基于ATP生物发光法的文物霉变检测与应用研究

为研究判定ATP(adenosine triphosphate,三磷酸腺苷)生物发光法在文物表面霉菌污染检测中应用可行性、科学性及适用性,利用ATP生物发光法对文物表面50种霉菌的生物发光值进行检测;构建了7种常见霉菌及其混合菌的菌落总数值与ATP生物发光值的线性关系函数,并在对应线性关系下分析了预测菌落总数值与实际值的差异;进一步利用ATP生物发光法评价模拟染霉试样在香茅醛熏蒸处理前后的霉菌数量变化。结果显示:50株待测霉菌中90%霉菌均检出了生物发光值(RLU)。在不同培养条件下,青霉、曲霉、木霉、毛壳菌、枝孢菌以及其混合菌的菌落总数对数值(lg^(CFU/mL))与生物发光对数值(lg^(RLU))之间均呈现了良好的线性关系,相关系数R^(2)>0.9817;在相应的线性关系下,预测的菌落总数值与实际平板计数的菌落总数值具有一致性(P<0.05),说明ATP生物发光法可以对文物表面霉菌进行准确相对定量。此外,香茅醛熏蒸处理组和对照组文物表面霉菌的生物发光值和菌落总数呈现了相同的差异变化趋势,说明ATP生物发光法可以直接用于熏蒸剂抑菌效力的评价。因此,ATP生物发光法在文物霉变检测中具有很高的适用性,同时在文物霉变程度分析及霉变文物消杀处理的效果评价等方面具有良好的应用价值,可为文物微生物病害的防控提供有效的技术支持。

采用ATP生物发光法分析6株常见细菌ATP含量差异

以ATP生物发光法为基础,辅以国标平板计数法,分析和测定了大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、乳酸链球菌、乳酸片球菌等6株常见细菌中ATP含量的差异。结果显示:当单位体积菌悬液的ATP荧光值相同时,6株细菌菌落总数无明显差异;当菌悬液的菌落总数相同时,6株细菌的单位体积菌悬液ATP含量无明显差异。研究结果同时说明ATP生物发光法能够定量测定常见区域中的细菌总数。

应用ATP荧光法监测腔镜器械清洗各环节的效果分析

目的应用ATP生物荧光法监测评价腔镜器械清洗各环节的质量效果。方法随机抽取2009年7～8月进行腹腔镜胆囊切除和卵巢手术所使用的腔镜器械,用简单随机抽样法(抽签法)抽取30套腔镜器械,包括:目镜、分离钳及管腔、5mm穿刺器各30件。按国家卫生部《内镜清洗消毒技术操作规范(2004年版)》及《中华人民共和国卫生行业标准》的要求进行清洗。在清洗前、初步冲洗后、酶液浸泡刷洗后、超声清洗后、干燥后,分别采用ATP生物荧光测试管中专用棉拭子沾湿无菌水进行取样,测定相对光单位值(RLU),评价清洗各环节的质量效果。结果清洗前不同腔镜部件的RLU值差异有显著意义(χ2=11.265,P=0.000),其中操作钳齿RLU值最高。初洗后有6件目镜测得RLU值比初洗前增高;有16件(17.8%)在超声清洗后测得的RLU值比酶液浸泡刷洗后测得的RLU值增高;人工干燥的45件器械(目镜除外)有2件(4.4%)在干燥后测得的RLU值比超声清洗后测得的RLU值增高;目镜在干燥后测得的RLU值均比酶洗后测得的RLU值降低;机械干燥的45件腔镜器械中,5mm穿刺器有3例(6.7%)在干燥后测得的RLU值比超声清洗后测得的RLU值增高。完成清洗干燥程序后与清洗前比较,4种不同腔镜部件的RLU值均减少,差异有显著意义(P<0.05)。结论 ATP生物荧光法应用于动态监测腔镜器械清洗的各环节具有良好可行性,有利于及时发现清洗过程中存在的问题,提高清洗质量。

ATP生物发光法快速测定物体表面的菌落总数

以大肠埃希氏菌作为指示菌考量了ATP生物发光法测定物体表面卫生状况的准确性,并在实验室内模拟食品企业卫生管控,采用ATP生物发光法对具有代表性的台面进行细菌总数测定,与国家标准微生物检测方法进行了比对分析。结果显示:大肠埃希氏菌的ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2为0.982 6;以实验室内指定台面作为盲样进行对比测定,其ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2达到0.915 9,说明ATP生物发光法能够准确评估和测定物体表面的卫生状况。

