自噬水平增高。进而推测自噬机制在麝鼠非繁殖期香腺萎缩的过程中起到了重要的调节作用。

自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A和ATG9A表达观察

目的观察自噬诱导、抑制的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ATG2A、ATG9A表达变化。方法人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231分为4组,对照组加入DMEM培养液正常培养,Baf-A1组在DMEM培养液中加100 nmol/L的巴弗洛霉素A1(Baf-A1)进行自噬阻断,EBSS组加入Earle's平衡盐溶液(EBSS)进行饥饿诱导细胞自噬,EBSS+Baf-A1组在EBSS培养液中加入100 nmol/L的Baf-A1,四组均培养4 h。采用实时荧光定量(Q-PCR)法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA,采用WesternBlotting法检测各组细胞中ATG2A、ATG9A、P62、微管蛋白1轻链3(LC3)蛋白,计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ。结果与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A、ATG9A mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.05),且EBSS+Baf-A1组细胞中ATG9A mRNA相对表达量高于EBSS组(P均<0.05)。与对照组、Baf-A1组相比,EBSS组、EBSS+Baf-A1组细胞中ATG2A蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05);EBSS组细胞中ATG9A蛋白相对表达量均高于其余三组(P均<0.05);EBSS组细胞中P62蛋白相对表达量均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组P62蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.05);EBSS组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均低于其余三组(P均<0.05),EBSS+Baf-A1组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ均高于其余三组(P均<0.05)。结论EBSS成功诱导MDA-MB-231细胞发生自噬,饥饿诱导的MDA-MB-231细胞自噬过程中ATG2A、ATG9A mRNA和蛋白表达升高。