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结核分枝杆菌ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1基因的原核表达
被引量:
1
1
作者
张春燕
杨春
+3 位作者
李岱容
穆柳青
杨静
冯鑫
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013年第6期792-794,803,共4页
目的构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1(ATP-dependent Clp proteolytic subunit 1,ClpP1)基因重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达重组蛋白。方法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DN...
目的构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1(ATP-dependent Clp proteolytic subunit 1,ClpP1)基因重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达重组蛋白。方法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中PCR扩增ClpP1基因,插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1,转化大肠埃希菌B21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1经双酶切和测序鉴定,证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约35 000,可与鼠抗His单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1,并在大肠埃希菌中表达了重组蛋白,为进一步研究ClpP1蛋白在MTB中的生物学特性奠定了基础。
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关键词
结核分枝杆菌
atp依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1
原核细胞
基因表达
原文传递
题名
结核分枝杆菌ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1基因的原核表达
被引量:
1
1
作者
张春燕
杨春
李岱容
穆柳青
杨静
冯鑫
机构
重庆医科大学病原生物学教研室
重庆医科大学神经科学研究中心
重庆医科大学附属第一医院呼吸科
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013年第6期792-794,803,共4页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(81101216)
文摘
目的构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1(ATP-dependent Clp proteolytic subunit 1,ClpP1)基因重组原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达重组蛋白。方法从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中PCR扩增ClpP1基因,插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1,转化大肠埃希菌B21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1经双酶切和测序鉴定,证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约35 000,可与鼠抗His单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了重组表达质粒pET-32a(+)-ClpP1,并在大肠埃希菌中表达了重组蛋白,为进一步研究ClpP1蛋白在MTB中的生物学特性奠定了基础。
关键词
结核分枝杆菌
atp依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1
原核细胞
基因表达
Keywords
Mycobacterium tuberculosis(MTB)
atp
-dependent caseinolytic protease proteolytic subunit
1
Prokaryotic cells
Gene expression
分类号
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
Q784 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
结核分枝杆菌ATP依赖的丝氨酸蛋白酶蛋白水解亚基1基因的原核表达
张春燕
杨春
李岱容
穆柳青
杨静
冯鑫
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013
1
原文传递
已选择
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参考文献
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