ATP生物发光法检测布拉氏酵母菌总数的研究

利用ATP生物发光法建立了布拉氏酵母菌与相对发光值的定量线性模型,对比研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和苯扎溴铵(BAB)两种提取剂在不同的浓度、提取时间下对酵母菌相对发光值的影响。结果表明,浓度为0.015%CTAB作用时间4min的提取效果最好。同时,对检出的RLU值的对数值与菌落总数的对数值作统计学线性相关分析发现,R^2=0.9919,具有统计学意义。ATP生物发光法对布拉氏酵母菌的最低检测限是10~3cfu/mL。

优化的ATP生物发光法快速检测面粉中细菌总数

[目的]建立一种快速检测面粉中细菌总数的方法。[方法]采用优化的ATP生物发光法检测面粉中的细菌总数,考察D-荧光素(Ln)浓度、萤火虫荧光素酶(FL)浓度、Mg2+浓度对生物发光反应的影响。[结果]Ln浓度为70 mg/L,FL浓度为50 mg/L,Mg2+浓度为0.250 0 mmol/L时,ATP生物发光法的测定结果较理想。该法最低检测细菌总数为1.0×103cfu/ml,与传统的平板计数法具有良好的相关性(P>0.05),RSD为4.0%。[结论]优化的ATP生物发光法成本低、操作简便、反应迅速、准确可靠,能快速检测出食品中的细菌总数。

ATP荧光微生物快检法中不同材质及孔径微孔滤膜细菌截留效果的评价

在相同的操作条件下考察了直径13 mm的混合纤维素酯膜、聚碳酸酯膜、醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜等4种常用微孔滤膜对细菌的截留能力。以细菌总数含量为10 CFU/m L的水样为待测样品,过滤体积为50m L,过滤测定5次。当孔径为0.22μm时,4种滤膜的平均截留率依次为100%、94%、84%和72%;当孔径为0.45μm时,4种滤膜的平均截留率依次为92%、82%、70%和70%。因此,孔径为0.22μm的混合纤维素酯膜对细菌的截留效果最好。以该滤膜过滤细菌总数含量为42 CFU/m L、20 CFU/m L、10 CFU/m L、4 CFU/m L的水样各50 m L,然后以ATP生物发光法测定膜上细菌,所得ATP荧光值与细菌浓度的线性相关系数R2>0.9,线性相关性较好。结果显示,0.22μm的混合纤维素酯膜能够满足ATP生物发光法对微菌含量样品的富集测定要求。

分析藻类ATP估算生物量

ATP测定技术的建立,为研究海水中浮游植物生物量提供了可靠的技术和保证,成为估算海洋浮游植物现存生物量的重要手段之一,同时,生物体内ATP的水平也可以作为环境污染程度的一个重要生化指标、国外ATP的分析技术在海洋生物学、生态学和水污染监测研究上发展迅速,我国近年来也开始应用,并有所进展,本工作采用ATP化学发光法、^(14)C同位素示踪法和叶绿素等多种测定方法,在实验室条件下对三角褐指藻(Phaeodactylum tricor-

肉品新鲜度的ATP生物发光法检测研究

目的:研究ATP生物发光法用于肉品新鲜度检测和肉品质量评价的可行性。方法:以新鲜现宰泥鳅作为评估对象,用体细胞ATP提取剂ST提取肉类细胞ATP,通过生物发光法检测肌肉的发光脉冲值随时间变化的关系,通过该发光试剂的回归方程推算出ATP含量随时间变化的关系。结果:随着死亡时间的延长,肌肉中的ATP含量缓慢下降达到最低值后再开始回升。肌肉中ATP含量变化与死亡时间、保存温度及肌肉所处状态有关。结论:通过生物发光法可检测肉品的ATP含量随时间变化的关系,结合感官检查,可以评价肉品新鲜度、质量。具有简单、快速、可靠的优点。

ATP生物发光法在快速检测物体表面清洁度中的应用

[目的]建立一种快速、准确检测物体表面清洁度的方法。[方法]以ATP生物发光微生物检测技术为指导,提取重组的萤火虫荧光素酶并配制成荧光反应试剂,测定其与ATP发光反应值的线性关系;根据ATP含量与细菌数量成正比例关系原理,测定物体表面ATP发光强度值,同时用国标平皿计数法测定其菌落总数,两者对比分析。[结果]ATP生物发光法检测的相对荧光值与物体表面的菌落总数存在良好的线性相关性,利用ATP发光法实时检测细菌总数可以很好地弥补国标法的不足。[结论]ATP生物发光法与传统的细菌总数国标平板计数法相比较具有操作简便、快速灵敏、成本低廉、绿色环保等优点,可以快速、准确地检测物体表面清洁程度。

