丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流变化的影响

目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrode液和模拟缺血液以及模拟缺血液加丹参(750 mg.L-1)灌流,利用膜片钳全细胞记录技术记录不同条件下动作电位和IK(ATP)前后变化。结果:①模拟缺血液灌流后动作电位时程(APD)复极化的50%(APD50)和90%(APD90)分别缩短(与正常组相比P<0.05,n=12);模拟缺血液加丹参灌流,APD50和APD90缩短更加明显,分别缩短了80.46%和71.87%(与正常组相比P<0.01,与模拟缺血液组相比P<0.05,n=12)。静息电位和动作电位幅值无明显改变;②经模拟缺血液灌流,引起IK(ATP)通道的开放,膜电流显示外向性直线形,发生率为58.33%(7/12,P<0.05)。模拟缺血液加丹参,更容易引起IK(ATP)开放,膜电流曲线完全成为直线,诱发率为91.67%(11/12,与正常组和模拟缺血液组相比P<0.05);③Glibenclimide能使这种外向性直线形膜电流恢复为“N”形,证明这种膜电流为IK(ATP);经丹参作用后,改用正常Tyrode液冲洗,心肌细胞上结合的丹参可以被洗脱以及从模拟缺血液中得到恢复。结论:丹参能产生类似心肌缺预适应的病理生理过程,起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应,这可能是丹参对心肌缺血预适应的保护作用具有增强效应电生理基础。

氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流(I_(K·ATP))的影响

目的 :探讨氯胺酮对人单个心房肌细胞ATP敏感性钾电流 (IK·ATP)的影响 .方法 :取房缺或室缺修补术患者的右心耳组织 ,置于 1 0 0 %氧饱和的无钙心肌细胞保护液中 ,30min内送至实验室 .将标本剪成 1mm3 的小块 ,用二步酶解法分离出单个心房肌细胞 .采用膜片钳全细胞记录方法 ,观察两种浓度氯胺酮对人单个心房肌细胞IK .ATP的影响 .结果 :在电极内液含ATP(0 .3mmol·L-1 )的条件下 ,记录到一束外向K+ 电流 .该电流可被KATP通道特异阻滞药格列苯脲 (1 0 μmol·L-1 )抑制 ,表明此电流为IK·ATP.在指令电位为 +2 0mV时 ,用含低浓度氯胺酮 (0 .0 1mmol·L-1 )的细胞外液灌流时 ,IK·ATP受到抑制 ,抑制率为 1 1 .1 % (n =3,P <0 .0 1 ) .用含高浓度氯胺酮(0 .1mmol·L-1 )的细胞外液灌流时 ,IK·ATP被大量激活 ,增加率为 5 7.6 % (n =3,P <0 .0 1 ) .结论 :低浓度氯胺酮 (0 .0 1mmol·L-1 )对人心房肌细胞IK·ATP具有抑制作用 ;高浓度氯胺酮 (0 .1mmol·L-1 )

ATP敏感性钾电流与蛋白激酶关系的研究

目的观察蛋白激酶A(PKA)及蛋白激酶C(PKC)抑制剂和蛋白脱磷酸化物质对大鼠心室肌细胞ATP敏感性钾电流 (IKATP)的影响 ,探讨克罗卡林 (cromakalim)开放ATP敏感性钾通道的作用机制。方法采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞IKATP。结果在37℃时克罗卡林 (1μmol·L-1)可阻断ATP的抑制作用 ,诱导出IKATP。PKA抑制剂PKI(6～22)amide (1μmol·L -1),可模拟克罗卡林的作用 ,激活IKATP;而PKC抑制剂calphosticC无此作用。同时还观察到蛋白脱磷酸化物质butanedioemonoxime(BDM,5mmol·L -1)也可诱发出IKATP。结论克罗卡林开放IKATP 机制与抑制PKA的活性有关 ,而与PKC无关。

牛磺酸对豚鼠心室肌细胞膜ATP敏感性钾电流的影响

应用100%纯氮饱和灌流液建立低氧模型和膜片钳全细胞记录技术,研究牛磺酸对单个豚鼠心室肌细胞膜上ATP敏感性钾电流IKATP的影响。结果表明:牛磺酸具有抑制豚鼠心室肌细胞膜上ATP敏感钾通道KATP开放的作用。从而推测出低氧心肌细胞内牛磺酸的耗竭,可能是促使KATP通道开放的机制之一。

异丙酚对兔缺血缺氧性心室肌细胞ATP敏感性钾通道电流的影响

异丙酚具有抗缺血再灌注损伤的作用,但机制尚不清楚,本研究采用膜片钳技术观察异丙酚对缺血缺氧心室肌细胞K_(ATP)通道电流(ATP sensitiv potassium current,I_(KATP))的影响,以探讨异丙酚对缺血缺氧心肌作用的机制。