ATP发光法在纺织品抗菌防霉性能测试中的应用

近年来,纺织品抗菌测试手段得到了长足的发展,但是由于种种技术条件的限制,传统的纺织品抗菌测试方法仍暴露出了诸多弊端,因此,新的检测方法的探索势在必行。ATP发光法作为非传统的抗菌测试手段,相对于传统测试方法具有方便快捷、准确度高、时效性强等诸多优点,在其他工业领域已得到了广泛应用。文章阐述了ATP发光法的试验原理及其发展历程,探讨了此法应用于纺织品抗菌性能检测的优越性及发展方向,从而论证了ATP发光法用于纺织品抗菌性能测试的可行性,将ATP发光法应用于纺织品的抗菌防霉效果测试具有重要的研究价值和现实意义。

页岩气生产液细菌计数方法对比研究

针对部分油气田服务企业以平板计数法、ATP荧光快速检测法代替绝迹稀释法(MPN)进行页岩气生产液中细菌含量检测的现象,将这三种细菌计数方法对相同样品的测定结果进行了对比研究。平板计数法与ATP荧光法操作均比MPN法简便,但是对于页岩气生产液,这两种方法均存在检测出的细菌类型不明确、计数结果不准确、线性关系差等缺点。平板计数法检测出的细菌主要为好氧或耐氧菌腐生菌,无法检测和鉴别与腐蚀密切相关的硫酸盐还原菌。ATP荧光法通过总菌的ATP含量换算得到细菌含量,该法目前更多用于医疗与食品行业的限制类细菌含量的快速检测,尚无明确标准可依,且无法区分菌体的死活。而MPN法可通过鉴别培养基将与腐蚀相关的硫酸盐还原菌(SRB)、铁细菌(IB)和腐生菌(TGB)分别培养后计数,且其检测限远低于另外两种方法,因此更适用于页岩气生产液中特定腐蚀菌种的检测。

熔盐法制备Fe_2O_3-ATP及零价汞催化氧化性能研究

采用熔盐法合成特殊网状结构的氧化铁改性凹凸棒土催化剂(Fe_2O_3-ATP),在模拟烟气条件下考察了100~260℃催化剂的Hg^0氧化性能。结果表明,220℃下,Fe_2O_3-ATP的Hg^0氧化效率为90.30%。此外,烟气成分对于Hg^0氧化影响较大,Cl2是促进Hg^0氧化最有效的烟气成分。

应用ATP生物荧光法评价部队食堂餐厨具卫生状况

目的比较ATP生物荧光法和大肠菌群纸片法在评价餐厨具卫生状况时是否存在差异。方法采用整群随机抽样的方法,对某部74个餐饮服务单位的餐厨具应用ATP生物荧光法检测,现场读取其相对发光单位(RLU)值,RLU值<100为合格,≥100不合格;同时对同一餐厨具样品依据GB 14934-94《食(饮)具消毒卫生标准》大肠菌群纸片法进行检测和结果判定,采用Kappa统计学方法评价2种方法检测结果的一致性。结果共检测分餐盘74件、碗74件、筷子64件、熟食刀44件、熟食板47件、打菜盒47件,计350件。其用ATP生物荧光检测其合格率分别为75.7%、85.1%、46.9%、47.7%、34.0%和55.3%;用大肠菌群纸片法检测其合格率分别为81.1%、82.4%、64.1%、52.3%、46.8%和55.3%;2种方法对分餐盘、碗、筷子、熟食刀、熟食板、打菜盒6类餐具检测结果的一致性,即Kappa值分别为0.656、0.702、0.539、0.546、0.566、0.602,其中分餐盘、碗和打菜盒3类表面光滑餐具的Kappa值高于筷子、熟食刀和熟食板。结论 2种方法对于评价部队食堂餐具卫生状况的结果尚不具高度一致性,建议探讨建立两者之间可以互相参照的标准。