病理生理学

硫化氢对大鼠离体灌流心脏心功能的影响；我国辽宁地区遗传性粘多糖贮积症Ⅰ型患者α-L-艾杜糖醛酸酶基因突变的研究；自身免疫反应参与大鼠急性心肌梗死后心肌损伤的实验研究；细胞外信号调节的蛋白激酶对糖尿病大鼠心肌缺血预处理的影响；丹参在常氧、急性低氧及氧反常等条件下对心室肌细胞L-Ca电流的影响；牛磺酸对低氧条件下豚鼠心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流的影响；LPS对鼠肺微血管内皮细胞水通道蛋白-1表达及其功能的影响；磷酸化ERK1／2对大鼠体外血小板聚集的可能作用；PKC和MMPs在实验性大鼠动脉粥样硬化形成中的作用及丹参的作用机制；活化蛋白-1和cAMP反应元件结合蛋白在脂多糖注射大鼠肺组织中的变化及地塞米松的影响；急性多发脑梗塞大鼠海马皮层MARCKS蛋白的表达与活性的变化；靶向腺病毒载体介导的EGFP基因在甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异表达；胰腺癌中MAT1蛋白的表达与其临床病理特征的关系；脑血清对EP性发热家兔下丘脑及脑脊液cAMP含量的影响；三丁基过氧化氢诱导WI-38细胞衰老的细胞周期调控机制；复方黄芪提取物抗急性肝损伤作用的研究；不同年龄高血压大鼠心肌中MKP-1的表达及对心肌肥厚的影响；苯丙氨酸缓解高血压大鼠血管重塑；一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对脑缺血大鼠脑组织氨基酸含量的影响；左旋卡尼汀对缺氧／复氧诱导的子鼠心肌细胞凋亡的影响；自体骨髓基质干细胞移植治疗兔缺血心肌的实验研究；PGI2对肾缺血再灌损伤兔肠系膜微循环和血液流变性的影响；一氧化氮合酶2抑制剂对大鼠心肌梗死后左心室形态及心功能的影响；实验性肺鳞癌中不同亚型蛋白激酶C表达的研究；兔骨髓间充质干细胞自体移植治疗扩张型心肌病的实验研究；高敏C反应蛋白与代谢综合征组分及靶器官损害的关系；血管内皮祖细胞对缺血肢体血管生成的影响；心血管危险因素与小动脉弹性的关系；实验性心房颤动血栓形成时内皮型一氧化氮合酶和纤溶酶原激活剂抑制物-1的变化；重症高血压大鼠左心室肥厚时肾上腺髓质素系统的上调；冠心病患者血管内皮功能障碍与动脉弹性关系的研究；骨髓增生异常综合征细胞周期调控基因表达谱的研究；血管内皮生长因子反义寡核苷酸增强髓系白血病细胞对三尖杉酯碱敏感性；急性白血病视网膜母细胞瘤相关蛋白46基因和蛋白表达谱的变化及意义；血栓性血小板减少性紫癜思者血管内皮细胞标志物和溶血参数的动态分析及其临床意义；白血病患者血管新生及相关因素研究；氯通道阻断剂对血小板胞浆游离钙和血小板聚集的影响；CD44s的表达与胶质瘤分级的关系。

伊立替康与4-氨基吡啶联合应用对人结直肠癌细胞增殖作用的影响

目的研究肿瘤化学治疗药物伊立替康（CPT-11）对人结直肠癌细胞株HT-29细胞的作用及对钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶（4-AP）的影响，并探讨其抗HT-29细胞的可能机制。方法CPT-11、4-AP以及两药联合应用对HT-29细胞增殖及细胞侵袭力的影响分别用MTT比色法和Transwell法检测。用流式细胞术膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素碘化丙啶双染法检测上述两种药物对HT29细胞凋亡的影响。用膜片钳方法检测ATP敏感性钾电流（IKATP）的电流变化。结果1．0～64．0μg／ml CPT-11可呈剂量依赖性和时间依赖性地抑制HT-29细胞增殖，而1．0mmol／L的4-AP可使CPT-11的作用增强。16．0μg／mlCPT-11和1．0mmol／L4-AP单独应用均可明显诱导HT-29凋亡、抑制HT29细胞侵袭力，而两药联合应用能明显增加上述诱导凋亡和抑制侵袭力的作用。不同浓度CPT-11可剂量依赖性地降低细胞膜IKATP水平，呈剂量依赖负相关性。结论CPT-11抑制人结直肠癌HT-29细胞增殖和侵袭力、诱导细胞凋亡等作用可被4-AP协同增强，可能机制与CPT-11抑制ATP敏感性钾通道开放有关。