ATP生物荧光法在食品微生物检验上的应用

ATP生物荧光法自20世纪50年代开始研究，到了90年代已日趋成熟。由于其快速、灵敏、价廉的特点，现已广泛应用于食品生产清洁度及细菌数量的检测。

中药胃肠舒对胃肠平滑肌细胞ATP生成的影响

目的:研究胃肠舒对胃肠平滑肌细胞动能的影响.方法:胃肠平滑肌细胞离体培养,分为5组:空白对照组、西沙必利组(0.51 g/L)、胃肠舒Ⅰ组(25 g/L)、胃肠舒Ⅱ组(50 g/L)、胃肠舒Ⅲ组(75 g/L),采用Celltiter-GloTM法和Rhodamine fluorescence法分别检测胃肠舒对胃肠平滑肌细胞ATP和线粒体跨膜电位的的影响.结果:胃肠舒作用24h后与对照组和西沙必利组相比能显著增高平滑肌细胞ATP的含量.随着胃肠舒用药浓度的增加改变ATP的含量也加大(P<0.05).流式细胞仪结果表明,胃肠舒明显加大了胃肠平滑肌细胞的线粒体跨膜电位,并且随着胃肠舒用药浓度的增加,跨膜电位的增加也越大.结论:胃肠舒可能通过改变胃肠平滑肌细胞的动能促进胃肠运动.

基于组合赋权法分析后续回击对线路反击跳闸影响研究

为探究后续回击对500 kV输电线路反击跳闸率的影响,文章统计出后续回击的次数及雷电流幅值的分布规律。通过组合赋权法分析了不含后续回击的首次回击、含后续回击的首次回击及后续回击的次数和雷电流幅值对线路反击跳闸的影响。根据后续回击次数与雷电流幅值在反击跳闸的影响比重,确定后续回击次数是线路反击跳闸的主要影响因素。根据组合赋权法分析结果,提出了一种考虑后续回击的反击闪络模型,通过ATP-EMTP模型分析后续回击对反击耐雷水平的影响。仿真结果可知:首次回击未跳闸时,考虑后续回击线路的反击耐雷水平会降低,降低程度与导线工频电压周期有关,平均降低原反击耐雷水平的36.4%。仿真结果和理论分析结果一致,可为输电线路运维和防雷设计提供有效的理论支撑。

ATP的分析方法综述

本文综述了当前的ATP分析方法 ,比较了各方法的分析原理 ,优缺点及使用范围。

ATP生物荧光法快速评价灭菌外科缝合包的质量分析

目的探讨ATP生物荧光法快速评价外科缝合包的灭菌质量效果。方法采用分层随机抽样法,对2015年8月至2016年4月我院外科使用的160个外科缝合包进行灭菌质量分析,每个样品高压蒸汽灭菌取样后分为2份,分别采用ATP生物荧光法与菌落计数检测评价灭菌效果。结果 160个外科缝合包经过消毒后,菌落计数法检测合格159个,合格率为99.4%,ATP生物荧光法检测合格158个,合格率为98.8%,两两对比差异无统计学意义(P>0.05)。菌落计数法的菌落计数范围为0~34cfu,平均为(1.89±0.34)cfu,ATP生物荧光法的ATP值为3~223RUL,平均为(15.30±4.29)RUL。直线相关性分析显示菌落数的对数值与ATP值的对数值之间呈直线关系(P<0.05),直线相关方程为y=1.0576x-6.6518,R2=0.9982。菌落计数法对外科缝合包的消毒检测平均时间为(32.14±4.20)h,而ATP生物荧光法检测时间为(4.20±1.45)h,两两对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ATP生物荧光法能快速评价外科缝合包的灭菌质量,也能有效反映缝合包的菌落数,从而为医院的消毒效果提供有效、快速的检测指标。

ATP发光法快速鉴定非结核分枝杆菌的可行性评估

目的通过与罗氏菌型鉴定法和BD960菌型鉴定法的比较,判断三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)发光法在实际运用过程中的可行性。方法运用三种鉴定方法同时对69例临床菌株进行检测,并对结果进行比较,分析ATP发光法的优缺点。结果 1ATP发光法的准确率为98.6%(68/69),与BD960法相同,比罗氏法的95.7%(66/69)略高;2ATP发光法的检测时间比罗氏法快了很多,差异有显著性(t=54.94,P<0.001);略快于BD960法,差异无显著性(t=0.003,P=0.957);3ATP发光法检测只需要一台小型的Hygiena PI-102检测仪,价格便宜操作简便,常规实验室均可开展。结论 ATP发光法鉴定非结核分枝杆菌快速简便、准确率高且成本低,在减少非结核分枝杆菌感染患者的误诊和误治中一定能起到关键性作用。